| 摘要 | 第8-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 缩略词表 | 第15-17页 |
| 第一章 前言 | 第17-31页 |
| 1 课题的提出 | 第17-18页 |
| 2 柑橘果实有机酸代谢的研究进展 | 第18-28页 |
| 2.1 柑橘果实采后品质变化 | 第18-19页 |
| 2.2 柑橘果实中有机酸的种类和含量 | 第19-20页 |
| 2.3 柑橘果实中有机酸积累的分子机制 | 第20-26页 |
| 2.3.1 有机酸的合成 | 第20-22页 |
| 2.3.2 有机酸的转运及液泡贮藏 | 第22-24页 |
| 2.3.3 有机酸的分解 | 第24-26页 |
| 2.4 GABA支路参与调控柑橘果实有机酸代谢 | 第26-28页 |
| 2.4.1 GABA的功能 | 第26-27页 |
| 2.4.2 GABA支路对柑橘果实有机酸代谢的影响 | 第27-28页 |
| 3 影响柑橘果实有机酸代谢的因素 | 第28-30页 |
| 3.1 采前因素对柑橘果实有机酸代谢的影响 | 第28-29页 |
| 3.1.1 环境因素对柑橘果实有机酸代谢的影响 | 第28-29页 |
| 3.1.2 栽培技术对柑橘果实有机酸代谢的影响 | 第29页 |
| 3.2 采后处理对柑橘果实有机酸代谢的影响 | 第29-30页 |
| 4 研究目的和内容 | 第30-31页 |
| 第二章 外源GABA处理对柑橘果实采后柠檬酸代谢的影响 | 第31-46页 |
| 1 引言 | 第31-32页 |
| 2 材料与方法 | 第32-34页 |
| 2.1 实验材料及处理 | 第32页 |
| 2.2 实验方法 | 第32-34页 |
| 2.2.1 果肉汁胞中初生代谢物含量的测定 | 第32页 |
| 2.2.2 抗氧化酶酶活性的测定 | 第32-33页 |
| 2.2.3 ATP含量的测定 | 第33页 |
| 2.2.4 总RNA的提取和质检 | 第33页 |
| 2.2.5 实时定量PCR分析 | 第33-34页 |
| 2.2.6 果实色差测定 | 第34页 |
| 2.2.7 果实腐烂率测定 | 第34页 |
| 2.3 数据处理与统计分析 | 第34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-43页 |
| 3.1 外源GABA处理对果实柠檬酸含量的影响 | 第34-36页 |
| 3.2 外源GABA处理对果实氨基酸含量的影响 | 第36页 |
| 3.3 外源GABA处理果实相关基因的表达变化 | 第36-38页 |
| 3.4 外源GABA处理对果实色泽的影响 | 第38-40页 |
| 3.5 外源GABA处理对果实腐烂率的影响 | 第40-41页 |
| 3.6 外源GABA处理对抗氧化酶活性的影响 | 第41-42页 |
| 3.7 外源GABA处理对果实ATP含量的影响 | 第42-43页 |
| 4 讨论 | 第43-46页 |
| 4.1 外源GABA处理对柠檬酸代谢的影响 | 第43-44页 |
| 4.2 ATP含量的提高对果实抗性的影响 | 第44页 |
| 4.3 外源GABA处理对氨基酸代谢的影响 | 第44-46页 |
| 第三章 HB × Fairchild杂交群体采后果实有机酸代谢特征研究 | 第46-62页 |
| 1 引言 | 第46-47页 |
| 2 材料与方法 | 第47-49页 |
| 2.1 实验材料 | 第47页 |
| 2.2 实验方法 | 第47-48页 |
| 2.2.1 单果重及果形指数测定 | 第47页 |
| 2.2.2 果实色差测定 | 第47页 |
| 2.2.3 可溶性固形物含量测定 | 第47-48页 |
| 2.2.4 可滴定酸含量测定 | 第48页 |
| 2.2.5 高酸和低酸果实果肉汁胞初生代谢物含量测定 | 第48页 |
| 2.2.6 总RNA的提取和质检 | 第48页 |
| 2.2.7 实时定量PCR检测 | 第48页 |
| 2.2.8 呼吸速率测定 | 第48页 |
| 2.2.9 果实失重率测定 | 第48页 |
| 2.3 数据处理与统计分析 | 第48-49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-59页 |
| 3.1 杂交群体果实品质特征 | 第49-51页 |
| 3.2 高酸和低酸果实贮藏期TA和TSS含量变化 | 第51-52页 |
| 3.3 高酸和低酸果实贮藏期有机酸含量变化 | 第52-53页 |
| 3.4 高酸和低酸果实贮藏期糖和氨基酸含量变化 | 第53-55页 |
| 3.5 高酸和低酸果实贮藏期柠檬酸代谢相关基因的表达差异 | 第55-57页 |
| 3.6 高酸和低酸果实贮藏期呼吸速率和果实失重率变化 | 第57-59页 |
| 4 讨论 | 第59-62页 |
| 4.1 遗传背景对采后柑橘果实有机酸代谢的影响 | 第59页 |
| 4.2 影响采后柑橘果实柠檬酸水平的关键基因 | 第59-60页 |
