摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第1章 文献综述 | 第10-22页 |
1.1 背景概况 | 第10-12页 |
1.1.1 甘薯概况 | 第10-11页 |
1.1.2 紫肉甘薯来源 | 第11页 |
1.1.3 紫肉甘薯研究现状 | 第11-12页 |
1.2 植物耐受非生物胁迫基因工程改良 | 第12-16页 |
1.2.1 植物耐受非生物胁迫的需求 | 第12-13页 |
1.2.2 植物非生物胁迫的信号传导机制和耐受机制 | 第13-14页 |
1.2.3 基因工程改良对植物耐受非生物胁迫的方法和作用 | 第14-16页 |
1.2.4 新的研究方向和展望 | 第16页 |
1.3 甜菜碱等渗透小分子在植物耐受非生物胁迫中的作用 | 第16-19页 |
1.3.1 甜菜碱的性质 | 第16-17页 |
1.3.2 甜菜碱的耐受作用机制 | 第17-18页 |
1.3.3 甜菜碱合成途径及关键基因 | 第18-19页 |
1.4 甜菜碱醛脱氢酶研究相关背景 | 第19页 |
1.5 甜菜碱醛脱氢酶功能分析和改良实例 | 第19-22页 |
第2章 绪论 | 第22-24页 |
2.1 研究的目的和意义 | 第22页 |
2.2 研究范围和内容 | 第22页 |
2.3 技术路线 | 第22-24页 |
第3章 材料与方法 | 第24-38页 |
3.1 实验材料和试剂 | 第24-27页 |
3.1.1 植株材料 | 第24页 |
3.1.2 菌株和质粒材料 | 第24页 |
3.1.3 实验设备和仪器 | 第24页 |
3.1.4 实验试剂和耗材 | 第24-25页 |
3.1.5 培养基和常规实验试剂配置 | 第25-27页 |
3.2 常规实验方法和步骤 | 第27-30页 |
3.2.1 植物总RNA的提取和检测 | 第27-28页 |
3.2.2 琼脂糖凝胶电泳检测DNA扩增产物 | 第28页 |
3.2.3 目的条带的胶回收 | 第28页 |
3.2.4 中间载体构建(T载体连接) | 第28页 |
3.2.5 载体构建(酶切产物与工程质粒连接) | 第28页 |
3.2.6 感受态细胞的制备 | 第28-29页 |
3.2.7 T连接产物或重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞 | 第29页 |
3.2.8 质粒的抽提 | 第29-30页 |
3.3 IBBADH基因的克隆和分析 | 第30-38页 |
3.3.1 紫薯总RNA的提取和检测 | 第30页 |
3.3.2 以紫薯总RNA合成紫薯的第一链cDNA | 第30页 |
3.3.3 IbBADH基因全长CDS的克隆 | 第30-31页 |
3.3.4 IbBADH基因的生物信息学分析 | 第31页 |
3.3.5 IbBADH基因的蛋白亚细胞定位 | 第31-33页 |
3.3.6 紫薯IbBADH基因原核表达及酶活测定 | 第33-34页 |
3.3.7 基于荧光定量PCR对IbBADH基因的组织表达分析和盐胁迫诱导表达分析 | 第34-38页 |
第4章 结果与分析 | 第38-50页 |
4.1. 紫薯IBBADH的克隆和生物信息学分析 | 第38-43页 |
4.1.1 紫薯甜菜碱醛脱氢酶基因的克隆 | 第38-39页 |
4.1.2 紫薯甜菜碱醛脱氢酶IbBADH的生物信息学分析 | 第39-43页 |
4.2 甜菜碱醛脱氢酶基因组织表达谱和诱导谱分析 | 第43-44页 |
4.3 紫薯甜菜碱醛脱氢酶蛋白的纯化和酶活的测定 | 第44-48页 |
4.3.1 原核表达载体的构建 | 第44-45页 |
4.3.2 甜菜碱醛脱氢酶原核表达蛋白的诱导表达和纯化 | 第45-47页 |
4.3.3 紫薯甜菜碱醛脱氢酶最适pH及酶活的测定 | 第47-48页 |
4.4 紫薯IBBADH蛋白的亚细胞定位 | 第48-50页 |
第5章 结论与展望 | 第50-52页 |
缩写词表 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
致谢 | 第60-62页 |
硕士期间发表文章 | 第62页 |