| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 英文缩略表 | 第9-11页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 材料与方法 | 第13-26页 |
| 1 实验材料 | 第13-14页 |
| 1.1 主要仪器 | 第13页 |
| 1.2 主要试剂 | 第13页 |
| 1.3 主要试剂的配制 | 第13-14页 |
| 1.4 主要实验耗材 | 第14页 |
| 2 实验方法 | 第14-25页 |
| 2.1 细胞株培养 | 第14页 |
| 2.2 设计Gli-1 基因的siRNA | 第14-15页 |
| 2.3 U937细胞转染 | 第15页 |
| 2.4 转染效率的鉴定 | 第15页 |
| 2.5 Gli-1 基因的最佳干扰片段筛选 | 第15页 |
| 2.6 人急性髓系白血病U937细胞株换液和传代以及冻存 | 第15-16页 |
| 2.7 人骨髓基质细胞系HS-5 的换液和传代以及冻存 | 第16-18页 |
| 2.7.1 人骨髓基质细胞HS-5 的换液 | 第16-17页 |
| 2.7.2 人骨髓基质细胞 HS-5 的传代 | 第17页 |
| 2.7.3 骨髓基质细胞 HS-5 的冻存 | 第17-18页 |
| 2.8 台盼蓝计数细胞的数目及肉眼判定细胞活力 | 第18页 |
| 2.9 共培养体系的建立 | 第18页 |
| 2.10 骨髓基质细胞HS-5 对U937siRNAGli-1 细胞增殖的影响 | 第18-19页 |
| 2.11 Annexin-V-PE与 7-AAD双染法检测骨髓基质细胞HS-5 对U937siRNAGli-1 细胞凋亡率 | 第19页 |
| 2.12 PI染色法检测骨髓基质细胞HS-5 对U937siRNAGli-1 细胞周期的影响 | 第19-20页 |
| 2.13 qPCR法检测骨髓基质细胞HS-5 对U937siRNAGli-1 细胞基因的影响 | 第20-22页 |
| 2.14 WB法检测骨髓基质细胞HS-5 对U937siRNAGli-1 细胞蛋白的影响 | 第22-25页 |
| 3. 统计学分析 | 第25-26页 |
| 结果 | 第26-40页 |
| 1. siRNA-Gli-1 转染效果和转染率的计算 | 第26-27页 |
| 2. qRT-PCR技术筛选Gli-1 基因的干扰片段 | 第27-28页 |
| 3.Western blot检测Gli-1 基因的干扰片段筛选 | 第28-29页 |
| 4.光学倒置显微镜下观察siRNA-Gli-1 转染U937细胞后的形态变化 | 第29-31页 |
| 5.姬姆萨染色对siRNA-Gli-1 转染U937细胞后的形态变化 | 第31页 |
| 6.CCK-8 试剂盒检测与HS-5 细胞共培养的U937siRNA-Gli-1 细胞增殖 | 第31-32页 |
| 7.AnnexinV-PE和 7-AAD双染法检测与HS-5 细胞共培养的U937siRNA-Gli-1 细胞凋亡 | 第32-34页 |
| 8.PI单染法检测与HS-5 细胞共培养的U937siRNA-Gli-1 细胞周期 | 第34-36页 |
| 9.实时荧光定量法检测与HS-5 细胞共培养的U937siRNA-Gli-1 细胞Bcl-2? Bcl-xl? Caspase-3 基因的表达 | 第36-38页 |
| 10.与HS-5 细胞共培养的U937siRNA-Gli-1 细胞Bcl-2mRNA? Bcl-xlmRNA? Caspase-3mRNA相对表达水平 | 第38-40页 |
| 讨论 | 第40-44页 |
| 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 综述 Hedgehog信号通路及抑制剂在肿瘤中的研究进展 | 第50-58页 |
| 1．Hedgehog信号通路 | 第51-55页 |
| 1.0 Hedgehog信号通路组成成分 | 第51-52页 |
| 1.1 Hedgehog信号通路与肿瘤 | 第52页 |
| 1.2 Hedgehog信号通路与消化道肿瘤 | 第52页 |
| 1.3 Hedgehog信号通路与前列腺癌 | 第52页 |
| 1.4 Hedgehog信号通路与急性髓系白血病 | 第52-53页 |
| 1.5 Hedgehog信号通路与抑制剂 | 第53页 |
| 1.6 HH配基为靶点的抑制剂 | 第53页 |
| 1.7 SMO蛋白为靶点的抑制剂 | 第53页 |
| 1.8 Gli为靶点的抑制剂 | 第53-54页 |
| 1.9 Hedgehog 信号通路抑制剂的副反应 | 第54页 |
| 1.10 结语 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 个人简介 | 第59-60页 |
| 附表 | 第60页 |
