| 摘要 | 第4-9页 |
| abstract | 第9-14页 |
| 符号说明 | 第19-21页 |
| 引言 | 第21-24页 |
| 第一部分 盐酸千金藤碱对人卵巢癌细胞增殖、侵袭能力的影响及其作用机制 | 第24-55页 |
| 前言 | 第24-25页 |
| 1 材料 | 第25-28页 |
| 1.1 细胞株 | 第25页 |
| 1.2 主要仪器 | 第25-26页 |
| 1.3 药品与试剂 | 第26-27页 |
| 1.4 药品试剂配制 | 第27-28页 |
| 1.4.1 细胞培养试剂配制 | 第27页 |
| 1.4.2 其他药品试剂配制 | 第27-28页 |
| 2 方法 | 第28-36页 |
| 2.1 细胞培养 | 第28-30页 |
| 2.1.1 细胞换液 | 第28页 |
| 2.1.2 细胞传代 | 第28-29页 |
| 2.1.3 细胞冻存 | 第29页 |
| 2.1.4 细胞复苏 | 第29页 |
| 2.1.5 细胞计数 | 第29-30页 |
| 2.2 MTT法检测CH对细胞增殖的影响 | 第30-31页 |
| 2.3 ANNEXIN Ⅴ- FITC / PI双染法检测CH对细胞凋亡的影响 | 第31页 |
| 2.4 划痕实验检测CH对细胞迁移的影响 | 第31-32页 |
| 2.5 TRANSWELL法检测CH对细胞侵袭的影响 | 第32-33页 |
| 2.6 RT-QPCR检测CH对凋亡和侵袭相关基因表达的影响 | 第33-36页 |
| 2.6.1 细胞处理 | 第33页 |
| 2.6.2 Trizol法提取细胞总RNA | 第33-34页 |
| 2.6.3 引物设计与合成 | 第34页 |
| 2.6.4 逆转录 | 第34-35页 |
| 2.6.5 实时定量PCR扩增Bcl-2 和MMP-2 基因 | 第35-36页 |
| 2.7 统计学分析 | 第36页 |
| 3 结果 | 第36-46页 |
| 3.1 CH抑制卵巢癌A2780细胞的增殖 | 第36-38页 |
| 3.2 CH促进卵巢癌A2780细胞的凋亡 | 第38-40页 |
| 3.3 CH抑制卵巢癌细胞A2780的迁移 | 第40-42页 |
| 3.4 CH抑制卵巢癌A2780细胞的侵袭 | 第42-44页 |
| 3.5 CH降低卵巢癌A2780细胞BCL-2、MMP-2 和MMP-9 的MRNA表达水平 | 第44-46页 |
| 4 讨论 | 第46-48页 |
| 5 小结 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 第二部分 盐酸千金藤碱对人卵巢癌细胞多药耐药的逆转及其作用机制 | 第55-88页 |
| 前言 | 第55-56页 |
| 1 材料 | 第56-59页 |
| 1.1 细胞株 | 第56页 |
| 1.2 主要仪器 | 第56-57页 |
| 1.3 药品与试剂 | 第57-58页 |
| 1.4 药品试剂配置 | 第58-59页 |
| 1.4.1 细胞培养试剂和药品配制 | 第58页 |
| 1.4.2 Western blot试剂配制 | 第58-59页 |
| 2 方法 | 第59-67页 |
| 2.1 细胞培养 | 第59-60页 |
| 2.2 MTT法检测CH对A2780/TAXOL耐药的逆转作用 | 第60-61页 |
| 2.2.1 A2780/Taxol细胞耐药性的鉴定 | 第60页 |
| 2.2.2 CH对A2780/Taxol细胞耐药的逆转作用 | 第60-61页 |
| 2.3 罗丹明蓄积实验检测CH对P-GP功能的影响 | 第61-62页 |
| 2.4 RT-QPCR检测CH对MDR1 MRNA表达的影响 | 第62-63页 |
| 2.4.1 细胞处理 | 第62页 |
| 2.4.2 引物设计与合成 | 第62-63页 |
| 2.5 WESTERN BLOT检测CH对P-GP表达水平的影响 | 第63-66页 |
| 2.5.1 细胞处理 | 第63页 |
| 2.5.2 细胞总蛋白的提取 | 第63-64页 |
| 2.5.3 BCA法测定蛋白浓度 | 第64页 |
| 2.5.4 聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）电泳 | 第64-65页 |
| 2.5.5 转膜 | 第65-66页 |
| 2.5.6 封闭 | 第66页 |
| 2.5.7 蛋白条带显色 | 第66页 |
| 2.6 WESTERN BLOT检测CH对PI3K/AKT信号传导通路的影响 | 第66-67页 |
| 2.6.1 细胞处理 | 第66-67页 |
| 2.6.2 细胞总蛋白提取、定量 | 第67页 |
| 2.6.3 Western blot | 第67页 |
| 2.7 统计学分析 | 第67页 |
| 3 结果 | 第67-79页 |
| 3.1 卵巢癌A2780/TAXOL细胞耐药性的鉴定 | 第67-68页 |
| 3.2 CH增强卵巢癌A2780/TAXOL细胞对紫杉醇的敏感性 | 第68-69页 |
| 3.3 CH增加RHO-123 在卵巢癌A2780/TAXOL细胞中的蓄积 | 第69-72页 |
| 3.4 CH降低卵巢癌A2780/TAXOL细胞MDR1基因MRNA的表达 | 第72-73页 |
| 3.5 CH降低卵巢癌A2780/TAXOL细胞P-GP的表达 | 第73-74页 |
| 3.6 CH降低卵巢癌A2780/TAXOL细胞T-AKT和P-AKT的表达 | 第74-77页 |
| 3.7 CH对卵巢癌A2780/TAXOL细胞PI3K/AKT通路的影响 | 第77-79页 |
| 4 讨论 | 第79-81页 |
| 5 小结 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-88页 |
| 全文结论 | 第88-89页 |
| 创新点 | 第89-90页 |
| 综述 肿瘤耐药及其逆转的研究现状 | 第90-122页 |
| 综述参考文献 | 第106-122页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文 | 第122-123页 |
| 致谢 | 第123页 |
