摘要 | 第8-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
1 前言 | 第11-16页 |
1.1 甘蓝夜蛾概述 | 第11页 |
1.2 细胞色素P450概况 | 第11-12页 |
1.2.1 细胞色素P450命名及结构特征 | 第11-12页 |
1.2.2 昆虫细胞色素P450的多样性 | 第12页 |
1.2.3 昆虫细胞色素P450基因的功能 | 第12页 |
1.3 细胞色素P450基因在昆虫代谢抗性中的研究 | 第12-14页 |
1.3.1 CYP4、CYP6和CYP9家族与昆虫抗药性 | 第12-13页 |
1.3.2 细胞色素P450介导的昆虫抗药性机制 | 第13-14页 |
1.4 RNA干扰在昆虫中的作用机理及应用进展 | 第14-15页 |
1.4.1 RNA干扰技术作用原理及作用方式 | 第14页 |
1.4.2 RNA干扰技术在昆虫中的应用 | 第14-15页 |
1.4.3 RNA干扰对昆虫细胞色素P450基因的沉默研究 | 第15页 |
1.5 本文研究的目的及意义 | 第15-16页 |
2 材料与方法 | 第16-26页 |
2.1 供试昆虫 | 第16页 |
2.2 主要试剂与仪器 | 第16页 |
2.3 甘蓝夜蛾CYP9A90基因全长克隆 | 第16-20页 |
2.3.1 总RNA的提取及第一链c DNA的合成 | 第16-17页 |
2.3.2 甘蓝夜蛾CYP9A90基因片段的克隆 | 第17-19页 |
2.3.3 RACE方法获得CYP9A90基因的全长序列 | 第19-20页 |
2.3.4 序列分析 | 第20页 |
2.4 甘蓝夜蛾三个细胞色素P450基因的m RNA表达模式 | 第20-22页 |
2.4.1 甘蓝夜蛾三个细胞色素P450基因Real-time PCR引物设计 | 第20-21页 |
2.4.2 甘蓝夜蛾三个细胞色素P450基因在不同组织部位的表达 | 第21-22页 |
2.4.3 甘蓝夜蛾三个细胞色素P450基因在不同龄期的表达 | 第22页 |
2.5 溴氰菊酯作用甘蓝夜蛾对细胞色素P450基因表达的影响 | 第22-23页 |
2.5.1 甘蓝夜蛾在溴氰菊酯处理下的生物测定 | 第22页 |
2.5.2 溴氰菊酯对飞蝗细胞色素P450基因的诱导表达 | 第22-23页 |
2.6 甘蓝夜蛾三个细胞色素P450基因的生物学功能分析 | 第23-26页 |
2.6.1 ds RNA的体外合成 | 第23-25页 |
2.6.2 甘蓝夜蛾三个细胞色素P450基因ds RNA的注射 | 第25-26页 |
3 结果与分析 | 第26-37页 |
3.1 CYP9A90基因的克隆及序列分析 | 第26-29页 |
3.1.1 获得甘蓝夜蛾P450基因的c DNA全长 | 第26页 |
3.1.2 CYP9A90基因的序列分析 | 第26-28页 |
3.1.3 CYP9A90基因的同源性分析 | 第28-29页 |
3.2 甘蓝夜蛾三个细胞色素P450基因的m RNA表达分析 | 第29-31页 |
3.2.1 甘蓝夜蛾不同组织器官三个细胞色素P450基因的分布 | 第29-30页 |
3.2.2 甘蓝夜蛾不同发育龄期三个细胞色素P450基因的表达 | 第30-31页 |
3.3 溴氰菊酯对三个细胞色素P450基因的诱导表达分析 | 第31-35页 |
3.3.1 生测结果 | 第31-32页 |
3.3.2 不同浓度溴氰菊酯对甘蓝夜蛾三个细胞色素P450基因表达量的影响 | 第32-33页 |
3.3.3 溴氰菊酯作用甘蓝夜蛾不同时间后细胞色素P450基因表达量的变化 | 第33-34页 |
3.3.4 不同龄期的甘蓝夜蛾在单位体重药量一定下的表达水平分析 | 第34-35页 |
3.4 甘蓝夜蛾三个细胞色素P450基因的功能分析 | 第35-37页 |
3.4.1 甘蓝夜蛾三个细胞色素P450基因沉默效率分析 | 第35页 |
3.4.2 三个细胞色素P450基因沉默后甘蓝夜蛾对溴氰菊酯的抗药性分析 | 第35-37页 |
4 讨论 | 第37-39页 |
5 结论 | 第39-40页 |
致谢 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-47页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第47页 |