| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 前言 | 第10-27页 |
| 1.1 脱氧雪腐镰刀菌烯醇（Deoxynivalenol, DON）概述 | 第10-11页 |
| 1.1.1 DON的来源和污染方式 | 第10页 |
| 1.1.2 DON的毒性表现与机理 | 第10-11页 |
| 1.2 DON对关节软骨的作用 | 第11-12页 |
| 1.2.1 关节软骨组织结构 | 第11页 |
| 1.2.2 DON与大骨节病 | 第11-12页 |
| 1.3 软骨细胞的死亡 | 第12-24页 |
| 1.3.1 细胞凋亡概述 | 第12-16页 |
| 1.3.2 软骨细胞凋亡 | 第16-19页 |
| 1.3.3 自噬概述 | 第19-21页 |
| 1.3.4 软骨细胞的自噬 | 第21-23页 |
| 1.3.5 自噬与凋亡的交互关系 | 第23-24页 |
| 1.4 本课题研究内容与意义 | 第24-27页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第27-48页 |
| 2.1 实验材料 | 第27-33页 |
| 2.1.1 实验所用细胞来源 | 第27页 |
| 2.1.2 主要仪器与设备 | 第27-28页 |
| 2.1.3 主要试剂、耗材 | 第28-30页 |
| 2.1.4 主要抗体 | 第30-31页 |
| 2.1.5 常用试剂配方 | 第31-33页 |
| 2.2 实验方法 | 第33-46页 |
| 2.2.1 人和大鼠软骨细胞分离、培养 | 第33-36页 |
| 2.2.2 实验分组 | 第36-37页 |
| 2.2.3 软骨细胞增殖存活率测定（CCK8法） | 第37页 |
| 2.2.4 RTCA S16 (Real Time Cellular Analysis)检测软骨细胞增殖曲线 | 第37-38页 |
| 2.2.5 蛋白提取与Western Blotting | 第38-41页 |
| 2.2.6 培养软骨细胞上清GAG测定 | 第41页 |
| 2.2.7 培养软骨细胞上清蛋白检测（ELISA法） | 第41-42页 |
| 2.2.8 细胞总RNA提取与实时荧光定量PCR（Real time PCR） | 第42-46页 |
| 2.3 数据处理与统计学分析 | 第46-48页 |
| 第三章 结果与分析 | 第48-69页 |
| 3.1 人和大鼠正常软骨细胞鉴定 | 第48-49页 |
| 3.1.1 软骨细胞形态观察 | 第48页 |
| 3.1.2 Ⅱ型胶原免疫组化染色 | 第48-49页 |
| 3.2 DON对体外培养软骨细胞增殖能力的影响 | 第49-53页 |
| 3.2.1 镜下观察DON浓度依赖性抑制软骨细胞增殖 | 第49-50页 |
| 3.2.2 CCK-8 法检测DON浓度依赖性抑制软骨细胞增殖 | 第50-51页 |
| 3.2.3 RTCA(Real Time Cellular Analysis)检测DON浓度依赖性抑制软骨细胞增殖 | 第51-52页 |
| 3.2.4 蛋白电泳（Western Blotting）检测DON浓度依赖性降低软骨细胞PCNA表达 | 第52-53页 |
| 3.3 DON对体外培养软骨细胞合成细胞外基质能力的影响 | 第53-56页 |
| 3.3.1 DON降低软骨细胞collagenⅡ和AGG基因的转录水平 | 第53-54页 |
| 3.3.2 DON降低软骨细胞内collagenⅡ和AGG的蛋白表达水平 | 第54-55页 |
| 3.3.3 DON降低软骨细胞培养上清中collagenⅡ和GAG的含量 | 第55-56页 |
| 3.4 DON对软骨细胞外基质代谢相关酶的作用 | 第56-61页 |
| 3.4.1 DON对软骨细胞外基质代谢相关酶基因转录水平的作用 | 第57-58页 |
| 3.4.2 DON对软骨细胞内基质代谢相关酶蛋白表达水平的作用 | 第58-59页 |
| 3.4.3 DON对软骨细胞培养上清中基质代谢相关酶浓度的作用 | 第59-61页 |
| 3.5 时间因素对DON软骨细胞毒性作用的影响 | 第61-62页 |
| 3.6 DON导致关节软骨损伤的机制探讨 | 第62-66页 |
| 3.6.1 不同浓度DON对软骨细胞自噬体及凋亡小体的影响 | 第63-65页 |
| 3.6.2 软骨细胞凋亡与自噬参与DON对软骨细胞外基质合成的调节 | 第65-66页 |
| 3.7 凋亡与自噬在DON所致关节软骨损伤中的作用 | 第66-69页 |
| 第四章 讨论 | 第69-76页 |
| 4.1 DON抑制关节软骨细胞的增殖能力 | 第70-71页 |
| 4.2 DON抑制关节软骨基质的合成、同时促进其降解 | 第71-72页 |
| 4.3 凋亡和自噬均参与DON所致关节软骨细胞死亡过程 | 第72-74页 |
| 4.4 凋亡与自噬在DON所致关节软骨损伤中发挥不同作用 | 第74-75页 |
| 4.5 DON亦可导致未成年人的关节软骨损伤，即可导致大骨节病 | 第75-76页 |
| 第五章 结论 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-90页 |
| 脱氧雪腐镰刀菌烯醇致关节软骨细胞凋亡的研究进展 | 第90-100页 |
| 参考文献 | 第95-100页 |
| 致谢 | 第100页 |
