中文摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
主要英文缩略词表 | 第8-9页 |
一、引言 | 第9-12页 |
二、材料 | 第12-16页 |
三、方法 | 第16-38页 |
1.CM614-629/I-A~d/IgG2b Fc二聚体表达载体的构建 | 第16-32页 |
1.1 查找目的基因序列,设计PCR引物 | 第16-18页 |
1.2 获取Bal/b c小鼠cDNA文库,扩增目的基因片段并回收 | 第18-19页 |
1.3 获取I-A~dα-Fos、CM614-629/I-A~dβ-Jun片段 | 第19-21页 |
1.4 大量PCR获取I-A~dα-Fos、CM614-629/I-A~dβ-Jun和IgG2b Fc片段 | 第21-22页 |
1.5 质粒pFastBac~(TM)Dual的提取 | 第22-23页 |
1.6 质粒与目的基因的酶切、连接,重组pFastBac~(TM)Dual的鉴定 | 第23-30页 |
1.7 连接产物转化DH10Bac感受态受体菌 | 第30页 |
1.8 蓝白斑筛选 | 第30-31页 |
1.9 重组穿梭质粒Bacmid+[CM614-629/I-A~d/IgG2b-Fc]的获得 | 第31-32页 |
2.用昆虫表达系统表达CM614-629/I-A~d/IgG2b Fc二聚体融合蛋白 | 第32-34页 |
2.1 sf9细胞复苏、培养及冻存 | 第32-33页 |
2.2 用含目的基因的穿梭质粒Bacmid+[CM614-629/I-A~d/IgG2b Fc]转染sf9细胞 | 第33-34页 |
2.3 用携带CM614-629/I-A~d/IgG2b Fc基因的病毒感染sf9细胞 | 第34页 |
3.可溶性CM614-629/I-A~d/IgG2b Fc二聚体的鉴定 | 第34-38页 |
3.1 CM614-629/I-A~d/IgG2b Fc二聚体的ELISA鉴定 | 第34-35页 |
3.2 CM614-629/I-A~d/IgG2b Fc二聚体的大量表达与浓缩 | 第35页 |
3.3 浓缩后的CM614-629/I-A~d/IgG2b Fc二聚体的构象鉴定 | 第35-38页 |
四、结果 | 第38-42页 |
1.CM614-629/I-A~d/IgG2b Fc融合基因真核表达载体的构建 | 第38-40页 |
1.1 组成CM614-629/I-A~d/IgG2b Fc融合基因的各个目的基因的获取 | 第38页 |
1.2 可溶性CM614-629/I-A~d/IgG2b Fc融合基因克隆载体的构建 | 第38-40页 |
1.3 可溶性CM614-629/I-A~d/IgG2b Fc融合基因真核表达载体的构建 | 第40页 |
2.可溶性CM614-629/I-A~d/IgG2b Fc融合蛋白的表达与鉴定 | 第40-42页 |
2.1 用真核表达载体Bacmid+[CM614-629/I-A~d/IgG2b Fc] 转染昆虫sf9并 获得带CM614-629/I-A~d/IgG2b Fc融合基因的病毒颗粒 | 第40-41页 |
2.2 可溶性CM614-629/I-A~d/IgG2b Fc融合蛋白的ELISA鉴定 | 第41页 |
2.3 可溶性CM614-629/I-A~d/IgG2b Fc二聚体的western-blot鉴定 | 第41-42页 |
五、讨论 | 第42-45页 |
六、结论 | 第45-46页 |
七、参考文献 | 第46-51页 |
八、综述 | 第51-60页 |
参考文献 | 第56-60页 |
九、附录 | 第60-61页 |
硕士期间发表文章的文章 | 第60-61页 |
十、致谢 | 第61页 |