| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 常用中英文缩写词 | 第10-11页 |
| 文献综述 | 第11-21页 |
| 引言 | 第21-22页 |
| 1 材料与方法 | 第22-35页 |
| 1.1 实验动物和病毒来源 | 第22页 |
| 1.2 主要仪器 | 第22页 |
| 1.3 主要试剂 | 第22-23页 |
| 1.4 主要试剂与培养基的配制 | 第23-25页 |
| 1.5 ALV-HF211的增殖与鉴定 | 第25-27页 |
| 1.5.1 复苏DF-1细胞 | 第25页 |
| 1.5.2 ALV-HF211的增殖 | 第25-26页 |
| 1.5.3 ALV-HF211的鉴定 | 第26-27页 |
| 1.6 SPF鸡胚的孵化 | 第27页 |
| 1.7 SPF鸡攻毒实验 | 第27-28页 |
| 1.8 引物设计 | 第28页 |
| 1.9 肝脏总RNA提取 | 第28-29页 |
| 1.10 基因组DNA的去除和cDNA第一链的合成 | 第29页 |
| 1.11 重组质粒的构建 | 第29-32页 |
| 1.11.1 PCR扩增 | 第30页 |
| 1.11.2 目的片段的胶回收及纯化 | 第30页 |
| 1.11.3 目的基因与载体连接 | 第30-31页 |
| 1.11.4 重组质粒转化宿主菌 | 第31页 |
| 1.11.5 阳性克隆的鉴定 | 第31页 |
| 1.11.6 重组质粒的抽提 | 第31-32页 |
| 1.11.7 重组质粒的鉴定与浓度测定 | 第32页 |
| 1.12 SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR(RT-qPCR)方法的建立 | 第32-33页 |
| 1.12.1 反应条件和反应体系的优化 | 第32页 |
| 1.12.2 标准曲线的建立 | 第32-33页 |
| 1.12.3 RT-PCR方法的特异性检测 | 第33页 |
| 1.13 RT-PCR检测MDA5、NLRP3/caspase-1炎症通路的转录水平 | 第33页 |
| 1.13.1 数据分析 | 第33页 |
| 1.14 石蜡切片的制备和染色 | 第33-35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-48页 |
| 2.1 感染DF-1细胞的ALV-HF211毒株鉴定 | 第35页 |
| 2.2 鸡肝脏总RNA提取结果 | 第35-36页 |
| 2.3 感染后不同时间点肝脏中病毒的增殖情况 | 第36页 |
| 2.4 病毒感染早期(1-17dpi)肝组织的病理变化 | 第36-38页 |
| 2.5 caspase-1、IL-1β和IL-18重组质粒的构建及目的基因检测结果 | 第38-39页 |
| 2.6 RT-qPCR方法的建立 | 第39-41页 |
| 2.6.1 反应体系与反应条件的优化结果 | 第39-40页 |
| 2.6.2 阳性标准品的实时扩增与标准曲线的建立 | 第40页 |
| 2.6.3 RT-qPCR检测方法的特异性 | 第40-41页 |
| 2.7 病毒感染早期(1-17dpi)肝组织中相关基因转录水平的变化 | 第41-45页 |
| 2.8 病毒感染后期的病理变化和致瘤性 | 第45-48页 |
| 3 讨论 | 第48-50页 |
| 3.1 ALV-J人工感染 | 第48页 |
| 3.2 抗病毒免疫信号通路 | 第48-50页 |
| 4 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 作者简介 | 第58页 |
