中文摘要 | 第3-5页 |
英文摘要 | 第5-6页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
1 绪论 | 第12-26页 |
1.1 课题的国内外研究进展 | 第12-21页 |
1.1.1 MADS-box基因的分布 | 第12页 |
1.1.2 MADS-box基因的命名 | 第12-13页 |
1.1.3 MADS-box基因的分类及结构 | 第13-14页 |
1.1.4 MADS-box基因的功能 | 第14-19页 |
1.1.5 番茄中MADS-box基因的研究 | 第19-21页 |
1.2 植物非生物胁迫 | 第21-22页 |
1.3 植物非生物胁迫应答相关基因的研究 | 第22-23页 |
1.4 MADS-box基因在植物抗逆性中的研究 | 第23页 |
1.5 课题研究的提出和研究意义 | 第23-24页 |
1.6 研究内容与技术路线 | 第24-25页 |
1.6.1 研究内容 | 第24-25页 |
1.6.2 技术路线 | 第25页 |
1.7 课题的创新点 | 第25-26页 |
2 SlMADS23-like基因的克隆 | 第26-38页 |
2.1 实验材料、试剂 | 第26-29页 |
2.1.1 材料 | 第26页 |
2.1.2 试剂 | 第26-29页 |
2.2 仪器与设备 | 第29页 |
2.3 方法 | 第29-35页 |
2.3.1 番茄总RNA的提取 | 第29-30页 |
2.3.2 cDNA的合成 | 第30-31页 |
2.3.3 SlMADS23-like基因的引物设计 | 第31页 |
2.3.4 SlMADS23-like基因的片段扩增及纯化 | 第31-32页 |
2.3.5 SlMADS23-like基因与连接T载体 | 第32-35页 |
2.4 结果与分析 | 第35-37页 |
2.4.1 SlMADS23-like基因的片段扩增 | 第35-36页 |
2.4.2 pMD18-T-SlMADS23-like重组子的筛选及验证 | 第36页 |
2.4.3 SlMADS23-like基因片段测序 | 第36-37页 |
2.5 小结 | 第37-38页 |
3 SlMADS23-like基因的生物信息学分析 | 第38-46页 |
3.1 方法 | 第38页 |
3.1.1 SlMADS23-like蛋白的一级结构 | 第38页 |
3.1.2 SlMADS23-like蛋白的二级结构 | 第38页 |
3.1.3 SlMADS23-like蛋白的理化分析及亚细胞定位预测 | 第38页 |
3.1.4 SlMADS23-like与其他MADS-box蛋白的序列比对 | 第38页 |
3.1.5 SlMADS23-like的进化树分析 | 第38页 |
3.2 结果与分析 | 第38-44页 |
3.2.1 SlMADS23-like蛋白的一级结构 | 第38-41页 |
3.2.2 SlMADS23-like蛋白的二级结构 | 第41页 |
3.2.3 SlMADS23-like蛋白的理化性质分析 | 第41-42页 |
3.2.4 SlMADS23-like蛋白与其他MADS-box蛋白的同源比对 | 第42-43页 |
3.2.5 SlMADS23-like蛋白与其他MADS-box蛋白的进化树分析 | 第43-44页 |
3.3 小结 | 第44-46页 |
4 SlMADS23-like基因的表达模式分析 | 第46-50页 |
4.1 材料和试剂 | 第46页 |
4.1.1 材料 | 第46页 |
4.1.2 试剂 | 第46页 |
4.2 仪器 | 第46页 |
4.3 方法 | 第46-47页 |
4.3.1 植物组织样品的收集 | 第46-47页 |
4.3.2 番茄总RNA的提取 | 第47页 |
4.3.3 SlMADS23-like基因的q RT-PCR引物的设计 | 第47页 |
4.3.4 SlMADS23-like基因的表达模式分析 | 第47页 |
4.4 SlMADS23-like基因在番茄组织中的表达模式分析 | 第47-48页 |
4.5 小结 | 第48-50页 |
5 SlMADS23-like基因的RNAi沉默载体的构建 | 第50-62页 |
5.1 材料 | 第50-52页 |
5.2 仪器和设备 | 第52页 |
5.3 方法 | 第52-58页 |
5.3.1 SlMADS23-like基因沉默载体的构建 | 第52页 |
5.3.2 SlMADS23-like基因沉默片段的克隆 | 第52-53页 |
5.3.3 pHANNIBAL-SlMADS23-likei载体的构建 | 第53-56页 |
5.3.4 pBIN19-SlMADS23-likei沉默终载体的构建 | 第56-58页 |
5.4 结果与分析 | 第58-61页 |
