| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-25页 |
| 1.1 苏云金芽孢杆菌 | 第9-13页 |
| 1.1.1 苏云金芽孢杆菌概述 | 第9页 |
| 1.1.2 Bt毒素的结构和功能 | 第9-11页 |
| 1.1.3 Bt毒素的作用机制 | 第11-13页 |
| 1.2 昆虫中肠Bt毒素结合蛋白 | 第13-19页 |
| 1.2.1 氨肽酶N(Aminopeptidase N) | 第13-16页 |
| 1.2.2 钙粘蛋白(Cadherin-like protein) | 第16-17页 |
| 1.2.3 碱性磷酸酯酶(Alkaline phosphatase) | 第17-18页 |
| 1.2.4 其他结合蛋白 | 第18-19页 |
| 1.3 昆虫中肠Bt毒素结合蛋白的受体功能研究 | 第19-23页 |
| 1.3.1 APN类结合蛋白的受体功能研究进展 | 第20-21页 |
| 1.3.2 钙粘蛋白类结合蛋白的受体功能研究进展 | 第21页 |
| 1.3.3 碱性磷酸酯酶类结合蛋白的受体功能研究进展 | 第21-22页 |
| 1.3.4 其他类结合蛋白的受体功能研究进展 | 第22-23页 |
| 1.4 本研究内容与意义 | 第23-25页 |
| 第二章 材料与方法 | 第25-37页 |
| 2.1 供试昆虫及饲养 | 第25页 |
| 2.2 供试试剂与仪器 | 第25-26页 |
| 2.3 二化螟中肠BBMV总蛋白的提取 | 第26页 |
| 2.4 二化螟中肠Cry1Ac毒素结合蛋白的分离 | 第26-28页 |
| 2.5 二化螟中肠Cry1Ac毒素结合蛋白的鉴定 | 第28页 |
| 2.6 二化螟中肠apn3、apn4基因的克隆 | 第28-30页 |
| 2.6.1 二化螟总RNA的提取 | 第28页 |
| 2.6.2 cDNA第一链的合成 | 第28-29页 |
| 2.6.3 apn3、apn4基因克隆PCR | 第29页 |
| 2.6.4 目标片段PCR纯化产物与质粒载体的连接 | 第29-30页 |
| 2.6.5 转化和培养 | 第30页 |
| 2.6.6 目标片段PCR菌液检测与测序 | 第30页 |
| 2.7 二化螟中肠apn3、apn4基因的RNA干扰 | 第30-37页 |
| 2.7.1 大肠杆菌发酵生产dsRNA | 第30-33页 |
| 2.7.2 菌液喂食dsRNA | 第33-34页 |
| 2.7.3 Cry1Ac毒素对二化螟的毒力测定 | 第34页 |
| 2.7.4 实时荧光定量PCR反应 | 第34-37页 |
| 第三章 结果与分析 | 第37-45页 |
| 3.1 二化螟中肠BBMV中Cry1Ac毒素结合蛋白的分离和鉴定 | 第37-40页 |
| 3.1.1 二化螟中肠BBMV总蛋白的提取 | 第37页 |
| 3.1.2 Cry1Ac毒素的生物素标记 | 第37-38页 |
| 3.1.3 二化螟中肠Cry1Ac毒素结合蛋白的分离 | 第38-39页 |
| 3.1.4 二化螟中肠Cry1Ac毒素结合蛋白的鉴定 | 第39-40页 |
| 3.2 二化螟中肠Cry1Ac结合蛋白APN3、APN4受体功能验证 | 第40-45页 |
| 3.2.1 dsRNA表达载体构建及在大肠杆菌中的表达 | 第40-41页 |
| 3.2.2 PCR产物熔解曲线及荧光定量PCR扩增效率一致性分析 | 第41-43页 |
| 3.2.3 apn3、apn4基因沉默对Cry1Ac毒力的影响 | 第43-45页 |
| 第四章 讨论 | 第45-49页 |
| 4.1 二化螟中肠BBMV中Cry1Ac毒素结合蛋白的分离和鉴定 | 第45-47页 |
| 4.2 二化螟中肠Cry1Ac结合蛋白APN3、APN4受体功能研究 | 第47-49页 |
| 全文总结 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-61页 |
| 附录 | 第61-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
