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罗非鱼源无乳链球菌RovS转录调节因子缺失突变株的构建及其功能分析

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
英文缩略词第7-10页
1 文献综述第10-16页
    1.1 无乳链球菌的研究进展第10-11页
        1.1.1 无乳链球菌的概述第10页
        1.1.2 无乳链球菌的流行性第10-11页
        1.1.3 无乳链球菌的致病性第11页
        1.1.4 无乳链球菌的感染症状第11页
    1.2 无乳链球菌相关毒力因子第11-13页
        1.2.1 荚膜多糖第11-12页
        1.2.2 分选酶第12页
        1.2.3 ScpB蛋白第12-13页
        1.2.4 Sip蛋白第13页
        1.2.5 FbsA蛋白第13页
        1.2.6 SodA蛋白第13页
    1.3 调节因子第13-15页
        1.3.1 Rgg家族调节因子第13-14页
        1.3.2 CodY全局转录调节因子第14页
        1.3.3 CcpA全局调节因子第14页
        1.3.4 LuxS调节因子第14-15页
    1.4 本研究的目的意义第15-16页
2 转录调节因子RovS基因缺失株的构建第16-35页
    2.1 实验材料第16-20页
        2.1.1 菌株第16页
        2.1.2 质粒第16页
        2.1.3 主要实验试剂第16页
        2.1.4 培养基和相关溶液的配制第16-17页
        2.1.5 缓冲液的配制第17页
        2.1.6 制备大肠杆菌感受态所用溶液的配置第17页
        2.1.7 制备无乳链球菌感受态所用溶液的配置第17-19页
        2.1.8 该实验所用引物第19页
        2.1.9 实验仪器第19-20页
    2.2 实验方法第20-29页
        2.2.1 rovS基因上、下游片段与Erm基因的扩增第20-25页
        2.2.2 rovS基因上、下游片段与Erm基因的融合第25-27页
        2.2.3 重组质粒pSET4s-rF-Erm-rR的构建和鉴定第27-28页
        2.2.4 rovS基因缺失株突变株的构建第28-29页
    2.3 实验结果第29-33页
        2.3.1 rovS基因上、下游片段的扩增第29-30页
        2.3.2 红霉素抗性基因的扩增第30-31页
        2.3.3 rovS基因上、下游片段与Erm基因的融合第31-32页
        2.3.4 重组质粒pSET4s-rF-Erm-rR的鉴定第32-33页
        2.3.5 无乳链球菌rovS基因缺失株的筛选第33页
    2.4 讨论第33-35页
3 转录调节因子RovS的功能分析第35-46页
    3.1 实验材料第35页
        3.1.1 实验菌株第35页
        3.1.2 实验动物第35页
        3.1.3 实验仪器第35页
        3.1.4 实验试剂第35页
        3.1.5 革兰氏染色液的配置第35页
    3.2 实验方法第35-40页
        3.2.1 突变株的遗传稳定性分析第35-36页
        3.2.2 生长曲线的绘制第36页
        3.2.3 野生株S.agalactiae ZQ0910和突变株ΔrovS革兰氏染色的比较第36页
        3.2.4 血琼脂平板上观察细菌形态第36-37页
        3.2.5 半数致死量(LD50)的测定第37页
        3.2.6 实时荧光定量PCR第37-40页
    3.3 实验结果第40-44页
        3.3.1 突变株遗传稳定性分析第40-41页
        3.3.2 生长曲线的比较第41页
        3.3.3 革兰氏染色的比较第41-42页
        3.3.4 血琼脂平板上生物学性状的比较第42-43页
        3.3.5 半数致死量(LD50)的测定第43页
        3.3.6 mRNA的表达差异第43-44页
    3.4 讨论第44-46页
4 结论第46-47页
    4.1 罗非鱼源无乳链球菌转录调节子RovS缺失株的构建第46页
    4.2 缺失突变株 ΔrovS功能分析第46-47页
参考文献第47-53页
致谢第53-55页
作者简介第55-56页
导师简介第56页

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