| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 第1章 引言 | 第14-44页 |
| 1.1 转基因生物安全与分子鉴定技术研究综述 | 第14-33页 |
| 1.1.1 转基因作物产业化与生物安全 | 第14-16页 |
| 1.1.2 转基因作物分子特征及鉴定技术 | 第16-17页 |
| 1.1.3 转基因作物核酸检测技术 | 第17-33页 |
| 1.2 大豆耐盐基因工程研究综述 | 第33-42页 |
| 1.2.1 盐胁迫对农作物生长发育的影响 | 第33-34页 |
| 1.2.2 植物耐盐的生理生化和分子机理 | 第34-38页 |
| 1.2.3 植物耐盐基因资源挖掘 | 第38-39页 |
| 1.2.4 耐盐转基因大豆研究进展 | 第39-42页 |
| 1.3 本研究的目的及意义 | 第42-44页 |
| 第2章 转基因作物中常见外源抗虫基因的检测方法研究 | 第44-67页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第44-46页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第44-45页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第45-46页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第46页 |
| 2.2 试验方法 | 第46-51页 |
| 2.2.1 DNA提取与纯化 | 第46-47页 |
| 2.2.2 Bt基因序列分析与引物设计 | 第47页 |
| 2.2.3 普通PCR扩增 | 第47-48页 |
| 2.2.4 三重PCR扩增 | 第48-49页 |
| 2.2.5 PCR产物琼脂糖凝胶电泳 | 第49页 |
| 2.2.6 LAMP扩增 | 第49-51页 |
| 2.2.7 LAMP扩增产物检测 | 第51页 |
| 2.3 结果与分析 | 第51-64页 |
| 2.3.1 Bt基因核苷酸序列分析与PCR检测引物设计 | 第51-54页 |
| 2.3.2 三类Bt基因普通PCR检测方法的建立 | 第54-56页 |
| 2.3.3 三类Bt基因多重PCR检测体系的评价 | 第56-58页 |
| 2.3.4 Cry2Ab和cry3A基因LAMP检测方法的建立 | 第58-64页 |
| 2.4 讨论 | 第64-67页 |
| 第3章 转基因玉米实时荧光定量PCR检测方法研究 | 第67-100页 |
| 3.1 材料与试剂 | 第67-69页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第67-68页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第68页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第68-69页 |
| 3.2 试验方法 | 第69-72页 |
| 3.2.1 DNA提取与纯化 | 第69页 |
| 3.2.2 引物和荧光探针设计 | 第69-70页 |
| 3.2.3 定性PCR扩增 | 第70页 |
| 3.2.4 PCR产物琼脂糖凝胶电泳 | 第70页 |
| 3.2.5 实时荧光定量PCR扩增 | 第70-72页 |
| 3.2.6 DNA质量评价 | 第72页 |
| 3.3 结果与分析 | 第72-98页 |
| 3.3.1 转化体特异性引物设计与筛选 | 第72-73页 |
| 3.3.2 转基因玉米IE034定性PCR检测方法的建立 | 第73-76页 |
| 3.3.3 转基因玉米IE034定量PCR检测方法的建立 | 第76-87页 |
| 3.3.4 转基因玉米Bt506定性PCR检测方法的建立 | 第87-90页 |
| 3.3.5 转基因玉米Bt506定量PCR检测方法的建立 | 第90-98页 |
| 3.4 讨论 | 第98-100页 |
| 第4章 转基因玉米数字PCR检测方法研究 | 第100-114页 |
| 4.1 材料与试剂 | 第100-101页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第100页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第100-101页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第101页 |
| 4.2 试验方法 | 第101-104页 |
| 4.2.1 DNA提取与纯化 | 第101页 |
| 4.2.2 引物和荧光探针设计 | 第101页 |
| 4.2.3 实时荧光定量PCR扩增 | 第101-103页 |
| 4.2.4 微滴式数字PCR扩增 | 第103-104页 |
| 4.2.5 DNA质量评价 | 第104页 |
| 4.3 结果与分析 | 第104-112页 |
| 4.3.1 转化体特异性引物设计与筛选 | 第104-105页 |
| 4.3.2 Bt38玉米荧光定量PCR方法的建立 | 第105-110页 |
| 4.3.3 Bt38玉米数字PCR方法的建立 | 第110-112页 |
| 4.4 讨论 | 第112-114页 |
| 第5章 转AgGlpF基因耐盐大豆材料创制与鉴定 | 第114-144页 |
| 5.1 材料与试剂 | 第114-119页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第114页 |
| 5.1.2 目的基因 | 第114页 |
| 5.1.3 菌株及载体 | 第114页 |
| 5.1.4 主要试剂和耗材 | 第114-117页 |
| 5.1.5 主要培养基 | 第117页 |
| 5.1.6 引物信息 | 第117-118页 |
| 5.1.7 主要仪器设备 | 第118-119页 |
| 5.2 试验方法 | 第119-132页 |
| 5.2.1 AgGlpF基因序列验证 | 第119-121页 |
| 5.2.2 重组表达载体pYL-AgGlpF构建 | 第121-123页 |
| 5.2.3 EHA101工程菌的制备 | 第123-124页 |
| 5.2.4 农杆菌介导的大豆子叶节遗传转化 | 第124-125页 |
| 5.2.5 转基因大豆植株的PCR鉴定 | 第125-127页 |
| 5.2.6 转基因大豆中AgGlpF基因的Southern blot鉴定 | 第127-130页 |
| 5.2.7 转基因大豆中AgGlpF基因的反转录PCR鉴定 | 第130-131页 |
| 5.2.8 转基因大豆植株的耐盐性鉴定 | 第131-132页 |
| 5.3 结果与分析 | 第132-142页 |
| 5.3.1 表达载体pYL-AgGlpF的构建与鉴定 | 第132-133页 |
| 5.3.2 T0代转基因大豆的获得与鉴定 | 第133-135页 |
| 5.3.3 AgGlpF基因实时荧光PCR方法建立及T1代材料鉴定 | 第135-138页 |
| 5.3.4 T1代转基因大豆中AgGlpF基因拷贝数分析 | 第138-139页 |
| 5.3.5 T1代转基因大豆中AgGlpF基因的转录情况 | 第139-141页 |
| 5.3.6 T2代转基因大豆的耐盐性 | 第141-142页 |
| 5.4 讨论 | 第142-144页 |
| 第6章 全文研究结论 | 第144-146页 |
| 参考文献 | 第146-171页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第171-172页 |
| 致谢 | 第172-173页 |
