| 中文摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 中英文缩略 | 第6-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-20页 |
| 第一节 炎症与2型糖尿病的研究进展 | 第10-14页 |
| 1. 2型糖尿病中的炎症 | 第10-12页 |
| 1.1 炎症的概述 | 第10页 |
| 1.2 2型糖尿病中的炎症 | 第10-12页 |
| 2. T2D的炎症机制 | 第12-14页 |
| 2.1 IL-1 β介导的通路机制 | 第12页 |
| 2.2 炎症与胰岛β细胞的凋亡 | 第12-13页 |
| 2.3 其他机制 | 第13-14页 |
| 第二节 自噬与2型糖尿病的研究进展 | 第14-18页 |
| 1. 自噬的概述 | 第14-15页 |
| 1.1 自噬的概念及类别 | 第14页 |
| 1.2 自噬的过程及其分子机制 | 第14-15页 |
| 2. 自噬在2型糖尿病中的作用 | 第15-17页 |
| 2.1 自噬在胰岛β细胞中的作用 | 第15-17页 |
| 2.2 自噬与2型糖尿病 | 第17页 |
| 3. 过度自噬的概述 | 第17-18页 |
| 第三节 组织蛋白酶B的研究进展 | 第18-19页 |
| 1. CathepsinB简介 | 第18页 |
| 2. CathepsinB与各种疾病的研究进展 | 第18-19页 |
| 展望 | 第19-20页 |
| 第二章 实验部分 | 第20-48页 |
| 第一节 在INS-1细胞中选择恰当PA处理浓度诱导凋亡及自噬 | 第20-27页 |
| 1. 实验材料与试剂 | 第20-21页 |
| 2. 实验方法 | 第21-23页 |
| 2.1 大鼠胰岛β细胞系INS-1细胞的培养 | 第21页 |
| 2.2 不同浓度PA处理INS-1细胞的凋亡情况检测 | 第21-22页 |
| 2.3 westernblot检测不同浓度PA处理INS-1细胞后自噬的情况 | 第22-23页 |
| 3. 实验结果 | 第23-26页 |
| 3.1 PA诱导INS-1细胞凋亡 | 第23-25页 |
| 3.2 PA诱导INS-1细胞自噬 | 第25-26页 |
| 4. 讨论 | 第26-27页 |
| 第二节 ATG7质粒转染INS-1细胞自噬过表达后炎症反应变化 | 第27-39页 |
| 1. 实验材料和试剂 | 第27-28页 |
| 2. 实验方法 | 第28-34页 |
| 2.1 购买回来的ATG7质粒pCMV6-AC-GFP的验证和扩增 | 第28-30页 |
| 2.2 ATG7质粒转染INS-1细胞 | 第30-31页 |
| 2.3 Western blot检测ATG7质粒转染后ATG7表达及自噬情况 | 第31页 |
| 2.4 实时定量PCR分析自噬过表达后,炎症因子的表达水平 | 第31-33页 |
| 2.5 自噬抑制后炎症因子的mRNA表达水平的变化 | 第33-34页 |
| 2.6 数据分析 | 第34页 |
| 3. 实验结果 | 第34-37页 |
| 3.1 质粒验证 | 第34-35页 |
| 3.2 选择质粒转染方案 | 第35页 |
| 3.3 Western blot分析转染质粒后ATG7蛋白表达及自噬过表达情况 | 第35-36页 |
| 3.4 QPCR检测自噬过表达后炎症因子的mRNA表达水平 | 第36页 |
| 3.5 自噬抑制后炎症因子的mRNA表达情况 | 第36-37页 |
| 4. 讨论 | 第37-39页 |
| 第三节 CTSB介导了自噬过表达诱导的炎症反应 | 第39-43页 |
| 1. 实验材料与试剂 | 第39页 |
| 2. 实验方法 | 第39-40页 |
| 2.1 Western blot检测经CA074处理后INS-1细胞的蛋白表达情况 | 第39-40页 |
| 2.2 实时定量PCR检测抑制CTSB表达后,各炎症因子的表达水平 | 第40页 |
| 2.3 数据分析 | 第40页 |
| 3. 实验结果 | 第40-41页 |
| 3.1 Westernblot分析CA074处理后CTSB蛋白表达 | 第40-41页 |
| 3.2 QPCR分析抑制CTSB表达后,炎症因子mRNA表达情况 | 第41页 |
| 4. 讨论 | 第41-43页 |
| 第四节 自噬过表达诱导的炎症因子水平升高是凋亡非依赖性的 | 第43-48页 |
| 1. 实验材料与试剂 | 第43页 |
| 2. 实验方法 | 第43-45页 |
| 2.1 Western blot检测使用抑制剂Z-DEVD-FMK后Caspase-3的表达 | 第43-44页 |
| 2.2 流式细胞术分析细胞凋亡情况 | 第44页 |
| 2.3 QPCR检测凋亡抑制后的炎症因子的mRNA表达情况 | 第44-45页 |
| 2.4 数据分析 | 第45页 |
| 3. 实验结果 | 第45-48页 |
| 3.1 Western blot检测Z-DEVD-FMK处理INS-1细胞后Caspase-3的表达情况 | 第45-46页 |
| 3.2 流式细胞术分析Z-DEVD-FMK处理后细胞的凋亡情况 | 第46-47页 |
| 3.3 QPCR检测凋亡抑制后炎症因子的mRNA表达水平 | 第47-48页 |
| 4. 讨论 | 第48页 |
| 全文小结 | 第48-50页 |
| 附录 | 第50-55页 |
| 参考文献 | 第55-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
