| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-16页 |
| 1.1 牛肠道病毒概述 | 第11-14页 |
| 1.1.1 牛肠道病毒（Bovine enterovirus,BEV）的分型 | 第11页 |
| 1.1.2 病毒的生物学特征 | 第11-12页 |
| 1.1.3 病毒的基因结构与功能 | 第12-13页 |
| 1.1.4 病毒的感染与复制过程 | 第13-14页 |
| 1.2 牛肠道病毒的流行病学 | 第14-15页 |
| 1.3 牛肠道病毒的诊断技术 | 第15-16页 |
| 1.4 本研究的目的与意义 | 第16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-26页 |
| 2.1 材料 | 第16-18页 |
| 2.1.1 毒株、菌株与质粒 | 第16页 |
| 2.1.2 实验动物、病料与血清 | 第16-17页 |
| 2.1.3 主要试剂与耗材 | 第17页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第17-18页 |
| 2.1.5 主要试剂的配制 | 第18页 |
| 2.2 试验方法 | 第18-24页 |
| 2.2.1 BEV-3D基因的获得及原核表达质粒p ET-30a35313D的构建 | 第18-20页 |
| 2.2.2 重组蛋白的表达 | 第20-21页 |
| 2.2.3 3D蛋白的抗原性分析 | 第21-22页 |
| 2.2.4 BEV 3D蛋白多克隆抗体的制备 | 第22页 |
| 2.2.5 BEV-3D-ELISA检测方法的建立及标准化 | 第22-24页 |
| 2.3 感染BEV病毒与3D抗体存在的相关性研究 | 第24-26页 |
| 2.3.1 动物感染试验 | 第24-25页 |
| 2.3.2 临床样品检测试验 | 第25-26页 |
| 3 实验结果 | 第26-40页 |
| 3.1 BEV-3D表达纯化与多抗体制备 | 第26-31页 |
| 3.1.1 3D基因克隆和表达载体p ET-30a35313D的构建及鉴定 | 第26-28页 |
| 3.1.2 BEV-3D蛋白的原核表达 | 第28-29页 |
| 3.1.3 多抗血清检测 | 第29-31页 |
| 3.2 BEV-3D-ELISA方法的建立及标准化 | 第31-35页 |
| 3.2.1 BEV-3D-ELISA相关条件的选择 | 第31-34页 |
| 3.2.2 BEV-3D-ELISA临界值的确定 | 第34页 |
| 3.2.3 BEV-3D-ELISA方法的特异性试验 | 第34-35页 |
| 3.2.4 BEV-3D-ELISA重复性试验 | 第35页 |
| 3.3 BEV-3D-ELISA方法的初步临床应用 | 第35-36页 |
| 3.4 BEV感染动物后病毒与3D抗体存在的相关性 | 第36-40页 |
| 3.4.1 小鼠动物感染模型 | 第36-37页 |
| 3.4.2 临床样品的检测结果 | 第37-40页 |
| 4 讨论 | 第40-45页 |
| 4.1 3D蛋白的选择依据 | 第40-41页 |
| 4.2 ELISA检测试验中所有条件的确定 | 第41-42页 |
| 4.3 ELISA方法中阳性值的确定 | 第42页 |
| 4.4 感染动物的选择 | 第42-43页 |
| 4.5 3D蛋白抗体与病毒存在的相关性分析 | 第43-44页 |
| 4.6 BEV-3D-ELISA方法的应用效果分析 | 第44-45页 |
| 5 结论 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第52页 |
