| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略语表 | 第9-12页 |
| 1 前言 | 第12-22页 |
| 1.1 血清miRNAs作为食管鳞癌的生物标志物 | 第13-16页 |
| 1.1.1 血清miRNAs作为食管鳞癌诊断的生物标志物 | 第13-15页 |
| 1.1.2 血清miRNAs作为食管鳞癌预后的生物标志物 | 第15-16页 |
| 1.2 血清miRNAs在检测方法上的挑战 | 第16-17页 |
| 1.3 MiR4835p作用的相关基因的研究 | 第17-18页 |
| 1.4 食管鳞癌中miR4835p相关基因的启动子区的甲基化研究 | 第18-20页 |
| 1.5 研究目的及意义 | 第20-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-36页 |
| 2.1 材料 | 第22-25页 |
| 2.1.1 临床标本 | 第22-23页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.3 常用溶液的配制 | 第24-25页 |
| 2.1.4 仪器和设备 | 第25页 |
| 2.2 方法 | 第25-35页 |
| 2.2.1 Trizol试剂法提取总RNA | 第25-27页 |
| 2.2.2 4种miRNAs的普通PCR反应及测序方法 | 第27-31页 |
| 2.2.3 实时荧光定量PCR检测 | 第31-32页 |
| 2.2.4 血细胞和组织中基因组DNA提取 | 第32-33页 |
| 2.2.5 DNA启动子区甲基化修饰及目的片段扩增 | 第33-35页 |
| 2.3 统计分析 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-60页 |
| 3.1 食管鳞癌患者的病例分析 | 第36-38页 |
| 3.2 4种miRNAs在食管鳞癌患者中的表达水平 | 第38-50页 |
| 3.2.1 4种miRNAs在食管鳞癌患者血清中的表达水平 | 第38-48页 |
| 3.2.2 4种miRNAs在食管鳞癌患者组织中的表达水平 | 第48-50页 |
| 3.3 食管鳞癌中miR4835p作用的相关基因mRNAs的表达 | 第50-54页 |
| 3.3.1 MiR4835p的生物信息学预测 | 第50-51页 |
| 3.3.2 MiR4835p相关的基因在食管鳞癌中的表达 | 第51-54页 |
| 3.4 食管鳞癌相关的2种基因的启动子区甲基化检测 | 第54-60页 |
| 3.4.1 CDKN2A和IGF2基因启动子区甲基化引物验证 | 第54-55页 |
| 3.4.2 CDKN2A基因启动子区甲基化检测 | 第55-56页 |
| 3.4.3 IGF2基因启动子区甲基化检测 | 第56-60页 |
| 4 讨论 | 第60-64页 |
| 4.1 4种miRNAs在食管鳞癌中的表达 | 第60-61页 |
| 4.2 MiR4835p在食管鳞癌中的调控机理 | 第61-64页 |
| 参考文献 | 第64-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文与科研成果 | 第74-75页 |
| 附录 | 第75-76页 |
