摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
英文缩略词 | 第7-10页 |
1 文献综述 | 第10-16页 |
1.1 无乳链球菌的研究进展 | 第10-11页 |
1.1.1 无乳链球菌的概述 | 第10页 |
1.1.2 无乳链球菌的流行性 | 第10-11页 |
1.1.3 无乳链球菌的致病性 | 第11页 |
1.1.4 无乳链球菌的感染症状 | 第11页 |
1.2 无乳链球菌相关毒力因子 | 第11-13页 |
1.2.1 荚膜多糖 | 第11-12页 |
1.2.2 分选酶 | 第12页 |
1.2.3 ScpB蛋白 | 第12-13页 |
1.2.4 Sip蛋白 | 第13页 |
1.2.5 FbsA蛋白 | 第13页 |
1.2.6 SodA蛋白 | 第13页 |
1.3 调节因子 | 第13-15页 |
1.3.1 Rgg家族调节因子 | 第13-14页 |
1.3.2 CodY全局转录调节因子 | 第14页 |
1.3.3 CcpA全局调节因子 | 第14页 |
1.3.4 LuxS调节因子 | 第14-15页 |
1.4 本研究的目的意义 | 第15-16页 |
2 转录调节因子RovS基因缺失株的构建 | 第16-35页 |
2.1 实验材料 | 第16-20页 |
2.1.1 菌株 | 第16页 |
2.1.2 质粒 | 第16页 |
2.1.3 主要实验试剂 | 第16页 |
2.1.4 培养基和相关溶液的配制 | 第16-17页 |
2.1.5 缓冲液的配制 | 第17页 |
2.1.6 制备大肠杆菌感受态所用溶液的配置 | 第17页 |
2.1.7 制备无乳链球菌感受态所用溶液的配置 | 第17-19页 |
2.1.8 该实验所用引物 | 第19页 |
2.1.9 实验仪器 | 第19-20页 |
2.2 实验方法 | 第20-29页 |
2.2.1 rovS基因上、下游片段与Erm基因的扩增 | 第20-25页 |
2.2.2 rovS基因上、下游片段与Erm基因的融合 | 第25-27页 |
2.2.3 重组质粒pSET4s-rF-Erm-rR的构建和鉴定 | 第27-28页 |
2.2.4 rovS基因缺失株突变株的构建 | 第28-29页 |
2.3 实验结果 | 第29-33页 |
2.3.1 rovS基因上、下游片段的扩增 | 第29-30页 |
2.3.2 红霉素抗性基因的扩增 | 第30-31页 |
2.3.3 rovS基因上、下游片段与Erm基因的融合 | 第31-32页 |
2.3.4 重组质粒pSET4s-rF-Erm-rR的鉴定 | 第32-33页 |
2.3.5 无乳链球菌rovS基因缺失株的筛选 | 第33页 |
2.4 讨论 | 第33-35页 |
3 转录调节因子RovS的功能分析 | 第35-46页 |
3.1 实验材料 | 第35页 |
3.1.1 实验菌株 | 第35页 |
3.1.2 实验动物 | 第35页 |
3.1.3 实验仪器 | 第35页 |
3.1.4 实验试剂 | 第35页 |
3.1.5 革兰氏染色液的配置 | 第35页 |
3.2 实验方法 | 第35-40页 |
3.2.1 突变株的遗传稳定性分析 | 第35-36页 |
3.2.2 生长曲线的绘制 | 第36页 |
3.2.3 野生株S.agalactiae ZQ0910和突变株ΔrovS革兰氏染色的比较 | 第36页 |
3.2.4 血琼脂平板上观察细菌形态 | 第36-37页 |
3.2.5 半数致死量(LD50)的测定 | 第37页 |
3.2.6 实时荧光定量PCR | 第37-40页 |
3.3 实验结果 | 第40-44页 |
3.3.1 突变株遗传稳定性分析 | 第40-41页 |
3.3.2 生长曲线的比较 | 第41页 |
3.3.3 革兰氏染色的比较 | 第41-42页 |
3.3.4 血琼脂平板上生物学性状的比较 | 第42-43页 |
3.3.5 半数致死量(LD50)的测定 | 第43页 |
3.3.6 mRNA的表达差异 | 第43-44页 |
3.4 讨论 | 第44-46页 |
4 结论 | 第46-47页 |
4.1 罗非鱼源无乳链球菌转录调节子RovS缺失株的构建 | 第46页 |
4.2 缺失突变株 ΔrovS功能分析 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-53页 |
致谢 | 第53-55页 |
作者简介 | 第55-56页 |
导师简介 | 第56页 |