5.4.1 pHANNIBAL-SlMADS23-likei载体的构建 | 第58-60页 |
5.4.2 pBIN19-SlMADS23-likei沉默终载体的构建 | 第60-61页 |
5.5 小结 | 第61-62页 |
6 SlMADS23-like基因RNAi沉默载体转化 | 第62-74页 |
6.1 材料、试剂和培养基 | 第62-65页 |
6.1.1 材料 | 第62页 |
6.1.2 试剂 | 第62-63页 |
6.1.3 实验所用的培养基 | 第63-65页 |
6.2 仪器设备 | 第65-66页 |
6.3 方法 | 第66-71页 |
6.3.1 RNAi沉默菌株和农杆菌的结合转移 | 第66-67页 |
6.3.2 SlMADS23-like基因沉默载体转化番茄 | 第67-68页 |
6.3.3 SlMADS23-like基因沉默的转基因番茄的培养 | 第68-69页 |
6.3.4 SlMADS23-like基因阳性沉默的转基因番茄株系的PCR筛选 | 第69-70页 |
6.3.5 SlMADS23-like基因在沉默转基因番茄株系中的表达检测及筛选 | 第70-71页 |
6.4 结果与分析 | 第71-73页 |
6.4.1 培育SlMADS23-like基因沉默转基因番茄株系 | 第71页 |
6.4.2 SlMADS23-like基因阳性沉默转基因番茄株系的PCR筛选 | 第71-72页 |
6.4.3 SlMADS23-like基因在沉默转基因番茄株系中的表达检测 | 第72-73页 |
6.5 小结 | 第73-74页 |
7 SlMADS23-like在番茄中RNAi沉默株系的表型观察及分析 | 第74-80页 |
7.1 材料与试剂 | 第74页 |
7.1.1 材料 | 第74页 |
7.1.2 试剂 | 第74页 |
7.2 仪器与设备 | 第74页 |
7.3 方法 | 第74-75页 |
7.3.1 SlMADS23-like基因沉默转基因番茄叶片的表型及叶片叶绿素含量的测定 | 第74-75页 |
7.3.2 SlMADS23-like基因沉默转基因番茄青果时期的表型及青果时期叶绿素含量的测定 | 第75页 |
7.3.3 SlMADS23-like基因沉默转基因番茄青果时期叶绿素相关基因检测 | 第75页 |
7.4 结果与分析 | 第75-78页 |
7.4.1 SlMADS23-like基因转基因番茄叶片的表型及叶片叶绿素含量的测定 | 第75-76页 |
7.4.2 SlMADS23-like基因转基因番茄青果时期的表型及青果时期叶绿素含量的测定 | 第76-77页 |
7.4.3 SlMADS23-like基因转基因番茄青果时期叶绿素相关基因检测 | 第77-78页 |
7.5 小结 | 第78-80页 |
8 SlMADS23-like基因的非生物胁迫实验设计及分析 | 第80-94页 |
8.1 材料和方法 | 第80-84页 |
8.1.1 材料 | 第80页 |
8.1.2 试剂 | 第80页 |
8.1.3 SlMADS23-like基因在AC中的非生物胁迫处理实验 | 第80页 |
8.1.4 SlMADS23-like基因的种子在ABA下的发芽率 | 第80-81页 |
8.1.5 SlMADS23-like基因发芽种子对盐胁迫和ABA敏感度的实验 | 第81页 |
8.1.6 SlMADS23-like基因转基因植株的非生物胁迫处理实验 | 第81-84页 |
8.2 结果与分析 | 第84-92页 |
8.2.1 SlMADS23-like基因在AC中的非生物胁迫处理实验 | 第84-85页 |
8.2.2 SlMADS23-like基因的种子在ABA下的发芽率 | 第85页 |
8.2.3 SlMADS23-like基因幼苗对盐胁迫和ABA敏感度的实验 | 第85-87页 |
8.2.4 SlMADS23-like基因转基因植株的非生物胁迫处理实验 | 第87-92页 |
8.3 小结 | 第92-94页 |
9 讨论 | 第94-98页 |
9.1 SlMADS23-like在番茄中参与调节叶片与青果时期的叶绿素积累量的功能 | 第94页 |
9.2 SlMADS23-like转基因幼苗对ABA与盐溶液的敏感性研究 | 第94-95页 |
9.3 SlMADS23-like基因在非生物胁迫中的功能 | 第95页 |
9.4 SlMADS23-like可能参与调控多个胁迫相关基因的表达 | 第95-98页 |
10 结论与展望 | 第98-100页 |
10.1 结论 | 第98-99页 |
10.2 展望 | 第99-100页 |
致谢 | 第100-102页 |
参考文献 | 第102-114页 |
附录 | 第114页 |
A. 作者硕士期间发表的论文 | 第114页 |
B. 作者在攻读硕士学位期间参与的科研项目 | 第114页 |