| 摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9页 |
| 1 引言 | 第11-21页 |
| 1.1 苏云金芽胞杆菌 | 第11页 |
| 1.2 苏云金芽胞杆菌的分布 | 第11-12页 |
| 1.3 苏云金芽胞杆菌cry基因的分类与鉴定 | 第12-18页 |
| 1.3.1 cry基因的分类 | 第12-17页 |
| 1.3.2 苏云金芽胞杆菌cry基因的鉴定 | 第17-18页 |
| 1.4 几种鞘翅目害虫的危害 | 第18页 |
| 1.5 对鞘翅目害虫有活性的cry7、cry8类基因的研究进展 | 第18-20页 |
| 1.6 本研究的目的与意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-30页 |
| 2.1 试验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第21-22页 |
| 2.2 试剂 | 第22-23页 |
| 2.2.1 培养基 | 第22页 |
| 2.2.2 抗生素 | 第22页 |
| 2.2.3 生化试剂 | 第22页 |
| 2.2.4 E.coli质粒DNA提取 | 第22页 |
| 2.2.5 核酸电泳试剂 | 第22页 |
| 2.2.6 SDS-PAGE试剂 | 第22-23页 |
| 2.2.7 标准分子量 | 第23页 |
| 2.2.8 其他试剂 | 第23页 |
| 2.3 供试昆虫 | 第23页 |
| 2.4 仪器设备 | 第23-24页 |
| 2.5 研究方法 | 第24-30页 |
| 2.5.1 样品采集与菌株分离 | 第24页 |
| 2.5.2 菌株晶体的形态观察 | 第24页 |
| 2.5.3 Bt基因组提取 | 第24-25页 |
| 2.5.4 cry7、cry8基因型的鉴定 | 第25页 |
| 2.5.5 DNA回收 | 第25-26页 |
| 2.5.6 连接反应 | 第26页 |
| 2.5.7 E.coli感受态细胞制备 | 第26页 |
| 2.5.8 大肠杆菌转化 | 第26页 |
| 2.5.9 E.coli质粒DNA提取 | 第26-27页 |
| 2.5.10 cry7、cry8基因的扩增、克隆及序列测定 | 第27-28页 |
| 2.5.11 阳性转化子的筛选 | 第28页 |
| 2.5.12 新基因在大肠杆菌中表达研究 | 第28页 |
| 2.5.13 蛋白电泳检测 | 第28-29页 |
| 2.5.14 杀虫活性测定 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-38页 |
| 3.1 菌株的分离鉴定 | 第30-31页 |
| 3.1.1 菌株的形态 | 第30页 |
| 3.1.2 菌株cry7、cry8基因型的鉴定 | 第30-31页 |
| 3.2 新基因的克隆及序列分析 | 第31-32页 |
| 3.2.1 cry7、cry8基因的克隆及序列分析 | 第31-32页 |
| 3.2.2 阳性克隆体的验证 | 第32页 |
| 3.3 新基因在大肠杆菌中的表达 | 第32-36页 |
| 3.3.1 cry7基因在大肠杆菌中的表达 | 第32-33页 |
| 3.3.2 Cry7Ab蛋白的结构分析 | 第33-35页 |
| 3.3.3 cry8基因在大肠杆菌中的表达 | 第35-36页 |
| 3.4 蛋白杀虫活性的研究 | 第36-38页 |
| 3.4.1 Cry7Ab蛋白对大猿叶甲的生物活性测定结果 | 第36页 |
| 3.4.2 Cry8Ab蛋白对大猿叶甲的生物活性测定结果 | 第36-37页 |
| 3.4.3 复筛 | 第37-38页 |
| 4 讨论 | 第38-40页 |
| 5 结论 | 第40-41页 |
| 致谢 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-50页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第50页 |
