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二甲双胍通过激活AMPK通路降低同型半胱氨酸对内皮细胞的损伤

摘要第3-6页
ABSTRACT第6-9页
中英文缩略词第12-14页
第1章 前言第14-17页
第2章 实验材料和方法第17-30页
    2.1 实验材料第17-19页
        2.1.1 实验所用细胞第17页
        2.1.2 主要试剂和药品第17-18页
        2.1.3 实验主要仪器第18-19页
    2.2 试验方法第19-29页
        2.2.1 实验器材的准备第19页
        2.2.2 相关液体的配置第19-22页
        2.2.3 血管内皮细胞培养、细胞计数第22页
        2.2.4 CCK-8 检测细胞活性第22-24页
        2.2.5 乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒测定细胞的 LDH 活性第24页
        2.2.6 超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒测定细胞的总 SOD 活性第24页
        2.2.7 微量丙二醛(MDA)试剂盒测定细胞的 MDA 水平第24-25页
        2.2.8 GSH-PX 试剂盒测定细胞的 GSH-PX 活力第25页
        2.2.9 RNA 提取第25-26页
        2.2.10 qRT-PCR 检测人血管内皮细胞株相关基因的表达第26-27页
        2.2.11 蛋白质的提取及储存第27页
        2.2.12 使用 Bradford 方法测定蛋白浓度第27-28页
        2.2.13 Western blot 方法检测 p-AMPKα及 t-AMPKα蛋白的表达第28-29页
    2.3 统计学方法第29-30页
第3章 结果第30-41页
    3.1 人血管内皮细胞(EC304)生长特点第30页
    3.2 CCK-8 检测细胞活性第30-32页
        3.2.1 单纯同型半胱氨酸对血管内皮细胞活性的影响第30-31页
        3.2.2 单纯二甲双胍对血管内皮细胞活性的影响第31-32页
        3.2.3 二甲双胍对加入同型半胱氨酸后的血管内皮细胞活性的影响第32页
    3.3 细胞 LDH 活性检测第32-33页
    3.4 细胞 MDA 水平第33-34页
    3.5 细胞总 SOD 活力检测第34页
    3.6 细胞 GSH-PX 活力检测第34-35页
    3.7 qRT-PCR 检测相关基因的表达第35-39页
        3.7.1 SODmRNA 表达第35-36页
        3.7.2 CATmRNA 表达第36-38页
        3.7.3 NADPHmRNA 表达第38-39页
    3.8 p-AMPKα及 t-AMPKα蛋白在血管内皮细胞中的表达第39-41页
第4章 讨论第41-44页
第5章 结论第44-45页
    5.1 结论第44页
    5.2 不足与展望第44-45页
致谢第45-46页
参考文献第46-49页
综述第49-53页
    参考文献第51-53页

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