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HPV 16/18/33/58 L1基因的克隆与表达

目录第1-5页
摘要第5-7页
ABSTRACT第7-10页
一、前言第10-16页
 1、人类乳头瘤病毒(HPV)第10-11页
 2、HPV的分型第11-12页
 3、HPV感染的流行病学第12-13页
 4、治疗性疫苗第13页
 5、预防性疫苗第13-16页
二、材料第16-24页
 1、菌株及细胞株第16页
 2、质粒、抗体及工具酶第16页
 3、培养基、试剂及试剂盒第16-18页
 4、缓冲液第18-22页
 5、主要仪器设备第22-24页
三、方法第24-44页
 1、构建重组PFASTBAC DUAL穿梭载体第24-30页
 2、构建重组BACMID第30-34页
 3、构建重组杆状病毒第34-38页
 4、HPVVLP蛋白的表达和鉴定第38-41页
 5、优化蛋白表达条件第41-42页
 6、杆状病毒及HPV 16/18/33/58 VLP的电镜观察分析第42-44页
四、结果第44-56页
 1、重组PFASTBAC DUAL-HPV 16/18/33/58 L1转移质粒构建第44-45页
 2、BACMID-HPV 16/18/33/58 L1重组杆状病毒构建第45-46页
 3、BACMID-HPV 16/18/33/58 L1转染SF9细胞及病毒滴度测定第46-47页
 4、病毒滴度测定和富集第47-48页
 5、表达蛋白的SDS-PAGE和WEST-BLOTTING分析第48-49页
 6、L1蛋白在昆虫细胞中优化表达第49-54页
 7、杆状病毒及HPV 16/18/33/58 VLP的电镜观察分析第54-56页
五、讨论第56-58页
六、参考文献第58-62页
附录第62-82页
 中英文缩略词表第62-64页
 PFASTBAC DUAL质粒图谱第64-66页
 优化合成序列第66-82页
致谢第82-84页
攻读学位期间发表的学术论文目录第84-86页
综述第86-94页
 参考文献第91-94页

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