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汉滩病毒结构蛋白线性B细胞表位的筛选和鉴定

缩略语表第7-9页
中文摘要第9-12页
Abstract第12-15页
前言第16-18页
文献回顾第18-43页
    一、HFRS 及 HTNV 概述第18-20页
    二、HTV 诱导的免疫应答第20-31页
        1. HTV 诱导的体液免疫应答第21-25页
        2. HTV 诱导的细胞免疫应答第25-28页
        3. HTV 感染与固有免疫应答第28-31页
    三、B 细胞表位及研究方法第31-43页
        1. B 细胞表位研究方法第33-36页
        2. HTV 结构蛋白 B 细胞表位的研究第36-43页
第一部分 HTNV 核蛋白线性 B 细胞表位的筛选和鉴定第43-72页
    实验一 PEPSCAN 法 HTNV 核蛋白 B 细胞表位作图第43-58页
        1 材料第44-45页
        2 方法第45-47页
            2.1 合成肽的溶解第45页
            2.2 间接 ELISA 检测患者血清抗 NP 合成肽的反应谱第45-46页
            2.3 间接 ELISA 检测单克隆抗体抗 NP 合成肽的反应谱第46页
            2.4 统计学处理第46-47页
        3 结果第47-52页
            3.1 HFRS 患者血清抗体与 HTNV NP 合成肽反应谱第47-50页
            3.2 PepScan 数据处理第50-51页
            3.3 HTNV 特异性单克隆抗体与 HTNV NP 合成肽的反应谱第51-52页
        4 讨论第52-58页
    实验二 竞争 ELISA 证明患者血清抗体与合成肽反应的特异性第58-66页
        1 材料第58页
        2 方法第58页
        3 结果第58-63页
            3.1 滴定实验第58-59页
            3.2 竞争 ELISA 预实验第59-61页
            3.3 竞争 ELISA 实验第61-63页
        4 讨论第63-66页
    实验三 HTNV 核蛋白抗原肽特异性血清 IgG 在急性期的动态变化第66-72页
        1 材料第66页
        2 方法第66-67页
        3 结果第67-70页
            3.1 终点滴定法确定 HFRS 患者血清抗原肽特异性 IgG 滴度第67-68页
            3.2 HFRS 患者不同时间点血清抗原肽特异性 IgG 变化第68-70页
        4 讨论第70-72页
第二部分 鼠源性 HTNV 中和抗体 3D8 识别线性 B 细胞表位第72-97页
    实验一 鼠源性中和抗体 3D8 识别 HTNV 糖蛋白线性 B 细胞表位的鉴定第73-87页
        1 材料第73-74页
        2 方法第74-75页
            2.1 合成肽的溶解和分装第74页
            2.2 间接 ELISA 行 PepScan 法 B 细胞表位作图第74页
            2.3 竞争实验证明抗体-抗原肽结合的特异性第74-75页
            2.4 点杂交法行 PepScan 法 B 细胞表位作图第75页
        3 结果第75-81页
            3.1 PepScan 法筛选含有阳性 B 细胞表位的混合肽第75-76页
            3.2 PepScan 法筛选含有 B 细胞表位的单条肽第76-77页
            3.3 竞争实验进一步证实单克隆抗体结合单条肽的特异性第77-79页
            3.4 阳性反应肽临近肽与单克隆抗体的反应性第79页
            3.5 竞争 ELISA 证实单克隆抗体 3D8 与 G221 结合的特异性第79-80页
            3.6 硝酸纤维素(NC)膜包被混合肽行 PepScan 法 B 细胞表位作图第80-81页
            3.7 NC 膜包被单个 HTNV GP 合成肽行 PepScan 法 B 细胞表位作图第81页
        4 讨论第81-87页
    实验二 鼠源性中和抗体 3D8 识别 HTNV 糖蛋白线性 B 细胞表位的精细作图第87-93页
        1 材料第87-89页
        2 方法第89页
            2.1 iELISA 法检测单克隆抗体 3D8 与 G221 周围肽的反应性第89页
            2.2 点杂交法观察单克隆抗体 3D8 与 G221 周围肽的反应性第89页
            2.3 ECL-ELISA 法观察单克隆抗体 3D8 与 G221 周围肽的反应性第89页
        3 结果第89-90页
        4 讨论第90-93页
    实验三 丙氨酸扫描突变分析鼠源性中和抗体3D8识别的线性B细胞表位关键氨基酸残基第93-97页
        1 材料第93页
        2 方法第93页
            2.1 iELSA 法观察单克隆抗体 3D8 与丙氨酸替换肽的反应性第93页
            2.2 点杂交法观察单克隆抗体 3D8 与丙氨酸替换肽的反应性第93页
            2.3 ECL-ELISA 法观察单克隆抗体 3D8 与丙氨酸替换肽的反应性第93页
        3 结果第93-95页
        4 讨论第95-97页
小结第97-98页
参考文献第98-114页
个人简历和研究成果第114-115页
致谢第115页

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