目录 | 第1-5页 |
摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
一、前言 | 第10-16页 |
1、人类乳头瘤病毒(HPV) | 第10-11页 |
2、HPV的分型 | 第11-12页 |
3、HPV感染的流行病学 | 第12-13页 |
4、治疗性疫苗 | 第13页 |
5、预防性疫苗 | 第13-16页 |
二、材料 | 第16-24页 |
1、菌株及细胞株 | 第16页 |
2、质粒、抗体及工具酶 | 第16页 |
3、培养基、试剂及试剂盒 | 第16-18页 |
4、缓冲液 | 第18-22页 |
5、主要仪器设备 | 第22-24页 |
三、方法 | 第24-44页 |
1、构建重组PFASTBAC DUAL穿梭载体 | 第24-30页 |
2、构建重组BACMID | 第30-34页 |
3、构建重组杆状病毒 | 第34-38页 |
4、HPVVLP蛋白的表达和鉴定 | 第38-41页 |
5、优化蛋白表达条件 | 第41-42页 |
6、杆状病毒及HPV 16/18/33/58 VLP的电镜观察分析 | 第42-44页 |
四、结果 | 第44-56页 |
1、重组PFASTBAC DUAL-HPV 16/18/33/58 L1转移质粒构建 | 第44-45页 |
2、BACMID-HPV 16/18/33/58 L1重组杆状病毒构建 | 第45-46页 |
3、BACMID-HPV 16/18/33/58 L1转染SF9细胞及病毒滴度测定 | 第46-47页 |
4、病毒滴度测定和富集 | 第47-48页 |
5、表达蛋白的SDS-PAGE和WEST-BLOTTING分析 | 第48-49页 |
6、L1蛋白在昆虫细胞中优化表达 | 第49-54页 |
7、杆状病毒及HPV 16/18/33/58 VLP的电镜观察分析 | 第54-56页 |
五、讨论 | 第56-58页 |
六、参考文献 | 第58-62页 |
附录 | 第62-82页 |
中英文缩略词表 | 第62-64页 |
PFASTBAC DUAL质粒图谱 | 第64-66页 |
优化合成序列 | 第66-82页 |
致谢 | 第82-84页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第84-86页 |
综述 | 第86-94页 |
参考文献 | 第91-94页 |