摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
一、文献综述 | 第11-17页 |
1.1 马属动物概况 | 第11-12页 |
1.1.1 马属动物起源进化 | 第11-12页 |
1.1.2 马属动物分类特征 | 第12页 |
1.1.3 马属动物的应用价值 | 第12页 |
1.2 公骡不育机制的研究进展 | 第12-15页 |
1.2.1 染色体核型G带研究 | 第12-13页 |
1.2.2 精巢组织形态学研究 | 第13-14页 |
1.2.3 生精阻滞时期的研究 | 第14-15页 |
1.3 DDX3Y基因与雄性不育关系的研究 | 第15-17页 |
二、马属雄性动物成纤维细胞的培养 | 第17-20页 |
2.1 材料 | 第17页 |
2.1.1 试验动物 | 第17页 |
2.1.2 仪器耗材 | 第17页 |
2.1.3 实验试剂 | 第17页 |
2.2 方法 | 第17-18页 |
2.2.1 获取材料 | 第17-18页 |
2.2.2 原代培养 | 第18页 |
2.2.3 传代培养 | 第18页 |
2.2.4 细胞冻存 | 第18页 |
2.2.5 解冻细胞 | 第18页 |
2.3 结果与分析 | 第18页 |
2.4 讨论 | 第18-20页 |
三、马属雄性动物染色体核型、G带分析 | 第20-24页 |
3.1 材料 | 第20页 |
3.1.1 实验材料 | 第20页 |
3.1.2 仪器耗材 | 第20页 |
3.1.3 实验试剂 | 第20页 |
3.2 方法 | 第20-22页 |
3.2.1 培养细胞 | 第21页 |
3.2.2 秋水仙素处理 | 第21页 |
3.2.3 低渗、预固定 | 第21页 |
3.2.4 固定 | 第21页 |
3.2.5 滴片 | 第21页 |
3.2.6 消化 | 第21页 |
3.2.7 染色 | 第21页 |
3.2.8 染色体核型、G带排列 | 第21-22页 |
3.3 结果与分析 | 第22页 |
3.4 讨论 | 第22-24页 |
3.4.1 细胞质量 | 第22页 |
3.4.2 秋水仙素处理 | 第22-23页 |
3.4.3 低渗固定处理 | 第23页 |
3.4.4 染色体核型、G带排列 | 第23-24页 |
四、马属雄性动物DDX3Y基因片段克隆及生物信息学分析 | 第24-44页 |
4.1 材料 | 第24-25页 |
4.1.1 试验动物 | 第24页 |
4.1.2 实验仪器 | 第24页 |
4.1.3 实验试剂 | 第24页 |
4.1.4 常用溶液配方 | 第24-25页 |
4.2 方法 | 第25-27页 |
4.2.1 基因组DNA的提取 | 第25页 |
4.2.2 引物设计与合成 | 第25-26页 |
4.2.3 PCR扩增条件 | 第26页 |
4.2.4 PCR产物克隆与测序 | 第26页 |
4.2.5 数据分析 | 第26-27页 |
4.3 结果与分析 | 第27-42页 |
4.3.1 DDX3Y基因片段的克隆 | 第27-31页 |
4.3.2 DDX3Y基因片段的拼接结果 | 第31-33页 |
4.3.3 DDX3Y氨基酸序列的预测 | 第33-36页 |
4.3.4 DDX3Y序列的生物信息学分析 | 第36-42页 |
4.4 讨论 | 第42-44页 |
结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-50页 |
附录 | 第50-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
攻读硕士期间发表的论文 | 第56页 |