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MicroRNA-375调控PDK1与IGF-1R影响骨髓瘤细胞增殖及机制研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
第1章 前言第11-13页
第2章 材料与方法第13-29页
    2.1 实验材料第13-17页
        2.1.1 实验细胞第13页
        2.1.2 实验主要试剂第13-14页
        2.1.3 主要实验试剂配制第14-16页
        2.1.4 主要实验仪器第16-17页
    2.2 实验方法第17-29页
        2.2.1 细胞培养第17页
        2.2.2 MiR-375 mimic转染细胞第17-18页
        2.2.3 实验分组第18页
        2.2.4 实时荧光定量PCR检测miR-375 的表达第18-21页
        2.2.5 CCK-8 检测转染 24h后细胞增殖第21-22页
        2.2.6 流式细胞仪(Annexin V/PI荧光双染)检测转染 24h后细胞凋亡第22-23页
        2.2.7 流式细胞仪(PI染色)检测转染 24h后细胞周期第23页
        2.2.8 实时荧光定量PCR检测PDK1 mRNA及IGF-1R mRNA第23-25页
        2.2.9 Western Blot检测PDK1及IGF-1R蛋白表达第25-28页
        2.2.10 统计学方法第28-29页
第3章 结果第29-44页
    3.1 MiR-375 mimic转染介导miR-375 表达上调第29-32页
        3.1.1 观察细胞转染效率第29页
        3.1.2 实时荧光定量PCR检测miR-375 表达水平评价基因转染效率第29-32页
    3.2 上调细胞中miR-375 表达后,MM1.S及RPMI-8226 细胞的增殖活性明显下降第32-33页
    3.3 上调细胞中miR-375 表达后,MM1.S及RPMI-8226 细胞的凋亡诱导活性明显增加第33-35页
    3.4 上调细胞中miR-375 表达后,MM1.S及RPMI-8226 细胞阻滞于G1期比例明显增加第35-37页
    3.5 上调细胞中miR-375 表达后,MM1.S与RPMI-8226 细胞中PDK1 m RNA和蛋白的表达均降低第37-40页
    3.6 上调细胞中miR-375 表达后,MM1.S与RPMI-8226 细胞中IGF-1R m RNA和蛋白的表达均降低第40-44页
第4章 讨论第44-50页
    4.1 miR-375 与MM第44-45页
        4.1.1 miR-375 转染第44页
        4.1.2 MiR-375 在MM中起抑癌基因作用第44-45页
    4.2 MiR-375 通过抑制MM中PDK1、IGF-1R表达起抑癌基因作用第45-50页
        4.2.1 MiR-375 通过抑制MM中PDK1表达起抑癌基因作用第45-48页
        4.2.2 MiR-375 通过抑制MM中IGF-1R表达起抑癌基因作用第48-50页
第5章 结论第50-51页
致谢第51-52页
参考文献第52-56页
综述第56-64页
    参考文献第61-64页

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