摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第12-22页 |
1.1 TuMV研究进展 | 第12-14页 |
1.1.1 TuMV生物学特性 | 第12页 |
1.1.2 TuMV基因组结构及功能 | 第12-13页 |
1.1.3 TuMV株系划分 | 第13-14页 |
1.1.4 TuMV鉴定和检测技术 | 第14页 |
1.2 芸薹属对TuMV抗性研究进展 | 第14-16页 |
1.2.1 芸薹属中抗TuMV标记开发进展 | 第14-15页 |
1.2.2 芸薹属中抗TuMV基因定位研究进展 | 第15-16页 |
1.3 植物对病毒的抗性机制研究 | 第16-20页 |
1.3.1 植物对病毒的隐性抗性机制 | 第17-19页 |
1.3.2 植物对病毒的显性抗性机制 | 第19-20页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第20-22页 |
1.4.1 研究目的和意义 | 第20-21页 |
1.4.2 技术路线 | 第21-22页 |
第二章 基于白菜抗TuMV的retr02基因功能标记开发 | 第22-29页 |
2.1 材料与方法 | 第22-25页 |
2.1.1 试验材料 | 第22页 |
2.1.2 dCAPS引物设计 | 第22-23页 |
2.1.3 dCAPS引物筛选 | 第23-24页 |
2.1.4 KASP标记设计 | 第24页 |
2.1.5 ELISA检测病毒含量 | 第24-25页 |
2.2 结果 | 第25-27页 |
2.2.1 利用dCAPS-BslI标记对试验材料进行检测 | 第25页 |
2.2.2 利用KASP_retr02标记对试验材料进行检测 | 第25-26页 |
2.2.3 将KASP_retr02标记应用于分子标记辅助选择育种 | 第26-27页 |
2.2.4 将dCAPS-BslI标记应用于分子标记辅助选择育种 | 第27页 |
2.3 讨论 | 第27-29页 |
2.3.1 ‘80186’材料的抗性分析 | 第27-28页 |
2.3.2 dCAPS-Bsl I标记和KASP_retr02标记的优劣分析 | 第28-29页 |
第三章 TuMV株系与eIF(iso)4E互作关系研究 | 第29-33页 |
3.1 材料与方法 | 第29-30页 |
3.1.1 试验材料 | 第29页 |
3.1.2 eIF(iso)4E.a和eIF(iso)4E.c基因克隆 | 第29-30页 |
3.1.3 构建酵母重组表达载体 | 第30页 |
3.1.4 酵母质粒转化、自激活与毒性检测 | 第30页 |
3.1.5 酵母双杂交试验 | 第30页 |
3.2 结果 | 第30-32页 |
3.2.1 eIF(iso)4E.a和eIF(iso)4E.c基因克隆 | 第30-31页 |
3.2.2 TuMV-C4 VPg和TuMV-CDN1 VPg基因克隆 | 第31页 |
3.2.3 TuMV VPg与白菜eIF(iso)4E的互作分析 | 第31-32页 |
3.3 讨论 | 第32-33页 |
3.3.1 白菜eIF(iso)4E基因分析 | 第32页 |
3.3.2 不同的TuMV株系可以与不同的eIF(iso)4E拷贝进行互作 | 第32-33页 |
第四章 白菜eIF(iso)4E基因互作关键位点研究 | 第33-37页 |
4.1 材料与方法 | 第33页 |
4.1.1 试验材料 | 第33页 |
4.1.2 白菜eIF(iso)4E蛋白结构预测 | 第33页 |
4.2 结果 | 第33-35页 |
4.2.1 白菜eIF(iso)4E.a与eIF(iso)4E.c蛋白序列分析 | 第33-34页 |
4.2.2 白菜eIF(iso)4E蛋白氨基酸性质分析 | 第34页 |
4.2.3 白菜eIF(iso)4E蛋白二级结构分析 | 第34-35页 |
4.2.4 白菜eIF(iso)4E蛋白三级结构分析 | 第35页 |
4.3 讨论 | 第35-37页 |
4.3.1 白菜eIF(iso)4E蛋白结构分析 | 第35-37页 |
第五章 TuMV VPg基因互作关键位点研究 | 第37-43页 |
5.1 材料和方法 | 第37-39页 |
5.1.1 试验材料 | 第37页 |
5.1.2 重叠延伸PCR引物设计及PCR反应体系 | 第37-38页 |
5.1.3 重叠延伸PCR法定点突变 | 第38-39页 |
5.1.4 构建重组pEASY-T1载体 | 第39页 |
5.1.5 白菜TuMV VPg蛋白结构预测 | 第39页 |
5.2 结果 | 第39-42页 |
5.2.1 TuMV VPg蛋白结构分析 | 第39-40页 |
5.2.2 TuMV-CDN1 VPg与TuMV-C4 VPg差异位点分析 | 第40页 |
5.2.3 利用SOE-PCR定点突变TuMV-CDN1 VPg与TuMV-C4 VPg差异位点 | 第40-41页 |
5.2.4 通过酵母双杂交试验确定有功能作用的关键氨基酸 | 第41-42页 |
5.3 讨论 | 第42-43页 |
5.3.1 优化重叠PCR体系 | 第42页 |
5.3.2 不同氨基酸差异位点影响TuMV与eIF(iso)4E的互作 | 第42-43页 |
第六章 全文总结 | 第43-44页 |
6.1 基于白菜抗TuMV的retr02基因功能标记开发 | 第43页 |
6.2 TuMV株系与eIF(iso)4E互作关系研究 | 第43页 |
6.3 白菜eIF(iso)4E基因互作关键位点分析 | 第43页 |
6.4 TuMV VPg基因互作关键位点分析 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-50页 |
附录 | 第50-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
作者简历 | 第59页 |
在读期间发表的主要论文 | 第59页 |