摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
1 引言 | 第10-21页 |
1.1 橡胶树简介 | 第10页 |
1.2 胶乳产量的分子机理研究 | 第10-12页 |
1.3 天然橡胶生物合成途径 | 第12-14页 |
1.4 茉莉酸的信号转导途径 | 第14-16页 |
1.5 MYC转录因子 | 第16-18页 |
1.6 水通道蛋白PIP研究进展 | 第18-19页 |
1.7 研究目的和意义 | 第19-20页 |
1.8 技术路线 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-39页 |
2.1 材料与试剂 | 第21-22页 |
2.1.1 植物材料 | 第21页 |
2.1.2 菌株 | 第21页 |
2.1.3 载体 | 第21页 |
2.1.4 试剂及工具 | 第21-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-39页 |
2.2.1 胁迫相关顺式作用元件寡聚核苷酸链的合成 | 第22-23页 |
2.2.2 pBait-AbAi载体构建 | 第23-25页 |
2.2.3 pBait-AbAi酵母转化 | 第25-26页 |
2.2.4 诱饵酵母报告基因本底表达水平检测 | 第26页 |
2.2.5 酵母单杂筛选HbMYCs转录因子互作顺式作用元件 | 第26-27页 |
2.2.6 HbMYCs转录因子互作启动子预测 | 第27页 |
2.2.7 酵母单杂验证HbMYCs转录因子与HbPIP2-P的互作 | 第27-29页 |
2.2.8 荧光素酶验证HbMYCs转录因子和HbPIP2;1-P的互作 | 第29-35页 |
2.2.9 乙烯MeJA处理的HbMYCs及HbPIP2;1的差异性表达分析 | 第35-38页 |
2.2.10 HbJAZ1与HbMYC3双分子荧光互补互作验证 | 第38-39页 |
3 结果与分析 | 第39-63页 |
3.1 HbJAZ1与HbMYC3转录因子双分子荧光互补互作验证 | 第39-43页 |
3.1.1 双分子荧光互补载体的构建 | 第39-42页 |
3.1.2 HbMYC3和HbJAZ1双分子荧光互补验证 | 第42-43页 |
3.2 胁迫相关应答顺式作用元件自激活检测 | 第43-46页 |
3.2.1 酵母单杂载体构建 | 第43-44页 |
3.2.2 酵母单杂载体转化 | 第44-46页 |
3.3 与HbMYCs互作的顺式作用元件筛选及验证 | 第46-48页 |
3.3.1 pGADT7-Rec2-HHbMYCs质粒转化诱饵酵母菌株鉴定 | 第46-47页 |
3.3.2 HbMYCs转录因子互作顺式作用元件筛选分析 | 第47-48页 |
3.4 HbPIP2;1启动子功能元件分析 | 第48-50页 |
3.5 HbMYCs转录因子与HbPIP2;1-P酵母单杂互作分析 | 第50-52页 |
3.5.1 HbPIP2;1-P酵母报告基因本底表达水平检测 | 第50页 |
3.5.2 HbMYCs转化含pHis2.1-HbPIP2;1-P的Y187菌株阳性克隆鉴定 | 第50-51页 |
3.5.3 HbMYCs与HbPIP2;1-P酵母单杂互作验证 | 第51-52页 |
3.6 荧光素酶分析HbMYCs转录因子与HbPIP2;1-P的互作 | 第52-59页 |
3.6.1 HbPIP2;1-P的克隆 | 第52页 |
3.6.2 荧光素酶表达载体的构建 | 第52-54页 |
3.6.3 植物表达载体的构建 | 第54-57页 |
3.6.4 荧光素酶活性分析验证HbMYCs与HbPIP2;1-P相互作用 | 第57-59页 |
3.7 HbMYCs转录因子和HbPIP2;1的差异性表达分析 | 第59-63页 |
3.7.1 乙烯对HbMYCs和HbPIP2;1的差异性表达影响分析 | 第59-61页 |
3.7.2 茉莉酸对HbMYCs和HbPIP2;1的差异性表达影响分析 | 第61-63页 |
4 讨论 | 第63-66页 |
4.1 JAZs与HbMYCs的互作研究 | 第63页 |
4.2 顺式作用元件与HbMYCs互作研究 | 第63-64页 |
4.3 激素对PIP2的表达调控预测 | 第64-66页 |
5 结论 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-71页 |
缩略语表 | 第71-72页 |
附录 | 第72-75页 |
致谢 | 第75页 |