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副球菌W10173(S)-酰胺酶的分离纯化及其酶学性质研究

摘要第5-6页
Abstract第6-7页
第1章 绪论第11-22页
    1.1 手性和手性药物第11-15页
        1.1.1 手性和手性药物的概念第11页
        1.1.2 药物的手性药理学活性类别第11-12页
        1.1.3 获取手性药物的方法第12-13页
        1.1.4 获取手性药物方法的比较第13-14页
        1.1.5 手性药物的现状及发展前景第14-15页
    1.2 医药中间体哌嗪-2-羧酸简介第15-17页
        1.2.1 哌嗪-2-羧酸第15-16页
        1.2.2 哌嗪-2-羧酸的用途第16页
        1.2.3 哌嗪-2-羧酸的获取方法第16-17页
    1.3 立体专一性酰胺酶的研究现状第17-18页
        1.3.1 酰胺酶的简介第17页
        1.3.2 立体专一性酰胺酶的研究现状第17-18页
    1.4 酶的分离纯化方法第18-20页
        1.4.1 根据分子大小不同的纯化方法第18-19页
        1.4.2 利用溶解度差别的纯化方法第19页
        1.4.3 根据电荷不同的纯化方法第19-20页
        1.4.4 利用选择性吸附的纯化方法第20页
        1.4.5 亲和层析第20页
        1.4.6 高效液相色谱和快速蛋白质液相色谱第20页
    1.5 本课题的研究目的和意义第20-22页
第2章 副球菌 W10173(S)-酰胺酶分离纯化方法的研究第22-43页
    2.1 实验材料第22-24页
        2.1.1 菌种来源第22页
        2.1.2 酶分离纯化用的主要试剂与培养基第22页
        2.1.3 SDS-PAGE 实验材料第22-23页
        2.1.4 酶活测定用主要实验材料第23-24页
        2.1.5 主要仪器第24页
    2.2 实验方法第24-28页
        2.2.1 菌体收集第24-25页
        2.2.2 超声波破碎细胞的条件第25页
        2.2.3 W10173 (S)-酰胺酶的盐析条件第25页
        2.2.4 透析第25页
        2.2.5 DEAE-52 离子交换层析研究第25-26页
        2.2.6 相关检测方法第26-28页
    2.3 结果与分析第28-42页
        2.3.1 定量薄层层析法标准曲线第28-29页
        2.3.2 紫外法绘制的蛋白标准曲线第29-30页
        2.3.3 菌种收集结果与分析第30页
        2.3.4 超声波破壁条件对酶活的影响第30-34页
        2.3.5 硫酸铵盐析结果第34-37页
        2.3.6 DEAE-52 离子交换层析纯化结果第37-40页
        2.3.7 SDS-PAGE 检测结果第40-42页
    2.4 小结第42-43页
第3章 (S)-酰胺酶的酶学性质初步研究第43-50页
    3.1 实验材料第43页
        3.1.1 实验用酶第43页
        3.1.2 主要仪器第43页
    3.2 实验方法第43-44页
        3.2.1 pH 对 W10173 (S)-酰胺酶活的影响第43页
        3.2.2 温度对 W10173 (S)-酰胺酶活的影响第43页
        3.2.3 W10173 (S)-酰胺酶的热稳定性第43-44页
        3.2.4 金属离子、EDTA-Na_2对 W10173(S)-酰胺酶酶活的影响第44页
        3.2.5 尿素对 W10173 (S)-酰胺酶酶活的影响第44页
    3.3 实验结果与讨论第44-49页
        3.3.1 W10173 (S)-酰胺酶的最适反应 pH第44-45页
        3.3.2 W10173 (S)-酰胺酶酶的最适反应温度第45-46页
        3.3.3 W10173 (S)-酰胺酶的热稳定性第46-47页
        3.3.4 各种金属离子、EDTA-Na_2对 W10173 (S)-酰胺酶酶活的影响第47-48页
        3.3.5 尿素对 W10173 (S)-酰胺酶酶活的影响第48-49页
    3.4 小结第49-50页
结论第50-51页
参考文献第51-57页
致谢第57-58页
攻读学位期间取得的科研成果第58页

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