| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 第一章 干细胞分化为生殖细胞的研究进展 | 第13-26页 |
| ·干细胞 | 第13-14页 |
| ·胚胎干细胞 | 第13-14页 |
| ·成体干细胞 | 第14页 |
| ·生殖细胞 | 第14-18页 |
| ·原始生殖细胞的起源和发生 | 第15页 |
| ·生殖细胞发育、分化的标记基因 | 第15-18页 |
| ·ESCs 体外向生殖细胞诱导分化方法 | 第18-20页 |
| ·单层和EB 方式诱导 | 第18页 |
| ·ESCs 体外向生殖细胞诱导方法 | 第18-20页 |
| ·干细胞向生殖细胞的诱导分化研究进展 | 第20-24页 |
| ·胚胎干细胞向生殖细胞的分化 | 第20-22页 |
| ·成体干细胞向生殖细胞的分化的研究 | 第22-23页 |
| ·干细胞诱导生殖细胞的体内移植研究 | 第23-24页 |
| ·存在的问题及展望 | 第24-26页 |
| 第二章 小鼠胚胎干细胞向雄性生殖细胞诱导条件的筛选与优化 | 第26-43页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·试验材料 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·主要仪器设备及耗材 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-34页 |
| ·主要溶液配制 | 第27-29页 |
| ·小鼠胚胎干细胞的培养 | 第29-30页 |
| ·有血清和无血清ESCs 培养体系的比较 | 第30页 |
| ·类胚体制作方法的比较 | 第30-31页 |
| ·不同浓度RA 诱导效率的比较 | 第31-33页 |
| ·睾丸提取液、条件培养液、激素（E_2+FSH）诱导ESCs 向生殖细胞分化 | 第33-34页 |
| ·结果 | 第34-40页 |
| ·MEF 细胞的生长特点 | 第34页 |
| ·mESCs 的培养 | 第34页 |
| ·无血清和有血清培养体系 | 第34-35页 |
| ·EB 制作方法的比较 | 第35-36页 |
| ·RA 浓度的比较结果 | 第36-39页 |
| ·睾丸提取液、条件培养液、激素（E_2+FSH）诱导mESCs 向生殖细胞分化 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-41页 |
| ·小结 | 第41-43页 |
| 第三章 Stra8-EGFP 转染ESCs 向雄性生殖细胞的诱导分化 | 第43-56页 |
| ·材料 | 第43页 |
| ·实验材料 | 第43页 |
| ·主要试剂 | 第43页 |
| ·主要仪器设备 | 第43页 |
| ·实验方法 | 第43-48页 |
| ·主要溶液配制 | 第43-44页 |
| ·小鼠ESCs 的培养 | 第44页 |
| ·pStra8-EGFP 质粒转化与提取 | 第44页 |
| ·pStra8-EGFP 电转染mESCs | 第44-45页 |
| ·筛选与培养 | 第45页 |
| ·EB 的制作 | 第45页 |
| ·ES-Stra8 生物学特性的检测 | 第45-46页 |
| ·诱导ESC-Stra8 向雄性生殖细胞分化 | 第46-48页 |
| ·结果 | 第48-54页 |
| ·ES-Stra8 的形态学特征 | 第48页 |
| ·ES-Stra8 AP 染色结果 | 第48页 |
| ·ES-Stra8 的多能性和GFP 基因的RT-PCR 检测 | 第48-49页 |
| ·ES-Stra8 向三胚层细胞分化免疫组织化学染色 | 第49页 |
| ·分离培养的支持细胞 | 第49-50页 |
| ·EB 与支持细胞共培养的形态学观察 | 第50-51页 |
| ·ES-Stra8 与支持细胞共培养的RT-PCR 检测 | 第51页 |
| ·ES-Stra8 与支持细胞共培养的Stra8-EGFP 表达结果 | 第51-52页 |
| ·流式分选诱导细胞的GFP 阳性率 | 第52页 |
| ·ES-Stra8 与支持细胞共培养的免疫荧光检测 | 第52-53页 |
| ·细胞周期变化 | 第53页 |
| ·苯胺兰（Aniline Blue）染色 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-55页 |
| ·小结 | 第55-56页 |
| 第四章 小鼠ESC 诱导分化细胞移植治疗生精缺陷模型小鼠的研究 | 第56-62页 |
| ·材料 | 第56-57页 |
| ·实验材料 | 第56页 |
| ·主要试剂 | 第56页 |
| ·主要仪器设备 | 第56-57页 |
| ·方法 | 第57-58页 |
| ·主要溶液配制 | 第57页 |
| ·生精缺陷性小鼠模型的制作 | 第57页 |
| ·诱导细胞的DAPI 标记和移植 | 第57页 |
| ·采样并观察两侧睾丸 | 第57页 |
| ·镜下观察DAPI 标记细胞并培养 | 第57页 |
| ·石蜡切片的制作和观察 | 第57-58页 |
| ·结果 | 第58-60页 |
| ·DAPI 标记诱导的细胞 | 第58页 |
| ·移植侧和对照侧附睾精子 | 第58-59页 |
| ·DAPI 标记细胞的观察 | 第59页 |
| ·移植细胞的切片观察 | 第59-60页 |
| ·讨论 | 第60-61页 |
| ·小结 | 第61-62页 |
| 结论 | 第62-63页 |
| 创新点 | 第63-64页 |
| 进一步研究课题 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 作者简介 | 第71页 |
