| 摘要 | 第6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 二、 前言 | 第7-11页 |
| 三、 材料与方法 | 第11-33页 |
| 仪器设备 | 第11-12页 |
| 实验试剂 | 第12-13页 |
| NSCLC组织标本收集 | 第13页 |
| 细胞系和培养条件 | 第13-14页 |
| RNA提取、浓度及完整性测定 | 第14-15页 |
| 实时定量PCR | 第15-16页 |
| 质粒的构建 | 第16-17页 |
| 细胞转染 | 第17页 |
| MTT法检测细胞增殖活力 | 第17-18页 |
| 细胞平板克隆形成试验 | 第18页 |
| 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第18页 |
| 流式细胞仪检测细胞周期 | 第18-19页 |
| TUNEL法检测细胞凋亡 | 第19-20页 |
| G418 筛选稳定转染细胞 | 第20页 |
| 免疫缺陷小鼠皮下成瘤实验 | 第20页 |
| 核质分离实验确定ANRIL的细胞定位 | 第20-21页 |
| RNA免疫共沉淀(RIP) | 第21-24页 |
| 染色质免疫共沉淀(Ch IP) | 第24-27页 |
| 蛋白质的提取与浓度测定 | 第27-28页 |
| 免疫印迹(Western blot) | 第28-30页 |
| 免疫组化 | 第30-32页 |
| 数据处理 | 第32-33页 |
| 四、 实验结果 | 第33-45页 |
| ANRIL表达上调与非小细胞肺癌病人预后差有关 | 第33-35页 |
| ANRIL表达水平与生存率之间的关系 | 第35-38页 |
| NSCLC细胞中ANRIL表达水平的改变 | 第38页 |
| 干扰ANRIL表达可抑制NSCLC细胞增殖,诱导其凋亡 | 第38-39页 |
| 干扰ANRIL表达诱导NSCLC细胞周期阻滞和细胞凋亡 | 第39-40页 |
| 干扰ANRIL表达可抑制NSCLC细胞体内肿瘤形成 | 第40-41页 |
| KLF2 和P21 是ANRIL新的靶基因 | 第41-42页 |
| ANRIL绑定PRC2 调控KLF2 和P21 的表达 | 第42-43页 |
| KLF2 表达下调可能与ANRIL的致癌作用有关 | 第43-45页 |
| 五、 讨论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 附录(一) 综述 lnc RNA与肿瘤发展现状 | 第51-68页 |
| 前言 | 第51页 |
| lnc RNA的表达与肿瘤 | 第51-53页 |
| 突变和RNA变构 | 第53-54页 |
| 肿瘤相关的小nc RNA | 第54-56页 |
| lnc RNA可能成为新的肿瘤治疗方法 | 第56-58页 |
| 结论 | 第58页 |
| 参考文献 | 第58-66页 |
| 小结 | 第66-68页 |
| 附录(二) 缩略词 | 第68-69页 |
| 在读期间发表的论文 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
