摘要 | 第5-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
第一章 绪论 | 第16-28页 |
1.1 长链非编码RNA | 第16-19页 |
1.1.1 长链非编码RNA概述 | 第16-17页 |
1.1.2 LncRNA的生物学功能 | 第17-19页 |
1.2 LncRNA与胃癌 | 第19-25页 |
1.2.1 胃癌中lncRNA的表达和功能 | 第19-21页 |
1.2.2 LncRNA在胃癌中的潜在作用机制 | 第21-24页 |
1.2.3 LncRNA在胃癌中的临床价值 | 第24-25页 |
1.3 LncRNA与外泌体 | 第25-27页 |
1.3.1 外泌体概述 | 第25-26页 |
1.3.2 外泌体与lncRNA | 第26-27页 |
1.4 LncRNA锌指结构反义转录本1概述 | 第27-28页 |
第二章 研究目的、方法、实验设计方案和意义 | 第28-31页 |
2.1 研究目的 | 第28-29页 |
2.2 实验设计方案及技术路线 | 第29-30页 |
2.3 研究意义 | 第30-31页 |
第三章 ZFAS1在胃癌中的表达及临床意义分析 | 第31-45页 |
3.1 材料 | 第31-33页 |
3.1.1 临床样本来源 | 第31页 |
3.1.2 细胞株 | 第31-32页 |
3.1.3 主要试剂 | 第32页 |
3.1.4 主要仪器和耗材 | 第32-33页 |
3.2 方法 | 第33-37页 |
3.2.1 细胞培养 | 第33页 |
3.2.2 细胞总RNA的提取 | 第33-34页 |
3.2.3 组织、血清样本收集 | 第34页 |
3.2.4 组织样本总RNA提取 | 第34-35页 |
3.2.5 血清样本总RNA提取 | 第35页 |
3.2.6 血清外泌体总RNA提取 | 第35-36页 |
3.2.7 逆转录PCR | 第36-37页 |
3.2.8 实时荧光定量RT-PCR | 第37页 |
3.2.9 统计分析 | 第37页 |
3.3 结果 | 第37-43页 |
3.3.1 ZFAS1在胃癌组织和细胞系中表达检测与临床意义分析 | 第37-40页 |
3.3.2 ZFAS1在胃癌患者血清中表达检测与临床意义分析 | 第40-41页 |
3.3.3 ZFAS1在胃癌患者血清中的稳定性 | 第41-42页 |
3.3.4 ZFAS1在胃癌患者血清外泌体中表达检测与临床意义分析 | 第42-43页 |
3.4 讨论 | 第43-45页 |
第四章 ZFAS1对胃癌细胞增殖和迁移的影响 | 第45-59页 |
4.1 材料 | 第45-47页 |
4.1.1 细胞株 | 第45页 |
4.1.2 主要试剂 | 第45-46页 |
4.1.3 主要仪器和耗材 | 第46-47页 |
4.2 方法 | 第47-50页 |
4.2.1 细胞培养 | 第47页 |
4.2.2 质粒转染 | 第47-48页 |
4.2.3 细胞总RNA提取及逆转录PCR | 第48页 |
4.2.4 实时荧光定量RT-PCR | 第48页 |
4.2.5 细胞生长曲线测定 | 第48页 |
4.2.6 细胞克隆形成实验 | 第48页 |
4.2.7 Transwell迁移实验 | 第48页 |
4.2.8 细胞周期测定 | 第48-49页 |
4.2.9 细胞凋亡检测 | 第49页 |
4.2.10 细胞总蛋白提取 | 第49页 |
4.2.11 Western blot | 第49-50页 |
4.2.12 统计分析 | 第50页 |
4.3 结果 | 第50-57页 |
4.3.1 ZFAS1干扰和过表达的效率检测 | 第50-51页 |
4.3.2 ZFAS1对胃癌细胞增殖的影响 | 第51-52页 |
4.3.3 ZFAS1对胃癌细胞细胞周期的影响 | 第52-53页 |
4.3.4 ZFAS1对胃癌细胞凋亡的影响 | 第53-55页 |
4.3.5 ZFAS1对胃癌细胞迁移的影响 | 第55-57页 |
4.3.6 ZFAS1对ERK信号通路的影响 | 第57页 |
4.4 讨论 | 第57-59页 |
第五章 胃癌细胞来源外泌体ZFAS1对胃癌细胞增殖和迁移的影响 | 第59-70页 |
5.1 材料 | 第59-60页 |
5.1.1 细胞株 | 第59页 |
5.1.2 主要试剂 | 第59-60页 |
5.1.3 主要仪器和耗材 | 第60页 |
5.2 方法 | 第60-62页 |
5.2.1 细胞培养 | 第60页 |
5.2.2 外泌体的分离纯化 | 第60页 |
5.2.3 外泌体形态检测 | 第60-61页 |
5.2.4 外泌体表面标志物检测 | 第61页 |
5.2.5 外泌体大小及分布检测 | 第61页 |
5.2.6 流式细胞分析 | 第61页 |
5.2.7 细胞总RNA提取及逆转录PCR | 第61页 |
5.2.8 实时荧光定量RT-PCR | 第61-62页 |
5.2.9 细胞生长曲线测定 | 第62页 |
5.2.10 细胞克隆形成实验 | 第62页 |
5.2.11 Transwell迁移实验 | 第62页 |
5.2.12 细胞周期测定 | 第62页 |
5.2.13 细胞总蛋白提取 | 第62页 |
5.2.14 Western blot | 第62页 |
5.2.15 统计分析 | 第62页 |
5.3 结果 | 第62-68页 |
5.3.1 外泌体生物学特性检测 | 第62-63页 |
5.3.2 含ZFAS1外泌体对胃癌细胞ZFAS1表达的影响 | 第63-64页 |
5.3.3 含ZFAS1外泌体对胃癌细胞增殖的影响 | 第64-65页 |
5.3.4 含ZFAS1外泌体对胃癌细胞细胞周期的影响 | 第65页 |
5.3.5 含ZFAS1外泌体对胃癌细胞凋亡的影响 | 第65-66页 |
5.3.6 含ZFAS1外泌体对胃癌细胞迁移的影响 | 第66-67页 |
5.3.7 含ZFAS1外泌体对ERK信号通路的影响 | 第67-68页 |
5.4 讨论 | 第68-70页 |
第六章 结论与展望 | 第70-71页 |
6.1 结论 | 第70页 |
6.2 展望 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-78页 |
致谢 | 第78-80页 |
攻读硕士学位期间科研成果及参加会议 | 第80页 |
一、科研成果 | 第80页 |
二、参加会议 | 第80页 |