| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩写词表 | 第13-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-22页 |
| 1.1 体外细胞共培养模型 | 第14-15页 |
| 1.1.1 细胞共培养模型简述 | 第14页 |
| 1.1.2 细胞共培养模型应用 | 第14-15页 |
| 1.2 丙烯酰胺研究概况 | 第15-17页 |
| 1.2.1 丙烯酰胺的基本性质、用途及接触途径 | 第15-16页 |
| 1.2.2 丙烯酰胺的一般毒性研究 | 第16页 |
| 1.2.3 丙烯酰胺的神经毒性研究 | 第16-17页 |
| 1.2.4 丙烯酰胺的其它毒性 | 第17页 |
| 1.3 槟榔和虎杖的药理作用和毒性研究现状 | 第17-20页 |
| 1.3.1 槟榔的药理作用和毒性研究 | 第17-19页 |
| 1.3.2 虎杖的药理作用和毒性研究 | 第19-20页 |
| 1.4 本论文研究的目的及意义 | 第20-21页 |
| 1.5 本论文研究的主要内容 | 第21-22页 |
| 第二章 海马神经元和星形胶质细胞共培养模型的建立 | 第22-32页 |
| 引言 | 第22页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第22页 |
| 2.1.2 主要实验试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.3 仪器与设备 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-26页 |
| 2.2.1 主要试剂的配制 | 第23页 |
| 2.2.2 海马神经元的分离和培养 | 第23-24页 |
| 2.2.3 海马神经元纯度鉴定 | 第24页 |
| 2.2.4 星形胶质细胞的分离和培养 | 第24页 |
| 2.2.5 星形胶质细胞传代 | 第24页 |
| 2.2.6 星形胶质细胞纯度鉴定 | 第24-25页 |
| 2.2.7 海马神经元与星形胶质细胞直接混合共培养 | 第25页 |
| 2.2.8 海马神经元和星形胶质细胞transwell小室分离共培养 | 第25页 |
| 2.2.9 海马神经元免疫荧光染色 | 第25页 |
| 2.2.10 数据统计 | 第25-26页 |
| 2.3 结果与分析 | 第26-30页 |
| 2.3.1 海马神经元纯度鉴定 | 第26页 |
| 2.3.2 星形胶质细胞传代 | 第26-27页 |
| 2.3.3 星形胶质细胞纯度鉴定 | 第27-28页 |
| 2.3.4 直接混合共培养与transwell小室分离共培养细胞形态变化 | 第28页 |
| 2.3.5 直接混合共培养和transwell小室分离共培养神经元突起数目及长度比较 | 第28-30页 |
| 2.4 讨论 | 第30-31页 |
| 2.5 本章小结 | 第31-32页 |
| 第三章 体外神经毒性评价方法的建立 | 第32-53页 |
| 引言 | 第32页 |
| 3.1 实验材料 | 第32-33页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第32页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第32-33页 |
| 3.1.3 仪器与设备 | 第33页 |
| 3.2 实验方法 | 第33-37页 |
| 3.2.1 主要试剂的配制 | 第33-34页 |
| 3.2.2 MTT法测定细胞存活率 | 第34页 |
| 3.2.3 乳酸脱氢酶（LDH）测定 | 第34页 |
| 3.2.4 共培养细胞形态学观察 | 第34-35页 |
| 3.2.5 细胞内游离Ca~(2+)浓度测定 | 第35页 |
| 3.2.6 线粒体膜电位检测 | 第35页 |
| 3.2.7 ACR对共培养细胞中海马神经元的突起数目和长度的影响 | 第35页 |
| 3.2.8 ACR对共培养细胞中海马神经元细胞骨架蛋白（Arc）表达的影响 | 第35-36页 |
| 3.2.9 ACR对共培养细胞中海马神经元突触素（SYN）蛋白表达的影响 | 第36页 |
| 3.2.10 ACR对共培养细胞中海马神经元β-ΙΙΙ-Tubulin蛋白表达的影响 | 第36页 |
| 3.2.11 神经递质含量的测定 | 第36-37页 |
| 3.2.12 数据统计 | 第37页 |
| 3.3 结果与分析 | 第37-50页 |
| 3.3.1 ACR对共培养细胞存活率的影响 | 第37-38页 |
| 3.3.2 ACR对LDH释放的影响 | 第38页 |
| 3.3.3 AO/EB染色形态观察 | 第38-39页 |
| 3.3.4 ACR对细胞内Ca~(2+)浓度的影响 | 第39-40页 |
| 3.3.5 ACR对线粒体膜电位的影响 | 第40-42页 |
| 3.3.6 ACR对共培养细胞中海马神经元的突起数目和长度的影响 | 第42-43页 |
| 3.3.7 ACR对共培养细胞中海马神经元Arc蛋白的影响 | 第43-45页 |
| 3.3.8 ACR对共培养细胞中海马神经元SYN蛋白的影响 | 第45-47页 |
| 3.3.9 ACR对共培养细胞中海马神经元β-ΙΙΙ-Tubulin蛋白的影响 | 第47-49页 |
| 3.3.10 ACR对共培养细胞神经递质含量的影响 | 第49-50页 |
| 3.4 讨论 | 第50-52页 |
| 3.5 本章小结 | 第52-53页 |
| 第四章 槟榔和虎杖水煎液的体外神经毒性早期评价 | 第53-78页 |
| 引言 | 第53页 |
| 4.1 实验材料 | 第53-54页 |
| 4.1.1 实验材料与试剂 | 第53页 |
| 4.1.2 仪器与设备 | 第53-54页 |
| 4.2 实验方法 | 第54-56页 |
| 4.2.1 主要试剂的配制 | 第54-55页 |
| 4.2.2 槟榔水煎液和虎杖水煎液的制备 | 第55页 |
| 4.2.3 细胞存活率测定 | 第55页 |
| 4.2.4 LDH释放量测定 | 第55页 |
| 4.2.5 AO/EB染色 | 第55页 |
| 4.2.6 细胞内Ca~(2+)浓度测定 | 第55页 |
| 4.2.7 线粒体膜电位检测 | 第55页 |
| 4.2.8 Western blot检测共培养细胞中神经元SYN、Arc和β-ΙΙΙ Tubulin蛋白的表达 | 第55-56页 |
| 4.2.9 神经递质NO、ACh和谷氨酸含量测定 | 第56页 |
| 4.2.10 数据统计 | 第56页 |
| 4.3 结果与分析 | 第56-76页 |
| 4.3.1 槟榔和虎杖的水煎液对共培养细胞存活率的影响 | 第56-59页 |
| 4.3.2 槟榔水煎液和虎杖水煎液对LDH释放的影响 | 第59-61页 |
| 4.3.3 AO/EB双染观察共培养细胞形态 | 第61-62页 |
| 4.3.4 槟榔水煎液和虎杖水煎液对共培养细胞内Ca2+浓度的影响 | 第62-65页 |
| 4.3.5 槟榔水煎液和虎杖水煎液对共培养细胞线粒体膜电位的影响 | 第65-68页 |
| 4.3.6 槟榔和虎杖的水煎液对共培养细胞中神经元SYN、Arc和β-ΙΙΙ-Tubulin蛋白表达的影响 | 第68-74页 |
| 4.3.7 槟榔水煎液和虎杖水煎液对共培养细胞神经递质含量的影响 | 第74-76页 |
| 4.4 讨论 | 第76-77页 |
| 4.5 本章小结 | 第77-78页 |
| 第五章 结论与展望 | 第78-80页 |
| 5.1 结论 | 第78页 |
| 5.2 展望 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第86页 |
