| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 英文缩写词表 | 第15-17页 |
| 第1章 绪论 | 第17-35页 |
| 1.1 人兽共患病概述 | 第17页 |
| 1.2 人兽共患病发生与流行的原因 | 第17-19页 |
| 1.3 人兽共患病发生和流行的新特点 | 第19-20页 |
| 1.3.1 新病不断涌现, 老病死灰复燃 | 第19页 |
| 1.3.2 感染谱增宽，多种病原混合感染 | 第19-20页 |
| 1.3.3 新人兽共患病以病毒病为主 | 第20页 |
| 1.4 新发主要人兽共患病 | 第20-24页 |
| 1.4.1 埃博拉出血热 | 第20-21页 |
| 1.4.2 尼帕病毒病 | 第21-22页 |
| 1.4.3 禽流感 | 第22页 |
| 1.4.4 严重急性呼吸综合征 | 第22-23页 |
| 1.4.5 猪链球菌2型 | 第23-24页 |
| 1.5 人兽共患病的综合防控措施 | 第24-25页 |
| 1.5.1 提高全民对人兽共患病的认识 | 第24页 |
| 1.5.2 加大对科研的投入和预防体系建设 | 第24-25页 |
| 1.5.3 建立健全公共卫生体系 | 第25页 |
| 1.5.4 加强国际协作 | 第25页 |
| 1.6 猪圆环病毒概述 | 第25-29页 |
| 1.6.1 PCV分型 | 第26-27页 |
| 1.6.2 PCV2的主要开放阅读框架及主要蛋白 | 第27-29页 |
| 1.7 PCV2疫苗研究进展 | 第29-32页 |
| 1.7.1 已有的商品化PCV2疫苗 | 第29-30页 |
| 1.7.2 实验性PCV2疫苗 | 第30-32页 |
| 1.8 VLP疫苗研究进展 | 第32-33页 |
| 1.9 本研究的目的与意义 | 第33-35页 |
| 第2章 人血清圆环病毒抗体检测及感染因素分析 | 第35-49页 |
| 2.1 研究对象及资料来源 | 第35-36页 |
| 2.2 血清来源 | 第36页 |
| 2.3 主要仪器 | 第36页 |
| 2.4 主要试剂及耗材 | 第36-37页 |
| 2.4.1 试剂配制 | 第37页 |
| 2.5 实验方法 | 第37-39页 |
| 2.5.1 棋盘法确定最佳抗原包被浓度及血清稀释度 | 第37-38页 |
| 2.5.2 灭活PCV2为包被抗原检测人血清中PCV特异性抗体 | 第38-39页 |
| 2.5.3 血清PCV IgG抗体阳性的判定 | 第39页 |
| 2.6 数据整理及统计分析 | 第39页 |
| 2.7 结果 | 第39-45页 |
| 2.7.1 调查对象的一般情况 | 第39-41页 |
| 2.7.2 人血清PCV IgG抗体阳性率及人群分布特征 | 第41-43页 |
| 2.7.3 人血清PCV IgG抗体阳性率与各因素的关联性分析 | 第43-44页 |
| 2.7.4 人感染圆环病毒的多因素logistic回归分析 | 第44-45页 |
| 2.8 讨论 | 第45-49页 |
| 第3章 去掉诱饵表位PCV2b重组衣壳蛋白的设计、构建、表达及纯化 | 第49-77页 |
| 3.1 实验材料 | 第49-51页 |
| 3.1.1 主要仪器 | 第49-50页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第50-51页 |
| 3.1.3 试剂配制 | 第51页 |
| 3.2 实验方法 | 第51-62页 |
| 3.2.1 替换掉诱饵表位的PCV2b衣壳蛋白 3D结构的预测 | 第51-52页 |
| 3.2.2 PCV2b衣壳蛋白编码基因的获取 | 第52页 |
| 3.2.3 替换掉诱饵表位的PCV2b衣壳蛋白编码基因的获取 | 第52-54页 |
| 3.2.4 PCV2b-ΔCP基因A、B片段的T-A克隆 | 第54-56页 |
| 3.2.5 原核表达载体p ET28a-PCV2b-ΔCP的构建与鉴定 | 第56-59页 |
| 3.2.6 重组质粒的转化及鉴定 | 第59页 |
| 3.2.7 pET28a-ΔCP重组质粒在大肠杆菌BL21中的表达及检测 | 第59-60页 |
| 3.2.8 重组蛋白的纯化条件探索 | 第60-62页 |
| 3.2.9 透析法组装成VLPs | 第62页 |
| 3.2.10 目的蛋白的鉴定 | 第62页 |
| 3.2.11 Bradford法测定蛋白质浓度 | 第62页 |
| 3.3 实验结果 | 第62-74页 |
| 3.3.1 灭活病毒疫苗中诱饵表位的检测 | 第63页 |
| 3.3.2 重组亚单位疫苗中诱饵表位的检测 | 第63-64页 |
| 3.3.3 PCV2b感染的猪血清中诱饵表位的检测 | 第64-65页 |
| 3.3.4 替换掉诱饵表位的重组PCV2b衣壳蛋白疫苗的设计及其 3D结构的预测 | 第65-67页 |
| 3.3.5 重组PCV2b ΔCP的构建，表达及鉴定 | 第67-69页 |
| 3.3.6 重组PCV2b ΔCP的纯化 | 第69-73页 |
| 3.3.7 重组PCV2b ΔCP VLPs的组装及电镜观察 | 第73页 |
| 3.3.8 Western blot鉴定纯化后 ΔCP | 第73-74页 |
| 3.4 讨论 | 第74-77页 |
| 第4章 PCV2b重组亚单位疫苗的制备、质检及免疫效力研究 | 第77-101页 |
| 4.1 实验材料 | 第77-78页 |
| 4.1.1 主要器材和设备 | 第77页 |
| 4.1.2 主要试剂与耗材 | 第77-78页 |
| 4.1.3 实验动物 | 第78页 |
| 4.2 实验方法 | 第78-85页 |
| 4.2.1 疫苗佐剂的选择 | 第78页 |
| 4.2.2 蛋白抗原的乳化 | 第78-79页 |
| 4.2.3 疫苗的检测（不含效力试验） | 第79-80页 |
| 4.2.4 小鼠抗体测定法评价疫苗的免疫效力 | 第80-81页 |
| 4.2.5 仔猪抗体测定法评价疫苗的免疫效力 | 第81-83页 |
| 4.2.6 仔猪免疫攻毒法评价疫苗免疫效力 | 第83-85页 |
| 4.2.7 数据处理与统计分析 | 第85页 |
| 4.3 实验结果 | 第85-97页 |
| 4.3.1 疫苗的质量检测 | 第85-86页 |
| 4.3.2 抗原性检验 | 第86-88页 |
| 4.3.3 小鼠血清抗体测定法评价 ΔCP-VLPs疫苗的免疫效力 | 第88-93页 |
| 4.3.4 仔猪血清抗体测定法评价ΔCP-VLPs疫苗的免疫效力 | 第93-95页 |
| 4.3.5 仔猪攻毒法评价 ΔCP-VLPs疫苗的免疫效力 | 第95-97页 |
| 4.4 讨论 | 第97-99页 |
| 4.5 小结 | 第99-101页 |
| 第5章 结论 | 第101-103页 |
| 本研究的创新之处 | 第103-105页 |
| 参考文献 | 第105-113页 |
| 作者简介及攻读学位期间的科研成果 | 第113-115页 |
| 致谢 | 第115页 |
