| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 前言 | 第10-18页 |
| 1 无义密码子的有义识别编码 | 第10-12页 |
| 2 CVB3简述 | 第12-15页 |
| 3 本课题的研究内容和意义 | 第15-18页 |
| 第一章 琥珀抑制识别系统的构建表达 | 第18-38页 |
| 1.1 材料、试剂及仪器 | 第18-22页 |
| 1.1.1 材料来源和引物设计 | 第18-19页 |
| 1.1.2 溶液配制 | 第19-20页 |
| 1.1.3 试剂及耗材 | 第20-21页 |
| 1.1.4 仪器设备 | 第21-22页 |
| 1.2 研究方法 | 第22-29页 |
| 1.2.1 构建pcDNA3.1-EcYRS/tRNA真核表达质粒系列 | 第22-24页 |
| 1.2.2 克隆构建EGFP-Tyr39UAG琥珀抑制真核表达质粒 | 第24-25页 |
| 1.2.3 实时荧光定量PCR鉴定EcTyrRS表达 | 第25-26页 |
| 1.2.4 Western Blot鉴定EcYRSFlag表达 | 第26-28页 |
| 1.2.5 共转染EcYRS/tRNA和EGFPY39UAG | 第28页 |
| 1.2.6 流式细胞术分析EGFP表达情况 | 第28-29页 |
| 1.3 研究结果 | 第29-35页 |
| 1.3.1 成功构建pcDNA3.1-EcYRS | 第29-30页 |
| 1.3.2 成功构建pcDNA3.1-EcYRS/tRNA真核表达质粒系列 | 第30页 |
| 1.3.3 EcYRS/tRNA过表达正常 | 第30-32页 |
| 1.3.4 成功构建EGFP-Tyr39UAG | 第32页 |
| 1.3.5 琥珀抑制效率分析 | 第32-35页 |
| 1.4 讨论 | 第35-36页 |
| 1.5 小结 | 第36-38页 |
| 第二章 CVB3琥珀抑制突变体的构建及表达 | 第38-52页 |
| 2.1 材料、试剂及仪器 | 第40-41页 |
| 2.1.1 质粒来源和引物设计 | 第40页 |
| 2.1.2 溶液配制 | 第40页 |
| 2.1.3 试剂及耗材 | 第40-41页 |
| 2.1.4 仪器设备 | 第41页 |
| 2.2 研究方法 | 第41-45页 |
| 2.2.1 pCE-UAG突变体克隆构建 | 第41-42页 |
| 2.2.2 体外转录 | 第42-44页 |
| 2.2.3 RNA电泳 | 第44页 |
| 2.2.4 共转染 pCE RNA 与 EcYRS/tRNA | 第44-45页 |
| 2.2.5 RTCA评价细胞毒性 | 第45页 |
| 2.3 研究结果 | 第45-49页 |
| 2.3.1 成功构建并转录pCE突变体 | 第45-47页 |
| 2.3.2 共转pCE-UAG与EcYRS/tRNA引起病毒CPE | 第47-49页 |
| 2.4 讨论 | 第49-50页 |
| 2.5 小结 | 第50-52页 |
| 结论与展望 | 第52-54页 |
| 主要结论 | 第52页 |
| 工作展望 | 第52-54页 |
| 附录A | 第54-57页 |
| 附录B | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 攻读硕士期间发表的文章 | 第64-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
