| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 1 文献综述 | 第7-19页 |
| 1.1 转Bt基因植物研究进展 | 第7-10页 |
| 1.1.1 苏云金芽胞杆菌的一般特性 | 第8页 |
| 1.1.2 苏云金芽胞杆菌的生境和分布 | 第8页 |
| 1.1.3 苏云金芽胞杆菌的分类鉴定 | 第8-10页 |
| 1.2 杀虫晶体蛋白基因的分类及克隆 | 第10页 |
| 1.3 杀虫晶体蛋白基因的鉴定 | 第10-11页 |
| 1.4 Bt转基因植物研究 | 第11-14页 |
| 1.5 外源基因在转基因植物中高效表达的方法与策略 | 第14-19页 |
| 1.5.1 启动子 | 第14-15页 |
| 1.5.2 内含子 | 第15-16页 |
| 1.5.3 基质附着区序列的应用 | 第16页 |
| 1.5.4 基因改造 | 第16-17页 |
| 1.5.5 多基因策略 | 第17-18页 |
| 1.5.6 叶绿体转化 | 第18-19页 |
| 2 引言 | 第19-21页 |
| 2.1 实验目的及意义 | 第19-20页 |
| 2.2 技术路线 | 第20-21页 |
| 3 材料与方法 | 第21-31页 |
| 3.1 实验材料 | 第21-25页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第21页 |
| 3.1.2 载体与菌株 | 第21页 |
| 3.1.4 酶及试剂 | 第21-25页 |
| 3.2 仪器设备 | 第25-26页 |
| 3.3 LCryIBa3与SCryIBa3融合表达载体的构建 | 第26页 |
| 3 .3.1基因合成 | 第26页 |
| 3.3.2 LCryIBa3与SCryIBa3植物表达载体的构建 | 第26页 |
| 3.4 LCryIBa3 SCryIBa3植物表达载体转化农杆菌 | 第26-27页 |
| 3.4.1 农杆菌感受态细胞的制备 | 第26-27页 |
| 3.4.2 表达载体转化农杆菌EH1 05 | 第27页 |
| 3.4.3 阳性克隆的鉴定 | 第27页 |
| 3.5 T_0代LCryIBa3 SCryIBa3转基因水稻的获得 | 第27-28页 |
| 3.5.1 水稻成熟胚愈伤组织的获得 | 第27页 |
| 3.5.2 用于转化水稻的农杆菌菌液的准备 | 第27-28页 |
| 3.5.3 农杆菌侵染水稻愈伤组织 | 第28页 |
| 3.5.4 筛选抗性愈伤 | 第28页 |
| 3.5.5 抗性愈伤组织的分化 | 第28页 |
| 3.5.6 生根、壮苗和移栽 | 第28页 |
| 3.6 T_0代阳性转基因植株的PCR检测 | 第28-29页 |
| 3.7 T_1代转基因水稻阳性植株的筛选与检测 | 第29-31页 |
| 3.7.1 PCR检测 | 第29页 |
| 3.7.2 分蘖期叶子中Bt含量的检测 | 第29-30页 |
| 3.7.3 抽穗期叶子与穗子中Bt含量的检测 | 第30-31页 |
| 4 结果与分析 | 第31-39页 |
| 4.1 LCrylBa3 SCrylBa3基因的合成与检测 | 第31-33页 |
| 4.2 LCrylBa3 SCrylBa3融合表达载体的构建 | 第33页 |
| 4.3 T_0转基因水稻的获得 | 第33-34页 |
| 4.4 转基因水稻的PCR检测 | 第34-35页 |
| 4.5. T_1代转基因水稻的阳性植株的检测 | 第35-39页 |
| 4.5.1 PCR检测 | 第35页 |
| 4.5.2 分蘖期叶子中Bt含量的检测 | 第35-36页 |
| 4.5.3 分蘖期与抽穗期叶子中Bt含量比较 | 第36-37页 |
| 4.5.4 抽穗期叶子与穗子中Bt含量比较 | 第37-38页 |
| 4.5.5 两种不同片段转基因水稻植株的Bt含量的比较 | 第38-39页 |
| 5 讨论 | 第39-41页 |
| 1. CryIBa3基因的特征 | 第39页 |
| 2. CryIBa3在转基因水稻中表达量 | 第39-40页 |
| 3. CryIBa3的全长及片段在植物中的表达量 | 第40-41页 |
| 6 结论 | 第41-42页 |
| 7 参考文献 | 第42-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 作者简介 | 第48页 |
| 硕士期间发表的硏究成果 | 第48页 |
