| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-19页 |
| ·病原特征 | 第13-14页 |
| ·犬瘟热病毒分离技术研究进展 | 第14-17页 |
| ·原代细胞 | 第15页 |
| ·传代细胞 | 第15页 |
| ·稳定表达SLAM的细胞系 | 第15-17页 |
| ·本课题研究的目的及内容 | 第17-19页 |
| 第2章 表达不同动物犬瘟热病毒受体SLAM的Vero细胞系的建立 | 第19-33页 |
| ·材料与方法 | 第19-26页 |
| ·质粒、菌株与细胞 | 第19页 |
| ·主要的试剂和仪器 | 第19-20页 |
| ·常用溶液和培养基的配置 | 第20-21页 |
| ·PCR 扩增与基因克隆 | 第21页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第21-23页 |
| ·G418最适浓度的确定 | 第23页 |
| ·转染用高纯度质粒的制备 | 第23-24页 |
| ·细胞转染 | 第24页 |
| ·瞬时转染后分离病毒验证 | 第24-25页 |
| ·稳定转染细胞的克隆筛选 | 第25页 |
| ·稳定转染细胞系蛋白表达的验证 | 第25页 |
| ·绘制细胞生长曲线 | 第25-26页 |
| ·结果 | 第26-31页 |
| ·目的条带的获得 | 第26页 |
| ·真核表达载体获得及酶切鉴定 | 第26-27页 |
| ·G418加压筛选浓度的确定 | 第27页 |
| ·Vero细胞瞬时转染及转染后对细胞敏感性的影响 | 第27-28页 |
| ·稳定转染的Vero细胞系的建立 | 第28-29页 |
| ·细胞免疫组化检测目的蛋白的表达 | 第29-30页 |
| ·细胞生长曲线 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-33页 |
| 第3章 建立的表达貉SLAM受体的Vero细胞系的评价 | 第33-41页 |
| ·材料与方法 | 第33-35页 |
| ·细胞、实验动物及病毒 | 第33页 |
| ·主要的试剂和仪器设备 | 第33页 |
| ·细胞对CDV 的敏感性 | 第33-34页 |
| ·分离到病毒的RT-PCR 验证及Ｈ基因扩增 | 第34页 |
| ·病毒滴定 | 第34-35页 |
| ·用V-p-rSLAMh细胞分离到的LN(10)f1株细胞毒攻毒实验 | 第35页 |
| ·结果 | 第35-39页 |
| ·三株野毒株在两种细胞的培养情况 | 第35-36页 |
| ·分离病毒的PCR 验证 | 第36页 |
| ·LN(10)f1株CDVＨ基因序列比对及进化树构建 | 第36-37页 |
| ·动物攻毒实验 | 第37-39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-47页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学位论文 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48页 |
