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葡萄果实着色前后ABA代谢合成关键酶的基因表达分析

中文摘要第1-13页
Abstract第13-15页
1 引言第15-38页
   ·葡萄果实生长发育的研究进展第15-16页
   ·葡萄果实成熟过程中主要成分的变化第16-27页
     ·葡萄果实中可溶性固形物和糖的变化第16-17页
       ·果实中可溶性固形物的变化第16页
       ·果实中糖的种类和含量变化第16-17页
     ·葡萄果实中的有机酸第17-19页
       ·有机酸的种类和分布第17页
       ·有机酸的代谢第17-19页
     ·葡萄果实中的酚类物质第19-22页
       ·酚类物质的作用第19页
       ·酚类物质的种类和含量第19-21页
       ·葡萄成熟过程中酚类物质的变化第21-22页
         ·总酚和单宁的变化第21页
         ·花色苷的变化第21-22页
     ·果实花青素和花青苷的研究第22-26页
       ·花青苷的生物合成途径第22-23页
       ·影响花青苷合成的内外因素第23-25页
         ·花青苷合成与相关酶第23-24页
         ·花青苷合成与糖第24页
         ·花青苷合成与激素第24-25页
         ·花青苷合成与光第25页
         ·花青苷合成与温度第25页
         ·花青苷合成与矿质元素第25页
       ·果实着色的调控技术第25-26页
         ·选育色素含量高的品种通过品种杂交,选择更符合要求的株系第25页
         ·生产措施第25-26页
         ·外施调控第26页
         ·应用现代转基因手段第26页
     ·果实成熟过程中组织超微结构的变化第26-27页
   ·脱落酸化学合成与分解代谢第27-33页
   ·脱落酸的定量分析技术第33-36页
     ·纯化方法第33-34页
       ·固相分离技术第33-34页
       ·高压液相色谱技术第34页
       ·免疫亲和色谱技术第34页
     ·物理化学分析方法第34-35页
     ·免疫分析技术第35-36页
   ·研究目的与意义第36-38页
2 材料与方法第38-47页
   ·试验材料第38页
   ·试验方法第38-47页
     ·葡萄果实生长曲线测定第38页
     ·葡萄果实pH值测定第38页
     ·葡萄果实可溶性糖测定第38-39页
     ·葡萄果实总酸(酒石酸当量)测定第39页
     ·葡萄果实脱落酸含量测定第39-40页
       ·GC-MS样品前处理第39页
       ·GC-MS条件第39-40页
     ·用两种不同浓度的ABA处理葡萄果实第40页
     ·四个基因片段的克隆第40-45页
       ·葡萄果肉总RNA的提取第40-41页
       ·总RNA的纯化第41页
       ·反转录体系及程序第41-42页
       ·目的基因片段的克隆第42-43页
       ·目的片段胶回收纯化第43页
       ·目的片段和测序载体的连接第43-44页
       ·重组质粒的转化第44页
       ·重组质粒的鉴定第44页
         ·质粒DNA的小量提取第44页
       ·质粒酶切鉴定法第44-45页
       ·序列分析第45页
     ·四个基因的基因表达量测定第45-46页
       ·分别提取并纯化葡萄果肉总RNA第45页
       ·葡萄果肉cDNA第一链合成第45页
       ·荧光定量的引物合成第45页
       ·相对荧光定量分析第45-46页
     ·BG基因全长的克隆和生物信息学分析第46-47页
3 结果与分析第47-63页
   ·葡萄果实生长过程中生理指标的测定第47-52页
     ·葡萄果实生长曲线第47-48页
     ·葡萄果实着色期前后pH值和总酸含量变化第48-49页
     ·葡萄果实着色期前后可溶性糖变化第49页
     ·葡萄果实着色期前后脱落酸水平的变化第49-50页
     ·葡萄果实着色期前后糖、酸和ABA变化比较分析第50-52页
   ·脱落酸对玫瑰香葡萄着色和品质的影响第52-53页
     ·脱落酸对玫瑰香葡萄着色的影响第52页
     ·脱落酸对玫瑰香葡萄果实品质的影响第52-53页
   ·葡萄果实中四个基因片段的克隆第53-57页
     ·葡萄果肉总RNA的提取第53页
     ·葡萄NCED基因片段的克隆与分析第53-54页
     ·葡萄CYP基因片段的克隆与分析第54-55页
     ·葡萄GT基因片段的克隆与分析第55-57页
     ·葡萄BG基因片段的克隆与分析第57页
   ·荧光定量PCR的结果第57-59页
   ·BG基因全长的克隆和生物信息学分析第59-63页
4 讨论第63-67页
   ·葡萄果实着色期前后糖、酸和ABA变化第63页
   ·脱落酸对葡萄果实着色和果实品质的影响第63-64页
   ·RNA提取过程中存在的问题第64-65页
   ·有关荧光定量PCR的问题第65页
     ·引物设计第65页
     ·荧光定量PCR原理及操作相关问题第65页
   ·葡萄果实着色前后ABA积累关键酶基因VvNCED1和VvBG1转录水平的研究第65-67页
5 结论第67-68页
参考文献第68-77页
致谢第77-78页
攻读学位期间发表论文情况第78页

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