中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
缩略语/符号说明 | 第12-14页 |
前言 | 第14-23页 |
研究现状、成果 | 第14-21页 |
研究目的、方法 | 第21-23页 |
一、衣原体噬菌体phiCPG1衣壳蛋白VP1与沙眼衣原体多形外膜蛋白PmpI的生物信息学分析 | 第23-38页 |
1.1 对象和方法 | 第23-24页 |
1.1.1 本研究中所涉及到蛋白的编码基因序列信息 | 第23页 |
1.1.2 实验方法 | 第23-24页 |
1.2 结果 | 第24-32页 |
1.2.1 沙眼衣原体PmpI基因及其编码蛋白的生物信息学分析 | 第24-27页 |
1.2.2 VP1基因及其编码蛋白的生物信息学分析 | 第27-29页 |
1.2.3 基于生物信息学分析进行VP1蛋白的区域截短设计 | 第29-30页 |
1.2.4 VP1基因的密码子优化分析 | 第30-32页 |
1.3 讨论 | 第32-37页 |
1.3.1 生物信息学分析的优势及其意义 | 第33页 |
1.3.2 基因序列优化对于蛋白表达及后续实验研究的重要意义 | 第33-34页 |
1.3.3 蛋白的二级结构与B细胞表位分析手段的应用 | 第34-35页 |
1.3.4 生物信息学分析结果对于深入了解PmpI蛋白的意义 | 第35-36页 |
1.3.5 VP1蛋白生物信息学分析及区域截短设计方案的解读 | 第36-37页 |
1.4 小结 | 第37-38页 |
二、衣原体噬菌体phiCPG1衣壳蛋白VP1与沙眼衣原体多形外膜蛋白PmpI的原核表达、纯化、抗体制备及鉴定 | 第38-69页 |
2.1 对象和方法 | 第38-58页 |
2.1.1 菌株、质粒、实验动物 | 第38页 |
2.1.2 实验试剂与所需液体配制 | 第38-41页 |
2.1.3 仪器与耗材 | 第41-42页 |
2.1.4 实验方法 | 第42-58页 |
2.2 结果 | 第58-66页 |
2.2.1 不同标签沙眼衣原体D型PmpI蛋白N端及全长的表达、纯化与鉴定 | 第58-61页 |
2.2.2 衣原体噬菌体phiCPG1衣壳蛋白VP1截短片段的表达、纯化与鉴定 | 第61-65页 |
2.2.3 经密码子优化后FL-oVP1蛋白的诱导表达、纯化与鉴定 | 第65-66页 |
2.3 讨论 | 第66-68页 |
2.3.1 蛋白表达、纯化等操作技巧 | 第66-67页 |
2.3.2 CCK-8 试剂盒检测VP1蛋白的细胞毒性作用 | 第67-68页 |
2.4 小结 | 第68-69页 |
三、衣原体噬菌体phiCPG1衣壳蛋白VP1对沙眼衣原体作用的检测及作用位点的探索 | 第69-84页 |
3.1 对象和方法 | 第69-76页 |
3.1.1 细胞株、沙眼衣原体株 | 第69页 |
3.1.2 试剂与液体配制 | 第69-70页 |
3.1.3 仪器与耗材 | 第70页 |
3.1.4 实验方法 | 第70-76页 |
3.2 结果 | 第76-79页 |
3.2.1 沙眼衣原体E型Bour标准株的培养方法 | 第76页 |
3.2.2 各类VP1蛋白对沙眼衣原体E型标准株的作用检测及统计 | 第76-77页 |
3.2.3 Far-Western检测各类VP1蛋白与Ct多形外膜蛋白PmpI的结合 | 第77-78页 |
3.2.4 GST pull-down检测蛋白间相互作用 | 第78-79页 |
3.2.5 共聚焦荧光显微镜检测E型Ct PmpI蛋白在不同培养时间段的定位情况 | 第79页 |
3.3 讨论 | 第79-83页 |
3.3.1 各类VP1蛋白对沙眼衣原体E型标准株的抑制作用比较 | 第80-81页 |
3.3.2 基于蛋白相互作用研究方法检测各类截短VP1蛋白与PmpI的结合效应 | 第81页 |
3.3.3 E型Ct PmpI蛋白在可能存在不同时相的构象改变 | 第81-83页 |
3.4 小结 | 第83-84页 |
全文结论 | 第84-85页 |
论文创新点 | 第85-86页 |
参考文献 | 第86-95页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第95-96页 |
综述 | 第96-114页 |
衣原体多形外膜蛋白的功能及调节作用的研究进展 | 第96-104页 |
综述参考文献 | 第100-104页 |
蛋白质表达及修饰技术的最新进展 | 第104-114页 |
综述参考文献 | 第110-114页 |
致谢 | 第114-115页 |
个人简历 | 第115页 |