中文摘要 | 第4-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
引言 | 第14-21页 |
1. CORIN蛋白的结构 | 第14-15页 |
2. CORIN的生物学功能 | 第15-16页 |
3. CORIN与心血管疾病 | 第16-17页 |
4. 可溶性CORIN | 第17-18页 |
参考文献 | 第18-21页 |
第一部分 PCSK6对可溶性CORIN的活化作用研究 | 第21-33页 |
1. 实验材料 | 第21-24页 |
1.1 细胞系 | 第21页 |
1.2 主要试剂与材料 | 第21-22页 |
1.3 主要仪器和设备 | 第22-23页 |
1.4 常用缓冲液及配制方法 | 第23-24页 |
2. 实验方法 | 第24-28页 |
2.1 构建可溶性Corin表达载体 | 第24-25页 |
2.2 细胞培养 | 第25-26页 |
2.3 细胞转染 | 第26页 |
2.4 蛋白质免疫印迹(Western blotting) | 第26-27页 |
2.5 HEK293-PCSK6稳定克隆的建立 | 第27页 |
2.6 PCSK6对可溶性Corin的活化作用 | 第27-28页 |
2.7 可溶性Corin活化pro-ANP的功能研究 | 第28页 |
3. 实验结果 | 第28-32页 |
3.1 可溶性Corin表达载体的构建 | 第28-29页 |
3.2 重组Corin蛋白的表达与活化 | 第29-30页 |
3.3 PCSK6对可溶性Corin的活化作用 | 第30-31页 |
3.4 可溶性Corin活化pro-ANP的功能实验 | 第31-32页 |
4 讨论 | 第32-33页 |
第二部分 重组可溶性EKCORIN蛋白的表达、纯化及活性研究 | 第33-49页 |
1. 实验材料 | 第33-37页 |
1.1 主要试剂与材料 | 第33-34页 |
1.2 主要仪器和设备 | 第34-35页 |
1.3 常用缓冲液及配制方法 | 第35-37页 |
2. 实验方法 | 第37-42页 |
2.1 构建带有EK识别序列可溶性Corin表达载体 | 第37-39页 |
2.2 建立EKsolCorin稳定克隆 | 第39-40页 |
2.3 稳定克隆的Corin水平检测 | 第40页 |
2.4 镍柱亲和层析纯化Corin蛋白 | 第40-41页 |
2.5 考马斯亮蓝染色 | 第41-42页 |
2.6 肠激酶活化EKsolCorin实验 | 第42页 |
2.7 可溶性Corin活化pro-ANP的功能研究 | 第42页 |
3. 实验结果 | 第42-47页 |
3.1 可溶性Corin表达载体的构建 | 第42-45页 |
3.2 EKsolCorin的表达 | 第45页 |
3.3 EKsolCorin蛋白的纯化 | 第45-46页 |
3.4 肠激酶对EKsolCorin蛋白的活化 | 第46-47页 |
3.5 EKsolCorin活化pro-ANP的功能实验 | 第47页 |
4 讨论 | 第47-49页 |
结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-55页 |
综述 | 第55-62页 |
参考文献 | 第58-62页 |
硕士学位期间发表的论文 | 第62-63页 |
本课题所获得基金资助 | 第63-64页 |
缩略词表 | 第64-66页 |
致谢 | 第66-68页 |