| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略语/符号说明 | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-15页 |
| 研究现状、成果 | 第12-14页 |
| 研究目的、方法 | 第14-15页 |
| 一、人ADSCs的体外分离、培养、鉴定和生物学特性观察 | 第15-25页 |
| 1.1 材料和方法 | 第15-16页 |
| 1.1.1 主要试剂 | 第15页 |
| 1.1.2 主要仪器 | 第15页 |
| 1.1.3 ADSCs的分离提取 | 第15页 |
| 1.1.4 ADSCs的培养及传代 | 第15-16页 |
| 1.2 结果 | 第16-21页 |
| 1.2.1 ADSCs形态学观察及生长繁殖特点 | 第16-17页 |
| 1.2.2 ADSCs的活力测定 | 第17页 |
| 1.2.3 ADSCs生长曲线 | 第17-18页 |
| 1.2.4 流式细胞仪检测体外培养细胞的分子表达 | 第18页 |
| 1.2.5 成骨分化和Von Kossa染色及碱性磷酸酶染色 | 第18-20页 |
| 1.2.6 成软骨分化和甲苯胺蓝染色 | 第20-21页 |
| 1.2.7 成脂分化和油红“O”染色 | 第21页 |
| 1.3 讨论 | 第21-24页 |
| 1.3.1 关于组织工程中的种子细胞 | 第21-22页 |
| 1.3.2 ADSCs与BMSCs的比较 | 第22页 |
| 1.3.3 ADSCs的生物学特性 | 第22-24页 |
| 1.4 小结 | 第24-25页 |
| 二、人VEGF基因重组质粒转染ADSCs | 第25-46页 |
| 2.1 材料和方法 | 第25-39页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第25-27页 |
| 2.1.2 扩增编码VEGF成熟肽的基因 | 第27-31页 |
| 2.1.3 目的基因克隆入pGEM-T Easy载体 | 第31-34页 |
| 2.1.4 重表达质粒pSELECT-GFPzeo-VEGF的构建 | 第34-35页 |
| 2.1.5 目的基因片段与表达质粒载体的连接产物转化宿主菌 | 第35-37页 |
| 2.1.6 重组质粒pSELECT-GFPzeo-VEGF转染ADSCs | 第37页 |
| 2.1.7 人VEGF的ELISA定量检测 | 第37页 |
| 2.1.8 转染对细胞生物学特征的影响 | 第37-38页 |
| 2.1.9 转染后的ADSCs成骨培养 | 第38-39页 |
| 2.2 结果 | 第39-42页 |
| 2.2.1 阳性转染细胞的观察 | 第39页 |
| 2.2.2 人VEGF分泌量的ELISA检测结果 | 第39-40页 |
| 2.2.3 四唑盐比色法测定结果 | 第40页 |
| 2.2.4 转染后的ADSCs成骨检测结果 | 第40-42页 |
| 2.3 讨论 | 第42-45页 |
| 2.3.1 关于VEGF基因 | 第42页 |
| 2.3.2 表达载体的选择 | 第42-43页 |
| 2.3.3 转染方法 | 第43-44页 |
| 2.3.4 转染后试验结果分析 | 第44-45页 |
| 2.3.5 展望 | 第45页 |
| 2.4 小结 | 第45-46页 |
| 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第52-53页 |
| 附录 | 第53-58页 |
| 综述 | 第58-72页 |
| 综述参考文献 | 第66-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
