| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 1 立题目的和意义 | 第8页 |
| 2 文献综述 | 第8-15页 |
| ·连作障碍的研究现状 | 第8-10页 |
| ·连作的生物障碍理论 | 第8-9页 |
| ·植物的自毒作用 | 第9页 |
| ·土壤理化性质的恶化 | 第9页 |
| ·生姜连作障碍的研究现状 | 第9-10页 |
| ·根际微生物研究现状 | 第10-11页 |
| ·根际微生物类群的多样性 | 第10页 |
| ·不同作物,管理栽培方法和土壤类型对根际微生物的影响 | 第10页 |
| ·连作对根际土壤微生物的影响 | 第10-11页 |
| ·土壤酶的研究现状 | 第11-12页 |
| ·土壤酶的来源和分类 | 第11-12页 |
| ·土壤酶活性的研究 | 第12页 |
| ·连作条件下土壤酶活性的研究 | 第12页 |
| ·土壤微生物多样性研究方法进展 | 第12-15页 |
| ·传统的微生物培养法 | 第12-13页 |
| ·分子生物学技术 | 第13页 |
| ·PCR-DGGE基因指纹图谱技术 | 第13-15页 |
| 3 材料与方法 | 第15-23页 |
| ·采样点概况 | 第15页 |
| ·样品采集与处理 | 第15页 |
| ·微生物的分离与计数 | 第15-16页 |
| ·土壤酶活的测定 | 第16-17页 |
| ·过氧化氢酶的测定(高锰酸钾滴定法) | 第16页 |
| ·脲酶测定(靛酚蓝比色法) | 第16-17页 |
| ·中性磷酸酶的测定(磷酸苯二钠比色法) | 第17页 |
| ·微生物生物量的测定 | 第17-18页 |
| ·土壤微生物量碳的测定 | 第17页 |
| ·土壤微生物量氮的测定 | 第17-18页 |
| ·可培养细菌遗传多样性分析 | 第18-20页 |
| ·DNA提取 | 第18页 |
| ·BOXAIR-PCR指纹图谱分析 | 第18-19页 |
| ·16S rDNA PCR-RFLP指纹图谱分析 | 第19页 |
| ·代表菌株16S rDNA序列分析 | 第19-20页 |
| ·土壤微生物多样性分析(PCR-DGGE) | 第20-22页 |
| ·土壤总DNA的提取 | 第20页 |
| ·基因组DNA的PCR扩增 | 第20-21页 |
| ·制胶及电泳 | 第21页 |
| ·染色 | 第21-22页 |
| ·DGGE优势及特异条带的克隆测序 | 第22页 |
| ·数据处理 | 第22-23页 |
| 4 结果与分析 | 第23-38页 |
| ·生姜种植土壤微生物数量的变化 | 第23页 |
| ·土壤酶活性 | 第23-24页 |
| ·土壤微生物量 | 第24页 |
| ·供试细菌的分离纯化 | 第24-25页 |
| ·BOXAIR-PCR指纹图谱分析 | 第25-27页 |
| ·供试菌株16S rRNA PCR-RFLP图谱分析 | 第27-33页 |
| ·16S rRNA扩增 | 第27页 |
| ·16S rDNA酶切结果 | 第27-28页 |
| ·细菌16S rRNA PCR-RFLP分析 | 第28-30页 |
| ·16S rDNA系统发育分析 | 第30-33页 |
| ·土壤微生物多样性分析(PCR-DGGE) | 第33-38页 |
| ·土壤总DNA的提取和纯化 | 第33页 |
| ·土壤细菌和真菌PCR扩增 | 第33页 |
| ·DGGE电泳条件优化 | 第33-34页 |
| ·DGGE图谱分析 | 第34-37页 |
| ·DGGE特殊条带克隆及序列分析 | 第37-38页 |
| 5 讨论与结论 | 第38-41页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| ·结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 附录1:16S rDNA基因序列 | 第48-55页 |
| 附录2:DGGE克隆基因序列 | 第55-56页 |