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番茄SlMADS23-like基因的克隆及功能研究

中文摘要第3-5页
英文摘要第5-6页
缩略词表第11-12页
1 绪论第12-26页
    1.1 课题的国内外研究进展第12-21页
        1.1.1 MADS-box基因的分布第12页
        1.1.2 MADS-box基因的命名第12-13页
        1.1.3 MADS-box基因的分类及结构第13-14页
        1.1.4 MADS-box基因的功能第14-19页
        1.1.5 番茄中MADS-box基因的研究第19-21页
    1.2 植物非生物胁迫第21-22页
    1.3 植物非生物胁迫应答相关基因的研究第22-23页
    1.4 MADS-box基因在植物抗逆性中的研究第23页
    1.5 课题研究的提出和研究意义第23-24页
    1.6 研究内容与技术路线第24-25页
        1.6.1 研究内容第24-25页
        1.6.2 技术路线第25页
    1.7 课题的创新点第25-26页
2 SlMADS23-like基因的克隆第26-38页
    2.1 实验材料、试剂第26-29页
        2.1.1 材料第26页
        2.1.2 试剂第26-29页
    2.2 仪器与设备第29页
    2.3 方法第29-35页
        2.3.1 番茄总RNA的提取第29-30页
        2.3.2 cDNA的合成第30-31页
        2.3.3 SlMADS23-like基因的引物设计第31页
        2.3.4 SlMADS23-like基因的片段扩增及纯化第31-32页
        2.3.5 SlMADS23-like基因与连接T载体第32-35页
    2.4 结果与分析第35-37页
        2.4.1 SlMADS23-like基因的片段扩增第35-36页
        2.4.2 pMD18-T-SlMADS23-like重组子的筛选及验证第36页
        2.4.3 SlMADS23-like基因片段测序第36-37页
    2.5 小结第37-38页
3 SlMADS23-like基因的生物信息学分析第38-46页
    3.1 方法第38页
        3.1.1 SlMADS23-like蛋白的一级结构第38页
        3.1.2 SlMADS23-like蛋白的二级结构第38页
        3.1.3 SlMADS23-like蛋白的理化分析及亚细胞定位预测第38页
        3.1.4 SlMADS23-like与其他MADS-box蛋白的序列比对第38页
        3.1.5 SlMADS23-like的进化树分析第38页
    3.2 结果与分析第38-44页
        3.2.1 SlMADS23-like蛋白的一级结构第38-41页
        3.2.2 SlMADS23-like蛋白的二级结构第41页
        3.2.3 SlMADS23-like蛋白的理化性质分析第41-42页
        3.2.4 SlMADS23-like蛋白与其他MADS-box蛋白的同源比对第42-43页
        3.2.5 SlMADS23-like蛋白与其他MADS-box蛋白的进化树分析第43-44页
    3.3 小结第44-46页
4 SlMADS23-like基因的表达模式分析第46-50页
    4.1 材料和试剂第46页
        4.1.1 材料第46页
        4.1.2 试剂第46页
    4.2 仪器第46页
    4.3 方法第46-47页
        4.3.1 植物组织样品的收集第46-47页
        4.3.2 番茄总RNA的提取第47页
        4.3.3 SlMADS23-like基因的q RT-PCR引物的设计第47页
        4.3.4 SlMADS23-like基因的表达模式分析第47页
    4.4 SlMADS23-like基因在番茄组织中的表达模式分析第47-48页
    4.5 小结第48-50页
5 SlMADS23-like基因的RNAi沉默载体的构建第50-62页
    5.1 材料第50-52页
    5.2 仪器和设备第52页
    5.3 方法第52-58页
        5.3.1 SlMADS23-like基因沉默载体的构建第52页
        5.3.2 SlMADS23-like基因沉默片段的克隆第52-53页
        5.3.3 pHANNIBAL-SlMADS23-likei载体的构建第53-56页
        5.3.4 pBIN19-SlMADS23-likei沉默终载体的构建第56-58页
    5.4 结果与分析第58-61页
