| 致谢 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第一章 前言 | 第16-23页 |
| 1.1 果蔬储藏病原微生物及其防治现状 | 第16-19页 |
| 1.1.1 曲霉菌 | 第16页 |
| 1.1.2 青霉菌 | 第16-17页 |
| 1.1.3 食源性细菌 | 第17页 |
| 1.1.4 防治现状 | 第17-19页 |
| 1.2 硫化氢研究现状 | 第19-21页 |
| 1.2.1 硫化氢概述 | 第19-20页 |
| 1.2.2 H_2S与植物抗逆 | 第20-21页 |
| 1.2.3 H_2S与果蔬储藏保鲜 | 第21页 |
| 1.3 课题研究的目的、意义及内容 | 第21-23页 |
| 1.3.1 研究的目的与意义 | 第22页 |
| 1.3.2 研究内容 | 第22-23页 |
| 第二章 H_2S抑制采后病原真菌生长的效应和机制研究 | 第23-38页 |
| 2.1 实验材料、试剂及设备 | 第23-24页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第23页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第23页 |
| 2.1.3 主要设备 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-28页 |
| 2.2.1 采后病原真菌果实侵染能力的检测 | 第24页 |
| 2.2.2 菌落生长、孢子萌发和萌发管伸长的测定 | 第24-25页 |
| 2.2.3 菌丝体生长的测定和结构的观察 | 第25页 |
| 2.2.4 胞内ROS的荧光染色 | 第25页 |
| 2.2.5 抗氧化酶活性和基因表达的检测 | 第25-27页 |
| 2.2.6 DNA氧化损伤的检测 | 第27-28页 |
| 2.3 结果与分析 | 第28-36页 |
| 2.3.1 H_2S对黑曲霉和意大利青霉侵染果实的影响 | 第28-29页 |
| 2.3.2 H_2S对黑曲霉和意大利青霉等真菌菌落生长、孢子萌发和萌发管伸长的影响 | 第29-33页 |
| 2.3.3 H_2S对黑曲霉菌丝体生长和结构的影响 | 第33页 |
| 2.3.4 H_2S对黑曲霉胞内ROS的影响 | 第33-34页 |
| 2.3.5 H_2S对黑曲霉抗氧化酶活性和基因表达的影响 | 第34-35页 |
| 2.3.6 H_2S对黑曲霉DNA氧化损伤的影响 | 第35-36页 |
| 2.4 讨论与小结 | 第36-38页 |
| 第三章 H_2S抑制食源性细菌生长的效应和机制研究 | 第38-53页 |
| 3.1 实验材料、试剂及设备 | 第38-39页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第38页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第38页 |
| 3.1.3 主要设备 | 第38-39页 |
| 3.2 实验方法 | 第39-42页 |
| 3.2.1 细菌菌落生长的测定 | 第39页 |
| 3.2.2 胞内ROS的荧光染色和还原型谷胱甘肽含量的测定 | 第39-40页 |
| 3.2.3 抗氧化酶活性及抗氧化相关基因表达的检测 | 第40-41页 |
| 3.2.4 脂质过氧化和DNA氧化损伤的检测 | 第41-42页 |
| 3.2.5 抗坏血酸延缓H_2S对大肠杆菌毒性的检测 | 第42页 |
| 3.3 结果与分析 | 第42-51页 |
| 3.3.1 H_2S对食源性病菌等细菌菌落生长的影响 | 第43-47页 |
| 3.3.2 H_2S对大肠杆菌胞内ROS和GSH含量的影响 | 第47-48页 |
| 3.3.3 H_2S对大肠杆菌抗氧化酶活性和抗氧化相关基因表达的影响 | 第48-49页 |
| 3.3.4 H_2S对大肠杆菌脂质过氧化和DNA氧化损伤的影响 | 第49-51页 |
| 3.3.5 抗坏血酸对大肠杆菌H_2S敏感性的影响 | 第51页 |
| 3.4 讨论与小结 | 第51-53页 |
| 第四章 黑曲霉catA和cpeB缺失体的构建及其对H_2S敏感性的研究 | 第53-66页 |
| 4.1 实验材料、试剂及设备 | 第54-55页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第54页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第54页 |
| 4.1.3 主要设备 | 第54-55页 |
| 4.2 实验方法 | 第55-60页 |
| 4.2.1 黑曲霉catA和cpeB敲除载体的构建 | 第55-58页 |
| 4.2.2 黑曲霉原生质体制备及聚乙二醇转化 | 第58-59页 |
| 4.2.3 黑曲霉catA和cpeB缺失体的筛选 | 第59-60页 |
| 4.2.4 黑曲霉catA和cpeB缺失体对H_2O_2和H_2S敏感性测定 | 第60页 |
| 4.3 结果与分析 | 第60-65页 |
| 4.3.1 catA与cpeB侧翼片段AB、CD和ABCD的PCR合成及纯化 | 第60-61页 |
| 4.3.2 catA与cpeB侧翼片段片段ABCD和T载体的连接及鉴定 | 第61-62页 |
| 4.3.3 质粒T-ABCD和pC3的酶切及纯化 | 第62页 |
| 4.3.4 catA与cpeB侧翼片段片段ABCD和pC3的连接及鉴定 | 第62-63页 |
| 4.3.5 黑曲霉catA和cpeB缺失体的PCR鉴定 | 第63-64页 |
| 4.3.6 H_2O_2和H_2S对黑曲霉catA和cpeB缺失体生长的影响 | 第64-65页 |
| 4.4 讨论与小结 | 第65-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-74页 |
| 攻读硕士学位期间的学术活动及成果情况 | 第74页 |
