摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
中英文缩略语表 | 第11-12页 |
1 文献综述 | 第12-23页 |
1.1 植物的果实 | 第12页 |
1.2 果实的发育成熟 | 第12页 |
1.3 甜瓜 | 第12-13页 |
1.4 植物基因组学研究 | 第13-14页 |
1.5 基于植物基因组学的基因功能研究方法 | 第14-15页 |
1.6 基因家族 | 第15页 |
1.7 转录因子 | 第15-22页 |
1.7.1 AP2/ERF转录因子家族 | 第17-18页 |
1.7.2 SBP-Box转录因子家族 | 第18-20页 |
1.7.3 EIN3/EILs转录因子家族 | 第20页 |
1.7.4 14-3-3基因家族 | 第20-22页 |
1.8 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-36页 |
2.1 研究材料 | 第23页 |
2.1.1 植物材料 | 第23页 |
2.1.2 菌种和质粒 | 第23页 |
2.1.3 主要试剂 | 第23页 |
2.2 研究方法 | 第23-36页 |
2.2.1 甜瓜果实发育相关四个基因家族的全基因组鉴定 | 第23-24页 |
2.2.2 甜瓜果实发育相关四个基因家族的序列比对、系统发生、保守基序分析 | 第24-25页 |
2.2.3 SBP-box基因家族成员的miRNA156靶序列定位 | 第25页 |
2.2.4 甜瓜果实发育相关四个基因家族表达模式分析 | 第25-26页 |
2.2.5 EIN3/EILs及14-3-3家族蛋白调控网络分析 | 第26页 |
2.2.6 引物的设计与合成 | 第26-27页 |
2.2.7 甜瓜果实总RNA的提取 | 第27页 |
2.2.8 实时定量PCR分析 | 第27-28页 |
2.2.9 CmERFII-9基因的cDNA片段克隆 | 第28-30页 |
2.2.10 超表达载体pPZP221-CmERFII-9的构建 | 第30-31页 |
2.2.11 RNAi载体pART27-CmERFII-9的构建 | 第31-34页 |
2.2.12 CmERFII-9基因在甜瓜果实中的瞬时表达 | 第34-35页 |
2.2.13 qRT-PCR检测CmERFII-9基因的瞬时表达特性 | 第35-36页 |
3 结果与分析 | 第36-86页 |
3.1 AP2/ERF转录因子家族 | 第36-59页 |
3.1.1 鉴定得到136个甜瓜AP2/ERF超家族基因 | 第36-37页 |
3.1.2 ERF家族基因的系统发生分析 | 第37-41页 |
3.1.3 ERF家族蛋白的保守基序分析 | 第41-42页 |
3.1.4 ERF家族基因的结构与进化 | 第42-44页 |
3.1.5 ERF亚家族基因表达模式分析 | 第44-46页 |
3.1.6 甜瓜果实总RNA的提取 | 第46页 |
3.1.7 ERF亚家族基因电子表达谱的qRT-PCR验证 | 第46-47页 |
3.1.8 CmERFII-9基因cDNA片段的克隆 | 第47-49页 |
3.1.9 超表达载体pPZP221-CmERFII-9的构建 | 第49-52页 |
3.1.10 RNAi表达载体pART27-CmERFII-9的构建 | 第52-57页 |
3.1.11 CmERFII-9基因在甜瓜果实中的瞬时表达 | 第57-58页 |
3.1.12 qRT-PCR检测CmERFII-9基因的瞬时表达特性 | 第58页 |
3.1.13 果实成熟相关基因的表达特性分析 | 第58-59页 |
3.2 SBP-Box转录因子家族 | 第59-65页 |
3.2.1 鉴定得到13个SBP-box家族基因 | 第59页 |
3.2.2 SBP-box家族基因的系统发生分析 | 第59-60页 |
3.2.3 SBP-box家族蛋白的保守序列分析 | 第60-64页 |
3.2.4 SBP-box家族基因miRNA156靶序列定位 | 第64页 |
3.2.5 SBP-box家族基因表达模式分析 | 第64-65页 |
3.3 EIN3/EILs转录因子家族 | 第65-76页 |
3.3.1 鉴定得到4个EIN3/EILs家族基因 | 第65-66页 |
3.3.2 EIN3/EILs基因家族的多重序列比对及系统发生分析 | 第66-68页 |
3.3.3 EIN3/EILs蛋白保守序列分析 | 第68-69页 |
3.3.4 EIN3/EILs基因表达模式分析 | 第69-70页 |
3.3.5 EIN3/EILs家族蛋白调控网络分析 | 第70-76页 |
3.4 14-3-3基因家族 | 第76-86页 |
3.4.1 鉴定得到9个14-3-3家族基因 | 第76页 |
3.4.2 14-3-3家族基因的系统发生分析 | 第76-77页 |
3.4.3 14-3-3蛋白的序列比对及保守基序分析 | 第77-81页 |
3.4.4 14-3-3基因家族表达模式分析 | 第81页 |
3.4.5 14-3-3蛋白调控网络分析 | 第81-86页 |
4 讨论 | 第86-92页 |
4.1 AP2/ERF转录因子家族 | 第86-87页 |
4.2 CmERFII-9基因的功能研究 | 第87-88页 |
4.3 SBP-Box转录因子家族 | 第88-89页 |
4.4 EIN3/EILs转录因子家族 | 第89-90页 |
4.5 14-3-3基因家族 | 第90-92页 |
5 结论 | 第92-94页 |
参考文献 | 第94-107页 |
附录 | 第107-128页 |
致谢 | 第128-129页 |
攻读博士学位期间学术成果目录 | 第129-130页 |