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甘蓝夜蛾细胞色素P450基因的克隆及功能分析

摘要第8-9页
英文摘要第9-10页
1 前言第11-16页
    1.1 甘蓝夜蛾概述第11页
    1.2 细胞色素P450概况第11-12页
        1.2.1 细胞色素P450命名及结构特征第11-12页
        1.2.2 昆虫细胞色素P450的多样性第12页
        1.2.3 昆虫细胞色素P450基因的功能第12页
    1.3 细胞色素P450基因在昆虫代谢抗性中的研究第12-14页
        1.3.1 CYP4、CYP6和CYP9家族与昆虫抗药性第12-13页
        1.3.2 细胞色素P450介导的昆虫抗药性机制第13-14页
    1.4 RNA干扰在昆虫中的作用机理及应用进展第14-15页
        1.4.1 RNA干扰技术作用原理及作用方式第14页
        1.4.2 RNA干扰技术在昆虫中的应用第14-15页
        1.4.3 RNA干扰对昆虫细胞色素P450基因的沉默研究第15页
    1.5 本文研究的目的及意义第15-16页
2 材料与方法第16-26页
    2.1 供试昆虫第16页
    2.2 主要试剂与仪器第16页
    2.3 甘蓝夜蛾CYP9A90基因全长克隆第16-20页
        2.3.1 总RNA的提取及第一链c DNA的合成第16-17页
        2.3.2 甘蓝夜蛾CYP9A90基因片段的克隆第17-19页
        2.3.3 RACE方法获得CYP9A90基因的全长序列第19-20页
        2.3.4 序列分析第20页
    2.4 甘蓝夜蛾三个细胞色素P450基因的m RNA表达模式第20-22页
        2.4.1 甘蓝夜蛾三个细胞色素P450基因Real-time PCR引物设计第20-21页
        2.4.2 甘蓝夜蛾三个细胞色素P450基因在不同组织部位的表达第21-22页
        2.4.3 甘蓝夜蛾三个细胞色素P450基因在不同龄期的表达第22页
    2.5 溴氰菊酯作用甘蓝夜蛾对细胞色素P450基因表达的影响第22-23页
        2.5.1 甘蓝夜蛾在溴氰菊酯处理下的生物测定第22页
        2.5.2 溴氰菊酯对飞蝗细胞色素P450基因的诱导表达第22-23页
    2.6 甘蓝夜蛾三个细胞色素P450基因的生物学功能分析第23-26页
        2.6.1 ds RNA的体外合成第23-25页
        2.6.2 甘蓝夜蛾三个细胞色素P450基因ds RNA的注射第25-26页
3 结果与分析第26-37页
    3.1 CYP9A90基因的克隆及序列分析第26-29页
        3.1.1 获得甘蓝夜蛾P450基因的c DNA全长第26页
        3.1.2 CYP9A90基因的序列分析第26-28页
        3.1.3 CYP9A90基因的同源性分析第28-29页
    3.2 甘蓝夜蛾三个细胞色素P450基因的m RNA表达分析第29-31页
        3.2.1 甘蓝夜蛾不同组织器官三个细胞色素P450基因的分布第29-30页
        3.2.2 甘蓝夜蛾不同发育龄期三个细胞色素P450基因的表达第30-31页
    3.3 溴氰菊酯对三个细胞色素P450基因的诱导表达分析第31-35页
        3.3.1 生测结果第31-32页
        3.3.2 不同浓度溴氰菊酯对甘蓝夜蛾三个细胞色素P450基因表达量的影响第32-33页
        3.3.3 溴氰菊酯作用甘蓝夜蛾不同时间后细胞色素P450基因表达量的变化第33-34页
        3.3.4 不同龄期的甘蓝夜蛾在单位体重药量一定下的表达水平分析第34-35页
    3.4 甘蓝夜蛾三个细胞色素P450基因的功能分析第35-37页
        3.4.1 甘蓝夜蛾三个细胞色素P450基因沉默效率分析第35页
        3.4.2 三个细胞色素P450基因沉默后甘蓝夜蛾对溴氰菊酯的抗药性分析第35-37页
4 讨论第37-39页
5 结论第39-40页
致谢第40-41页
参考文献第41-47页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第47页

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