| 4.3 有机酸含量与果实失水率的关系 | 第60-62页 |
| 第四章 CgGABP的功能分析及调控机制研究 | 第62-106页 |
| 1 引言 | 第62-63页 |
| 2 材料与方法 | 第63-77页 |
| 2.1 实验材料 | 第63页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第63页 |
| 2.1.2 菌株、质粒和载体 | 第63页 |
| 2.2 实验方法 | 第63-77页 |
| 2.2.1 HB柚和无酸柚果肉汁胞初生代谢物含量测定 | 第63-64页 |
| 2.2.2 总RNA的提取及质检 | 第64页 |
| 2.2.3 实时定量PCR分析 | 第64-66页 |
| 2.2.4 CgGABP基因生物信息学分析 | 第66-67页 |
| 2.2.5 CgGABP基因的克隆 | 第67-69页 |
| 2.2.6 CgGABP表达载体的构建 | 第69-71页 |
| 2.2.6.1 CgGABP亚细胞定位载体的构建 | 第69-70页 |
| 2.2.6.2 CgGABP超量表达载体的构建 | 第70-71页 |
| 2.2.7 CgGABP亚细胞定位分析 | 第71页 |
| 2.2.8 农杆菌介导CgGABP对番茄的遗传转化 | 第71-72页 |
| 2.2.9 转基因番茄阳性植株的检测、表达分析及拷贝数鉴定 | 第72-73页 |
| 2.2.10 转基因番茄果实初生代谢物检测 | 第73页 |
| 2.2.11 转基因番茄果实柠檬酸代谢相关基因的表达定量分析 | 第73页 |
| 2.2.12 CgGABP启动子酵母单杂交筛库及点对点分析 | 第73-74页 |
| 2.2.13 双荧光素酶检测 | 第74-76页 |
| 2.2.13.1 CgGABP启动子克隆及载体构建 | 第74-75页 |
| 2.2.13.2 互作转录因子的克隆及载体构建 | 第75-76页 |
| 2.2.13.3 烟草双荧光素酶瞬时表达分析 | 第76页 |
| 2.2.14 转录因子CgbHLH13和CgBBX32对柑橘愈伤组织的遗传转化 | 第76-77页 |
| 2.2.14.1 CgbHLH13和CgBBX32基因的克隆及载体构建 | 第76页 |
| 2.2.14.2 CgbHLH13和CgBBX32亚细胞定位分析 | 第76页 |
| 2.2.14.3 农杆菌介导CgbHLH13和CgBBX32转化柑橘愈伤组织 | 第76-77页 |
| 2.2.14.4 转基因愈伤组织分子检测及基因的表达分析 | 第77页 |
| 2.2.14.5 转基因愈伤组织的初生代谢物检测 | 第77页 |
| 2.3 数据处理与统计分析 | 第77页 |
| 3 结果与分析 | 第77-97页 |
| 3.1 HB柚和无酸柚果实中的有机酸代谢的差异 | 第77-79页 |
| 3.2 HB柚和无酸柚果实中柠檬酸代谢相关基因的表达分析 | 第79页 |
| 3.3 CgGABP的序列、聚类及蛋白结构分析 | 第79-83页 |
| 3.4 CgGABP亚细胞定位 | 第83-84页 |
| 3.5 CgGABP转化番茄功能分析 | 第84-90页 |
| 3.5.1 转CgGABP基因番茄植株的获得 | 第84-85页 |
| 3.5.2 转CgGABP基因番茄的分子鉴定 | 第85-87页 |
| 3.5.3 转CgGABP基因番茄果实初生代谢物含量分析 | 第87-90页 |
| 3.6 酵母单杂交筛选CgGABP启动子互作元件及点对点验证 | 第90页 |
| 3.7 双荧光素酶验证转录因子对CgGABP基因的调控 | 第90页 |
| 3.8 CgbHLH13和CgBBX32的序列克隆、结构分析及载体构建 | 第90-91页 |
| 3.9 转录因子CgbHLH13和CgBBX32的亚细胞定位分析 | 第91-92页 |
| 3.10 转录因子CgbHLH13和CgBBX32转化柑橘愈伤功能分析 | 第92-97页 |
| 3.10.1 转CgbHLH13和CgBBX32基因愈伤组织的获得及分子鉴定 | 第92-93页 |
| 3.10.2 转CgbHLH13和CgBBX32基因愈伤组织初生代谢物含量分析 | 第93-97页 |
| 4 讨论 | 第97-104页 |
| 4.1 HB柚和无酸柚柠檬酸代谢特征差异 | 第97-98页 |
| 4.2 CgGABP基因通过抑制番茄SlAco基因的表达调控柠檬酸积累 | 第98-100页 |
| 4.3 转录因子CgbHLH13和CgBBX32参与调控柠檬酸代谢 | 第100-101页 |
| 4.4 谷氨酸代谢参与CgGABP调控的柠檬酸积累过程 | 第101-104页 |
| 第五章 总结与展望 | 第104-106页 |
| 参考文献 | 第106-120页 |
| 附录Ⅰ 附表及附图 | 第120-123页 |
| 附录Ⅱ 部分实验操作步骤 | 第123-129页 |
| 附录Ⅲ 博士期间发表论文和专利 | 第129-130页 |
| 致谢 | 第130-132页 |
