| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第1章 绪论 | 第9-17页 |
| 1.1 C1q 蛋白家族的分类与结构 | 第9-11页 |
| 1.1.1 分类 | 第9-10页 |
| 1.1.2 结构 | 第10-11页 |
| 1.2 补体分子 C1q（Subcomponent q of C1） | 第11-13页 |
| 1.2.1 C1q 的结构 | 第11-12页 |
| 1.2.2 C1q 的功能 | 第12-13页 |
| 1.3 C1qlike 蛋白 | 第13-14页 |
| 1.4 ghC1q 蛋白（Globular head C1q protein） | 第14-15页 |
| 1.4.1 sghC1q 蛋白（Secreted globular head C1q protein） | 第14-15页 |
| 1.4.2 cghC1q 蛋白（Cellular globular head C1q protein） | 第15页 |
| 1.5 结语 | 第15-16页 |
| 1.6 本文研究意义 | 第16-17页 |
| 第2章 七鳃鳗 LC1qDC1 基因的分子克隆 | 第17-30页 |
| 2.1 材料 | 第17页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第17页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第17页 |
| 2.2 方法 | 第17-26页 |
| 2.2.1 引物设计 | 第17-18页 |
| 2.2.2 肝脏总 RNA 的提取 | 第18-19页 |
| 2.2.3 肝脏 cDNA 模板的制备 | 第19-21页 |
| 2.2.4 3'RACE 法扩增 LC1qDC1 cDNA 的 3'端序列 | 第21-23页 |
| 2.2.5 5'RACE 法扩增 LC1qDC1 cDNA 的 5'端序列 | 第23-25页 |
| 2.2.6 目的片段的回收 | 第25页 |
| 2.2.7 目的片段与载体连接与转化 | 第25页 |
| 2.2.8 阳性菌落的 PCR 鉴定 | 第25页 |
| 2.2.9 重组质粒的提取与测序 | 第25-26页 |
| 2.2.10 3'RACE 和 5'RACE 所得的序列拼接 | 第26页 |
| 2.3 结果 | 第26-28页 |
| 2.3.1 肝脏总 RNA 的提取 | 第26页 |
| 2.3.2 七鳃鳗 LC1qDC1 基因的 cDNA 全长扩增结果 | 第26-28页 |
| 2.4 讨论 | 第28-29页 |
| 2.5 小结 | 第29-30页 |
| 第3章 七鳃鳗 LC1qDC1 编码氨基酸序列生物信息学分析 | 第30-40页 |
| 3.1 分析所用的在线网站和软件 | 第30页 |
| 3.2 结果 | 第30-38页 |
| 3.2.1 一级结构分析 | 第30-33页 |
| 3.2.2 功能结构域预测 | 第33-34页 |
| 3.2.3 二级结构预测 | 第34-35页 |
| 3.2.4 三级结构模拟 | 第35页 |
| 3.2.5 同源序列比对 | 第35-36页 |
| 3.2.6 系统发育分析 | 第36-38页 |
| 3.3 讨论 | 第38-39页 |
| 3.4 小结 | 第39-40页 |
| 第4章 七鳃鳗 LC1qDC1 重组蛋白的原核表达及蛋白纯化 | 第40-47页 |
| 4.1 材料 | 第40页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第40页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第40页 |
| 4.2 方法 | 第40-43页 |
| 4.2.1 设计引物 | 第40页 |
| 4.2.2 PCR 扩增 | 第40-41页 |
| 4.2.3 目的片段回收 | 第41页 |
| 4.2.4 目的片段与载体连接与转化 | 第41-42页 |
| 4.2.5 重组蛋白的诱导表达条件摸索 | 第42页 |
| 4.2.6 重组蛋白可溶性鉴定 | 第42页 |
| 4.2.7 重组蛋白的纯化 | 第42-43页 |
| 4.2.8 蛋白浓度测定 | 第43页 |
| 4.3 结果 | 第43-46页 |
| 4.3.1 LC1qDC1pColdⅠ重组载体构建及测序 | 第43页 |
| 4.3.2 LC1qDC1pColdⅠ重组蛋白的诱导表达和纯化 | 第43-46页 |
| 4.4 讨论 | 第46页 |
| 4.5 小结 | 第46-47页 |
| 第5章 兔抗七鳃鳗 LC1qDC1 多克隆抗体制备及鉴定 | 第47-52页 |
| 5.1 材料 | 第47页 |
| 5.1.1 主要试剂 | 第47页 |
| 5.1.2 主要仪器 | 第47页 |
| 5.2 方法 | 第47-50页 |
| 5.2.1 免疫方法及免疫程序 | 第47-48页 |
| 5.2.2 ELISA 法检测抗体效价 | 第48-49页 |
| 5.2.3 抗体纯化 | 第49页 |
| 5.2.4 Western blot 鉴定兔多克隆抗体的特异性 | 第49-50页 |
| 5.3 结果 | 第50-51页 |
| 5.3.1 兔抗七鳃鳗 LC1qDC1 多克隆抗体的制备和效价测定 | 第50页 |
| 5.3.2 兔抗七鳃鳗 LC1qDC1 多克隆抗体的特异性测定 | 第50-51页 |
| 5.4 讨论 | 第51页 |
| 5.5 小结 | 第51-52页 |
| 第6章 七鳃鳗 LC1qDC1 蛋白的免疫相关研究 | 第52-60页 |
| 6.1 材料 | 第52页 |
| 6.1.1 主要试剂 | 第52页 |
| 6.1.2 主要仪器 | 第52页 |
| 6.2 方法 | 第52-54页 |
| 6.2.1 FACS 分析 LC1qDC1 在免疫小体中的表达 | 第52-53页 |
| 6.2.2 CLSM 确定 LC1qDC1 在免疫小体细胞中的亚细胞定位 | 第53-54页 |
| 6.2.3 免疫共沉淀分析 LC1qDC1 和 VLRB 的相互作用 | 第54页 |
| 6.2.4 CLSM 检测 LC1qDC1 和 VLRB 在靶细胞中的共定位 | 第54页 |
| 6.3 结果 | 第54-57页 |
| 6.3.1 FACS 分析 LC1qDC1 在免疫小体中的表达结果 | 第54-55页 |
| 6.3.2 CLSM 确定 LC1qDC1 在免疫小体细胞中的亚细胞定位结果 | 第55-56页 |
| 6.3.3 免疫共沉淀分析 LC1qDC1 和 VLRB 的相互作用结果 | 第56页 |
| 6.3.4 CLSM 检测 LC1qDC1 和 VLRB 在靶细胞中的共定位结果 | 第56-57页 |
| 6.4 讨论 | 第57-59页 |
| 6.5 小结 | 第59-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 本论文的创新点 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-65页 |
| 附录 A 不同物种的 C1qDC 氨基酸序列号 | 第65-66页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第66页 |
| 项目支持 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
