摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第1章 前言 | 第11-13页 |
第2章 材料与方法 | 第13-29页 |
2.1 实验材料 | 第13-17页 |
2.1.1 实验细胞 | 第13页 |
2.1.2 实验主要试剂 | 第13-14页 |
2.1.3 主要实验试剂配制 | 第14-16页 |
2.1.4 主要实验仪器 | 第16-17页 |
2.2 实验方法 | 第17-29页 |
2.2.1 细胞培养 | 第17页 |
2.2.2 MiR-375 mimic转染细胞 | 第17-18页 |
2.2.3 实验分组 | 第18页 |
2.2.4 实时荧光定量PCR检测miR-375 的表达 | 第18-21页 |
2.2.5 CCK-8 检测转染 24h后细胞增殖 | 第21-22页 |
2.2.6 流式细胞仪(Annexin V/PI荧光双染)检测转染 24h后细胞凋亡 | 第22-23页 |
2.2.7 流式细胞仪(PI染色)检测转染 24h后细胞周期 | 第23页 |
2.2.8 实时荧光定量PCR检测PDK1 mRNA及IGF-1R mRNA | 第23-25页 |
2.2.9 Western Blot检测PDK1及IGF-1R蛋白表达 | 第25-28页 |
2.2.10 统计学方法 | 第28-29页 |
第3章 结果 | 第29-44页 |
3.1 MiR-375 mimic转染介导miR-375 表达上调 | 第29-32页 |
3.1.1 观察细胞转染效率 | 第29页 |
3.1.2 实时荧光定量PCR检测miR-375 表达水平评价基因转染效率 | 第29-32页 |
3.2 上调细胞中miR-375 表达后,MM1.S及RPMI-8226 细胞的增殖活性明显下降 | 第32-33页 |
3.3 上调细胞中miR-375 表达后,MM1.S及RPMI-8226 细胞的凋亡诱导活性明显增加 | 第33-35页 |
3.4 上调细胞中miR-375 表达后,MM1.S及RPMI-8226 细胞阻滞于G1期比例明显增加 | 第35-37页 |
3.5 上调细胞中miR-375 表达后,MM1.S与RPMI-8226 细胞中PDK1 m RNA和蛋白的表达均降低 | 第37-40页 |
3.6 上调细胞中miR-375 表达后,MM1.S与RPMI-8226 细胞中IGF-1R m RNA和蛋白的表达均降低 | 第40-44页 |
第4章 讨论 | 第44-50页 |
4.1 miR-375 与MM | 第44-45页 |
4.1.1 miR-375 转染 | 第44页 |
4.1.2 MiR-375 在MM中起抑癌基因作用 | 第44-45页 |
4.2 MiR-375 通过抑制MM中PDK1、IGF-1R表达起抑癌基因作用 | 第45-50页 |
4.2.1 MiR-375 通过抑制MM中PDK1表达起抑癌基因作用 | 第45-48页 |
4.2.2 MiR-375 通过抑制MM中IGF-1R表达起抑癌基因作用 | 第48-50页 |
第5章 结论 | 第50-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-56页 |
综述 | 第56-64页 |
参考文献 | 第61-64页 |