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紫薯甜菜碱醛脱氢酶基因BADH克隆及功能分析

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
第1章 文献综述第10-22页
    1.1 背景概况第10-12页
        1.1.1 甘薯概况第10-11页
        1.1.2 紫肉甘薯来源第11页
        1.1.3 紫肉甘薯研究现状第11-12页
    1.2 植物耐受非生物胁迫基因工程改良第12-16页
        1.2.1 植物耐受非生物胁迫的需求第12-13页
        1.2.2 植物非生物胁迫的信号传导机制和耐受机制第13-14页
        1.2.3 基因工程改良对植物耐受非生物胁迫的方法和作用第14-16页
        1.2.4 新的研究方向和展望第16页
    1.3 甜菜碱等渗透小分子在植物耐受非生物胁迫中的作用第16-19页
        1.3.1 甜菜碱的性质第16-17页
        1.3.2 甜菜碱的耐受作用机制第17-18页
        1.3.3 甜菜碱合成途径及关键基因第18-19页
    1.4 甜菜碱醛脱氢酶研究相关背景第19页
    1.5 甜菜碱醛脱氢酶功能分析和改良实例第19-22页
第2章 绪论第22-24页
    2.1 研究的目的和意义第22页
    2.2 研究范围和内容第22页
    2.3 技术路线第22-24页
第3章 材料与方法第24-38页
    3.1 实验材料和试剂第24-27页
        3.1.1 植株材料第24页
        3.1.2 菌株和质粒材料第24页
        3.1.3 实验设备和仪器第24页
        3.1.4 实验试剂和耗材第24-25页
        3.1.5 培养基和常规实验试剂配置第25-27页
    3.2 常规实验方法和步骤第27-30页
        3.2.1 植物总RNA的提取和检测第27-28页
        3.2.2 琼脂糖凝胶电泳检测DNA扩增产物第28页
        3.2.3 目的条带的胶回收第28页
        3.2.4 中间载体构建(T载体连接)第28页
        3.2.5 载体构建(酶切产物与工程质粒连接)第28页
        3.2.6 感受态细胞的制备第28-29页
        3.2.7 T连接产物或重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞第29页
        3.2.8 质粒的抽提第29-30页
    3.3 IBBADH基因的克隆和分析第30-38页
        3.3.1 紫薯总RNA的提取和检测第30页
        3.3.2 以紫薯总RNA合成紫薯的第一链cDNA第30页
        3.3.3 IbBADH基因全长CDS的克隆第30-31页
        3.3.4 IbBADH基因的生物信息学分析第31页
        3.3.5 IbBADH基因的蛋白亚细胞定位第31-33页
        3.3.6 紫薯IbBADH基因原核表达及酶活测定第33-34页
        3.3.7 基于荧光定量PCR对IbBADH基因的组织表达分析和盐胁迫诱导表达分析第34-38页
第4章 结果与分析第38-50页
    4.1. 紫薯IBBADH的克隆和生物信息学分析第38-43页
        4.1.1 紫薯甜菜碱醛脱氢酶基因的克隆第38-39页
        4.1.2 紫薯甜菜碱醛脱氢酶IbBADH的生物信息学分析第39-43页
    4.2 甜菜碱醛脱氢酶基因组织表达谱和诱导谱分析第43-44页
    4.3 紫薯甜菜碱醛脱氢酶蛋白的纯化和酶活的测定第44-48页
        4.3.1 原核表达载体的构建第44-45页
        4.3.2 甜菜碱醛脱氢酶原核表达蛋白的诱导表达和纯化第45-47页
        4.3.3 紫薯甜菜碱醛脱氢酶最适pH及酶活的测定第47-48页
    4.4 紫薯IBBADH蛋白的亚细胞定位第48-50页
第5章 结论与展望第50-52页
缩写词表第52-54页
参考文献第54-60页
致谢第60-62页
硕士期间发表文章第62页

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