        5.4.1 pHANNIBAL-SlMADS23-likei载体的构建第58-60页
        5.4.2 pBIN19-SlMADS23-likei沉默终载体的构建第60-61页
    5.5 小结第61-62页
6 SlMADS23-like基因RNAi沉默载体转化第62-74页
    6.1 材料、试剂和培养基第62-65页
        6.1.1 材料第62页
        6.1.2 试剂第62-63页
        6.1.3 实验所用的培养基第63-65页
    6.2 仪器设备第65-66页
    6.3 方法第66-71页
        6.3.1 RNAi沉默菌株和农杆菌的结合转移第66-67页
        6.3.2 SlMADS23-like基因沉默载体转化番茄第67-68页
        6.3.3 SlMADS23-like基因沉默的转基因番茄的培养第68-69页
        6.3.4 SlMADS23-like基因阳性沉默的转基因番茄株系的PCR筛选第69-70页
        6.3.5 SlMADS23-like基因在沉默转基因番茄株系中的表达检测及筛选第70-71页
    6.4 结果与分析第71-73页
        6.4.1 培育SlMADS23-like基因沉默转基因番茄株系第71页
        6.4.2 SlMADS23-like基因阳性沉默转基因番茄株系的PCR筛选第71-72页
        6.4.3 SlMADS23-like基因在沉默转基因番茄株系中的表达检测第72-73页
    6.5 小结第73-74页
7 SlMADS23-like在番茄中RNAi沉默株系的表型观察及分析第74-80页
    7.1 材料与试剂第74页
        7.1.1 材料第74页
        7.1.2 试剂第74页
    7.2 仪器与设备第74页
    7.3 方法第74-75页
        7.3.1 SlMADS23-like基因沉默转基因番茄叶片的表型及叶片叶绿素含量的测定第74-75页
        7.3.2 SlMADS23-like基因沉默转基因番茄青果时期的表型及青果时期叶绿素含量的测定第75页
        7.3.3 SlMADS23-like基因沉默转基因番茄青果时期叶绿素相关基因检测第75页
    7.4 结果与分析第75-78页
        7.4.1 SlMADS23-like基因转基因番茄叶片的表型及叶片叶绿素含量的测定第75-76页
        7.4.2 SlMADS23-like基因转基因番茄青果时期的表型及青果时期叶绿素含量的测定第76-77页
        7.4.3 SlMADS23-like基因转基因番茄青果时期叶绿素相关基因检测第77-78页
    7.5 小结第78-80页
8 SlMADS23-like基因的非生物胁迫实验设计及分析第80-94页
    8.1 材料和方法第80-84页
        8.1.1 材料第80页
        8.1.2 试剂第80页
        8.1.3 SlMADS23-like基因在AC中的非生物胁迫处理实验第80页
        8.1.4 SlMADS23-like基因的种子在ABA下的发芽率第80-81页
        8.1.5 SlMADS23-like基因发芽种子对盐胁迫和ABA敏感度的实验第81页
        8.1.6 SlMADS23-like基因转基因植株的非生物胁迫处理实验第81-84页
    8.2 结果与分析第84-92页
        8.2.1 SlMADS23-like基因在AC中的非生物胁迫处理实验第84-85页
        8.2.2 SlMADS23-like基因的种子在ABA下的发芽率第85页
        8.2.3 SlMADS23-like基因幼苗对盐胁迫和ABA敏感度的实验第85-87页
        8.2.4 SlMADS23-like基因转基因植株的非生物胁迫处理实验第87-92页
    8.3 小结第92-94页
9 讨论第94-98页
    9.1 SlMADS23-like在番茄中参与调节叶片与青果时期的叶绿素积累量的功能第94页
    9.2 SlMADS23-like转基因幼苗对ABA与盐溶液的敏感性研究第94-95页
    9.3 SlMADS23-like基因在非生物胁迫中的功能第95页
    9.4 SlMADS23-like可能参与调控多个胁迫相关基因的表达第95-98页
10 结论与展望第98-100页
    10.1 结论第98-99页
    10.2 展望第99-100页
致谢第100-102页
参考文献第102-114页
附录第114页
    A. 作者硕士期间发表的论文第114页
    B. 作者在攻读硕士学位期间参与的科研项目第114页

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