| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略语表 (Abbreviation) | 第10-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 PRRSV简介 | 第12-13页 |
| 1.2 PRRSV N蛋白简介 | 第13-14页 |
| 1.3 干扰素介导的天然免疫 | 第14-18页 |
| 1.3.1 干扰素 | 第14-15页 |
| 1.3.2 干扰素介导的天然免疫 | 第15-18页 |
| 1.4 PRRSV与干扰素 | 第18-22页 |
| 1.4.1 PRRSV抑制猪体内和培养细胞中干扰素的产生 | 第18页 |
| 1.4.2 PRRSV蛋白参与抑制干扰素的诱导表达 | 第18-20页 |
| 1.4.3 PRRSV干扰IFN激活的JAK/STAT信号通路 | 第20页 |
| 1.4.4 PRRSV复制干扰JAK/STAT信号通路 | 第20页 |
| 1.4.5 PRRSV蛋白参与干扰JAK/STAT信号通路 | 第20-22页 |
| 第2章 研究目的与意义 | 第22-23页 |
| 第3章 材料与方法 | 第23-34页 |
| 3.1 试验材料 | 第23-26页 |
| 3.1.1 菌株、毒株与细胞 | 第23页 |
| 3.1.2 质粒与载体 | 第23-24页 |
| 3.1.3 工具酶及主要试剂 | 第24页 |
| 3.1.4 培养基和抗生素的其配制 | 第24-25页 |
| 3.1.5 主要缓冲液和试剂及其配制 | 第25-26页 |
| 3.1.6 主要实验仪器及设备 | 第26页 |
| 3.1.7 分子生物学分析软件 | 第26页 |
| 3.2 实验方法 | 第26-34页 |
| 3.2.1 细胞、病毒样品的总RNA的提取和cDNA的合成 | 第26-27页 |
| 3.2.2 目的基因的PCR扩增 | 第27-28页 |
| 3.2.3 PCR产物或酶切产物回收与纯化 | 第28页 |
| 3.2.4 PCR产物和质粒载体的酶切 | 第28-29页 |
| 3.2.5 外源片段与质粒载体的连接 | 第29页 |
| 3.2.6 大肠杆菌感受态细胞的制备（氯化钙法） | 第29-30页 |
| 3.2.7 连接产物的转化 | 第30页 |
| 3.2.8 重组质粒的制备与鉴定 | 第30-31页 |
| 3.2.9 质粒转染（脂质体介导转染法） | 第31页 |
| 3.2.10 双荧光素酶检测实验 | 第31-32页 |
| 3.2.11 Western Blot检测目的基因在真核细胞中的表达 | 第32-33页 |
| 3.2.12 间接免疫荧光检测蛋白质的亚细胞定位 | 第33-34页 |
| 第4章 结果与分析 | 第34-40页 |
| 4.1 PRRSV N蛋白抑制SeV诱导的IFN-β 产生和IRF3 激活 | 第34-35页 |
| 4.2 PRRSV N蛋白作用RIG-I/MDA5 通路的靶点在IRF3 或IRF3 下游 | 第35-36页 |
| 4.3 PRRSV N蛋白的亚细胞定位 | 第36-37页 |
| 4.4 PRRSV N蛋白抑制SeV诱导的IRF3 核转运 | 第37-38页 |
| 4.5 PRRSV N蛋白抑制IFN-β 产生的关键功能域分析 | 第38-40页 |
| 第5章 讨论与结论 | 第40-42页 |
| 5.1 讨论 | 第40-41页 |
| 5.1.1 PRRSV N蛋白在HEK293T细胞中抑制IFN-β 表达能力的研究 | 第40页 |
| 5.1.2 PRRSV N蛋白作用于RIG-I/MDA5 通路位点的研究 | 第40-41页 |
| 5.1.3 PRRSV N蛋白抑制IFN-β 激活关键结构域的研究 | 第41页 |
| 5.2 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-53页 |
| 致谢 | 第53页 |
