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巴西橡胶树HbMYCs转录因子的靶基因鉴定

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
1 引言第10-21页
    1.1 橡胶树简介第10页
    1.2 胶乳产量的分子机理研究第10-12页
    1.3 天然橡胶生物合成途径第12-14页
    1.4 茉莉酸的信号转导途径第14-16页
    1.5 MYC转录因子第16-18页
    1.6 水通道蛋白PIP研究进展第18-19页
    1.7 研究目的和意义第19-20页
    1.8 技术路线第20-21页
2 材料与方法第21-39页
    2.1 材料与试剂第21-22页
        2.1.1 植物材料第21页
        2.1.2 菌株第21页
        2.1.3 载体第21页
        2.1.4 试剂及工具第21-22页
    2.2 实验方法第22-39页
        2.2.1 胁迫相关顺式作用元件寡聚核苷酸链的合成第22-23页
        2.2.2 pBait-AbAi载体构建第23-25页
        2.2.3 pBait-AbAi酵母转化第25-26页
        2.2.4 诱饵酵母报告基因本底表达水平检测第26页
        2.2.5 酵母单杂筛选HbMYCs转录因子互作顺式作用元件第26-27页
        2.2.6 HbMYCs转录因子互作启动子预测第27页
        2.2.7 酵母单杂验证HbMYCs转录因子与HbPIP2-P的互作第27-29页
        2.2.8 荧光素酶验证HbMYCs转录因子和HbPIP2;1-P的互作第29-35页
        2.2.9 乙烯MeJA处理的HbMYCs及HbPIP2;1的差异性表达分析第35-38页
        2.2.10 HbJAZ1与HbMYC3双分子荧光互补互作验证第38-39页
3 结果与分析第39-63页
    3.1 HbJAZ1与HbMYC3转录因子双分子荧光互补互作验证第39-43页
        3.1.1 双分子荧光互补载体的构建第39-42页
        3.1.2 HbMYC3和HbJAZ1双分子荧光互补验证第42-43页
    3.2 胁迫相关应答顺式作用元件自激活检测第43-46页
        3.2.1 酵母单杂载体构建第43-44页
        3.2.2 酵母单杂载体转化第44-46页
    3.3 与HbMYCs互作的顺式作用元件筛选及验证第46-48页
        3.3.1 pGADT7-Rec2-HHbMYCs质粒转化诱饵酵母菌株鉴定第46-47页
        3.3.2 HbMYCs转录因子互作顺式作用元件筛选分析第47-48页
    3.4 HbPIP2;1启动子功能元件分析第48-50页
    3.5 HbMYCs转录因子与HbPIP2;1-P酵母单杂互作分析第50-52页
        3.5.1 HbPIP2;1-P酵母报告基因本底表达水平检测第50页
        3.5.2 HbMYCs转化含pHis2.1-HbPIP2;1-P的Y187菌株阳性克隆鉴定第50-51页
        3.5.3 HbMYCs与HbPIP2;1-P酵母单杂互作验证第51-52页
    3.6 荧光素酶分析HbMYCs转录因子与HbPIP2;1-P的互作第52-59页
        3.6.1 HbPIP2;1-P的克隆第52页
        3.6.2 荧光素酶表达载体的构建第52-54页
        3.6.3 植物表达载体的构建第54-57页
        3.6.4 荧光素酶活性分析验证HbMYCs与HbPIP2;1-P相互作用第57-59页
    3.7 HbMYCs转录因子和HbPIP2;1的差异性表达分析第59-63页
        3.7.1 乙烯对HbMYCs和HbPIP2;1的差异性表达影响分析第59-61页
        3.7.2 茉莉酸对HbMYCs和HbPIP2;1的差异性表达影响分析第61-63页
4 讨论第63-66页
    4.1 JAZs与HbMYCs的互作研究第63页
    4.2 顺式作用元件与HbMYCs互作研究第63-64页
    4.3 激素对PIP2的表达调控预测第64-66页
5 结论第66-67页
参考文献第67-71页
缩略语表第71-72页
附录第72-75页
致谢第75页

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