摘要 | 第3-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
中英文缩略词 | 第12-14页 |
第1章 前言 | 第14-17页 |
第2章 实验材料和方法 | 第17-30页 |
2.1 实验材料 | 第17-19页 |
2.1.1 实验所用细胞 | 第17页 |
2.1.2 主要试剂和药品 | 第17-18页 |
2.1.3 实验主要仪器 | 第18-19页 |
2.2 试验方法 | 第19-29页 |
2.2.1 实验器材的准备 | 第19页 |
2.2.2 相关液体的配置 | 第19-22页 |
2.2.3 血管内皮细胞培养、细胞计数 | 第22页 |
2.2.4 CCK-8 检测细胞活性 | 第22-24页 |
2.2.5 乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒测定细胞的 LDH 活性 | 第24页 |
2.2.6 超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒测定细胞的总 SOD 活性 | 第24页 |
2.2.7 微量丙二醛(MDA)试剂盒测定细胞的 MDA 水平 | 第24-25页 |
2.2.8 GSH-PX 试剂盒测定细胞的 GSH-PX 活力 | 第25页 |
2.2.9 RNA 提取 | 第25-26页 |
2.2.10 qRT-PCR 检测人血管内皮细胞株相关基因的表达 | 第26-27页 |
2.2.11 蛋白质的提取及储存 | 第27页 |
2.2.12 使用 Bradford 方法测定蛋白浓度 | 第27-28页 |
2.2.13 Western blot 方法检测 p-AMPKα及 t-AMPKα蛋白的表达 | 第28-29页 |
2.3 统计学方法 | 第29-30页 |
第3章 结果 | 第30-41页 |
3.1 人血管内皮细胞(EC304)生长特点 | 第30页 |
3.2 CCK-8 检测细胞活性 | 第30-32页 |
3.2.1 单纯同型半胱氨酸对血管内皮细胞活性的影响 | 第30-31页 |
3.2.2 单纯二甲双胍对血管内皮细胞活性的影响 | 第31-32页 |
3.2.3 二甲双胍对加入同型半胱氨酸后的血管内皮细胞活性的影响 | 第32页 |
3.3 细胞 LDH 活性检测 | 第32-33页 |
3.4 细胞 MDA 水平 | 第33-34页 |
3.5 细胞总 SOD 活力检测 | 第34页 |
3.6 细胞 GSH-PX 活力检测 | 第34-35页 |
3.7 qRT-PCR 检测相关基因的表达 | 第35-39页 |
3.7.1 SODmRNA 表达 | 第35-36页 |
3.7.2 CATmRNA 表达 | 第36-38页 |
3.7.3 NADPHmRNA 表达 | 第38-39页 |
3.8 p-AMPKα及 t-AMPKα蛋白在血管内皮细胞中的表达 | 第39-41页 |
第4章 讨论 | 第41-44页 |
第5章 结论 | 第44-45页 |
5.1 结论 | 第44页 |
5.2 不足与展望 | 第44-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-49页 |
综述 | 第49-53页 |
参考文献 | 第51-53页 |