摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第1章 绪论 | 第11-22页 |
1.1 手性和手性药物 | 第11-15页 |
1.1.1 手性和手性药物的概念 | 第11页 |
1.1.2 药物的手性药理学活性类别 | 第11-12页 |
1.1.3 获取手性药物的方法 | 第12-13页 |
1.1.4 获取手性药物方法的比较 | 第13-14页 |
1.1.5 手性药物的现状及发展前景 | 第14-15页 |
1.2 医药中间体哌嗪-2-羧酸简介 | 第15-17页 |
1.2.1 哌嗪-2-羧酸 | 第15-16页 |
1.2.2 哌嗪-2-羧酸的用途 | 第16页 |
1.2.3 哌嗪-2-羧酸的获取方法 | 第16-17页 |
1.3 立体专一性酰胺酶的研究现状 | 第17-18页 |
1.3.1 酰胺酶的简介 | 第17页 |
1.3.2 立体专一性酰胺酶的研究现状 | 第17-18页 |
1.4 酶的分离纯化方法 | 第18-20页 |
1.4.1 根据分子大小不同的纯化方法 | 第18-19页 |
1.4.2 利用溶解度差别的纯化方法 | 第19页 |
1.4.3 根据电荷不同的纯化方法 | 第19-20页 |
1.4.4 利用选择性吸附的纯化方法 | 第20页 |
1.4.5 亲和层析 | 第20页 |
1.4.6 高效液相色谱和快速蛋白质液相色谱 | 第20页 |
1.5 本课题的研究目的和意义 | 第20-22页 |
第2章 副球菌 W10173(S)-酰胺酶分离纯化方法的研究 | 第22-43页 |
2.1 实验材料 | 第22-24页 |
2.1.1 菌种来源 | 第22页 |
2.1.2 酶分离纯化用的主要试剂与培养基 | 第22页 |
2.1.3 SDS-PAGE 实验材料 | 第22-23页 |
2.1.4 酶活测定用主要实验材料 | 第23-24页 |
2.1.5 主要仪器 | 第24页 |
2.2 实验方法 | 第24-28页 |
2.2.1 菌体收集 | 第24-25页 |
2.2.2 超声波破碎细胞的条件 | 第25页 |
2.2.3 W10173 (S)-酰胺酶的盐析条件 | 第25页 |
2.2.4 透析 | 第25页 |
2.2.5 DEAE-52 离子交换层析研究 | 第25-26页 |
2.2.6 相关检测方法 | 第26-28页 |
2.3 结果与分析 | 第28-42页 |
2.3.1 定量薄层层析法标准曲线 | 第28-29页 |
2.3.2 紫外法绘制的蛋白标准曲线 | 第29-30页 |
2.3.3 菌种收集结果与分析 | 第30页 |
2.3.4 超声波破壁条件对酶活的影响 | 第30-34页 |
2.3.5 硫酸铵盐析结果 | 第34-37页 |
2.3.6 DEAE-52 离子交换层析纯化结果 | 第37-40页 |
2.3.7 SDS-PAGE 检测结果 | 第40-42页 |
2.4 小结 | 第42-43页 |
第3章 (S)-酰胺酶的酶学性质初步研究 | 第43-50页 |
3.1 实验材料 | 第43页 |
3.1.1 实验用酶 | 第43页 |
3.1.2 主要仪器 | 第43页 |
3.2 实验方法 | 第43-44页 |
3.2.1 pH 对 W10173 (S)-酰胺酶活的影响 | 第43页 |
3.2.2 温度对 W10173 (S)-酰胺酶活的影响 | 第43页 |
3.2.3 W10173 (S)-酰胺酶的热稳定性 | 第43-44页 |
3.2.4 金属离子、EDTA-Na_2对 W10173(S)-酰胺酶酶活的影响 | 第44页 |
3.2.5 尿素对 W10173 (S)-酰胺酶酶活的影响 | 第44页 |
3.3 实验结果与讨论 | 第44-49页 |
3.3.1 W10173 (S)-酰胺酶的最适反应 pH | 第44-45页 |
3.3.2 W10173 (S)-酰胺酶酶的最适反应温度 | 第45-46页 |
3.3.3 W10173 (S)-酰胺酶的热稳定性 | 第46-47页 |
3.3.4 各种金属离子、EDTA-Na_2对 W10173 (S)-酰胺酶酶活的影响 | 第47-48页 |
3.3.5 尿素对 W10173 (S)-酰胺酶酶活的影响 | 第48-49页 |
3.4 小结 | 第49-50页 |
结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
攻读学位期间取得的科研成果 | 第58页 |