摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第12-18页 |
1 褐色橘蚜的发生为害 | 第12页 |
2 昆虫对杀虫剂抗性的研究进展 | 第12-14页 |
3 昆虫乙酰胆碱酯酶与其介导的抗药性 | 第14-15页 |
4 RNA干扰技术在基因功能研究中的应用 | 第15-16页 |
5 昆虫杆状病毒表达系统在基因功能研究中的应用 | 第16-18页 |
引言 | 第18-20页 |
1 论文的研究背景及意义 | 第18页 |
2 论文研究框架 | 第18-20页 |
第二章 褐色橘蚜乙酰胆碱酯酶基因序列及系统发育分析 | 第20-34页 |
1 材料与方法 | 第20-29页 |
1.1 供试虫源 | 第20页 |
1.2 主要供试药剂及仪器 | 第20-21页 |
1.3 实验方法 | 第21-29页 |
2 结果与分析 | 第29-32页 |
2.1 褐色橘蚜乙酰胆碱酯酶基因cDNA序列克隆 | 第29页 |
2.2 褐色橘蚜乙酰胆碱酯酶基因cDNA序列分析 | 第29页 |
2.3 褐色橘蚜Tcace1和Tcace2序列的多重比对分析 | 第29-31页 |
2.4 褐色橘蚜Tcace1和Tcace2基因的系统发育分析 | 第31-32页 |
3 讨论 | 第32-34页 |
第三章 褐色橘蚜乙酰胆碱酯酶基因表达模式分析 | 第34-40页 |
1 材料与方法 | 第34-36页 |
1.1 供试虫源 | 第34页 |
1.2 主要试剂及仪器 | 第34页 |
1.3 实验方法 | 第34-36页 |
2 结果与分析 | 第36-38页 |
2.1 褐色橘蚜乙酰胆碱酯酶基因在不同发育阶段的表达模式 | 第36-37页 |
2.2 褐色橘蚜乙酰胆碱酯酶基因在不同体段的表达模式 | 第37-38页 |
3 讨论 | 第38-40页 |
第四章 基于RNAi技术的褐色橘蚜乙酰胆碱酯酶基因的功能分析 | 第40-54页 |
1 实验材料 | 第40-47页 |
1.1 供试虫源 | 第40页 |
1.2 主要试剂及仪器 | 第40-41页 |
1.3 实验方法 | 第41-47页 |
2 结果与分析 | 第47-52页 |
2.1 dsRNA合成电泳检测 | 第47-48页 |
2.2 沉默效率检测 | 第48-49页 |
2.3 干扰过程中死亡率检测 | 第49-50页 |
2.4 生物测定 | 第50-51页 |
2.5 基因干扰后褐色橘蚜AChE活性检测 | 第51-52页 |
3 讨论 | 第52-54页 |
第五章 褐色橘蚜乙酰胆碱酯酶基因真核表达及活性分析 | 第54-66页 |
1 材料与方法 | 第54-59页 |
1.1 供试虫源 | 第54页 |
1.2 主要试剂及仪器 | 第54-55页 |
1.3 供试细胞 | 第55页 |
1.4 实验方法 | 第55-59页 |
2 结果与分析 | 第59-64页 |
2.1 褐色橘蚜Tcace1和Tcace2重组载体的构建 | 第59-60页 |
2.2 pFastBac-Tcace1和pFast Bac-Tcace2重组质粒的构建 | 第60-61页 |
2.3 Bacmid-Tcace1和Bacmid-Tcace2重组杆粒的构建 | 第61页 |
2.4 重组杆粒对昆虫细胞的转染 | 第61-63页 |
2.5 TcAChE1和TcAChE2重组蛋白的动力学参数测定 | 第63页 |
2.6 TcAChE1和TcAChE2重组蛋白对抑制剂的敏感性测定 | 第63-64页 |
3 讨论 | 第64-66页 |
第六章 主要结果、结论和研究展望 | 第66-68页 |
1 主要结果与结论 | 第66-67页 |
1.1 褐色橘蚜乙酰胆碱酯酶基因克隆及序列系统发育分析 | 第66页 |
1.2 褐色橘蚜Tcace1和Tcace2基因时空表达模式分析 | 第66页 |
1.3 基于RNAi技术的褐色橘蚜Tcace1和Tcace2的基因功能鉴定 | 第66-67页 |
1.4 褐色橘蚜Tcace1和Tcace2基因功能表达及活性分析 | 第67页 |
2 研究展望 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-74页 |
在读期间发表的论文 | 第74-76页 |
致谢 | 第76-77页 |