摘要 | 第2-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
引言 | 第9-11页 |
材料与方法 | 第11-26页 |
1 实验材料 | 第11页 |
1.1 组织标本 | 第11页 |
1.2 实验细胞株 | 第11页 |
2 实验仪器 | 第11-12页 |
3 实验试剂 | 第12-14页 |
3.1 siRNA | 第12页 |
3.2 质粒 | 第12-13页 |
3.3 实时荧光定量PCR引物 | 第13页 |
3.4 Western blot试剂 | 第13-14页 |
3.5 其他主要试剂 | 第14页 |
4 实验试剂配制 | 第14-15页 |
5 细胞培养 | 第15-18页 |
5.1 细胞复苏 | 第15-16页 |
5.2 细胞传代 | 第16页 |
5.3 细胞收集 | 第16-17页 |
5.4 细胞冻存 | 第17页 |
5.5 细胞计数 | 第17-18页 |
6 实验分组 | 第18页 |
7 Linc-ROR siRNA的转染 | 第18-19页 |
7.1 转染步骤 | 第18页 |
7.2 筛选最佳的Linc-ROR siRNA | 第18-19页 |
8 过度表达Linc-ROR基因质粒的转染 | 第19页 |
9 qRT-PCR法检测组织及细胞中Linc-ROR mRNA表达量 | 第19-21页 |
9.1 Trizol法提取组织或细胞总RNA | 第19-20页 |
9.2 cDNA的合成 | 第20页 |
9.3 Real-time PCR反应 | 第20-21页 |
10 CCK-8 法检测各组SKOV3细胞的增殖情况 | 第21页 |
11 体外细胞划痕实验检测各组SKOV3细胞的迁移能力 | 第21页 |
12 Transwell小室侵袭实验检测各组SKOV3细胞的侵袭能力 | 第21-22页 |
13 CCK-8 法检测LiCl对SKOV3细胞增殖的影响 | 第22页 |
14 蛋白印迹实验(Western blot)检测各组中E-cadherin、β-catenin、vimentin和c-myc蛋白的表达 | 第22-25页 |
14.1 细胞总蛋白的提取 | 第22-23页 |
14.2 蛋白浓度的测定 | 第23页 |
14.3 蛋白变性 | 第23页 |
14.4 SDS-PAGE电泳 | 第23-24页 |
14.5 转膜 | 第24页 |
14.6 免疫印迹显色 | 第24-25页 |
14.7 结果分析 | 第25页 |
15 Western blot法检测Linc-ROR siRNA对LiCl引起的SKOV3细胞中E-cadherin、β-catenin、vimentin和c-myc蛋白表达变化的影响 | 第25页 |
16 统计学方法 | 第25-26页 |
结果 | 第26-34页 |
1 高级别卵巢浆液性癌组织中Linc-ROR mRNA的表达 | 第26-27页 |
2 转染后各组SKOV3细胞中Linc-ROR mRNA的表达 | 第27-28页 |
3 转染后4组SKOV3细胞的增殖情况 | 第28页 |
4 转染后4组SKOV3细胞的迁移和侵袭能力 | 第28-30页 |
5 转染后4组SKOV3细胞E-cadherin、β-catenin、vimentin和c-myc蛋白的表达 | 第30-31页 |
6 LiCl对SKOV3细胞增殖的影响 | 第31-32页 |
7 Linc-ROR siRNA对LiCl引起的SKOV3细胞中E-cadherin、β-catenin、vimentin和c-myc蛋白表达变化的影响 | 第32-34页 |
讨论 | 第34-39页 |
1 Linc–ROR与卵巢癌 | 第34-35页 |
2 Linc-ROR诱导EMT的发生 | 第35-36页 |
3 Wnt/β-catenin通路在Linc-ROR诱导EMT中的作用 | 第36-37页 |
4 问题与展望 | 第37-39页 |
结论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-43页 |
综述 | 第43-54页 |
综述参考文献 | 第51-54页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第54-55页 |
附录 英文缩写对照表 | 第55-57页 |
致谢 | 第57-58页 |