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长链非编码RNA-ROR通过Wnt通路诱导高级别卵巢癌EMT特性的机制研究

摘要第2-4页
Abstract第4-5页
引言第9-11页
材料与方法第11-26页
    1 实验材料第11页
        1.1 组织标本第11页
        1.2 实验细胞株第11页
    2 实验仪器第11-12页
    3 实验试剂第12-14页
        3.1 siRNA第12页
        3.2 质粒第12-13页
        3.3 实时荧光定量PCR引物第13页
        3.4 Western blot试剂第13-14页
        3.5 其他主要试剂第14页
    4 实验试剂配制第14-15页
    5 细胞培养第15-18页
        5.1 细胞复苏第15-16页
        5.2 细胞传代第16页
        5.3 细胞收集第16-17页
        5.4 细胞冻存第17页
        5.5 细胞计数第17-18页
    6 实验分组第18页
    7 Linc-ROR siRNA的转染第18-19页
        7.1 转染步骤第18页
        7.2 筛选最佳的Linc-ROR siRNA第18-19页
    8 过度表达Linc-ROR基因质粒的转染第19页
    9 qRT-PCR法检测组织及细胞中Linc-ROR mRNA表达量第19-21页
        9.1 Trizol法提取组织或细胞总RNA第19-20页
        9.2 cDNA的合成第20页
        9.3 Real-time PCR反应第20-21页
    10 CCK-8 法检测各组SKOV3细胞的增殖情况第21页
    11 体外细胞划痕实验检测各组SKOV3细胞的迁移能力第21页
    12 Transwell小室侵袭实验检测各组SKOV3细胞的侵袭能力第21-22页
    13 CCK-8 法检测LiCl对SKOV3细胞增殖的影响第22页
    14 蛋白印迹实验(Western blot)检测各组中E-cadherin、β-catenin、vimentin和c-myc蛋白的表达第22-25页
        14.1 细胞总蛋白的提取第22-23页
        14.2 蛋白浓度的测定第23页
        14.3 蛋白变性第23页
        14.4 SDS-PAGE电泳第23-24页
        14.5 转膜第24页
        14.6 免疫印迹显色第24-25页
        14.7 结果分析第25页
    15 Western blot法检测Linc-ROR siRNA对LiCl引起的SKOV3细胞中E-cadherin、β-catenin、vimentin和c-myc蛋白表达变化的影响第25页
    16 统计学方法第25-26页
结果第26-34页
    1 高级别卵巢浆液性癌组织中Linc-ROR mRNA的表达第26-27页
    2 转染后各组SKOV3细胞中Linc-ROR mRNA的表达第27-28页
    3 转染后4组SKOV3细胞的增殖情况第28页
    4 转染后4组SKOV3细胞的迁移和侵袭能力第28-30页
    5 转染后4组SKOV3细胞E-cadherin、β-catenin、vimentin和c-myc蛋白的表达第30-31页
    6 LiCl对SKOV3细胞增殖的影响第31-32页
    7 Linc-ROR siRNA对LiCl引起的SKOV3细胞中E-cadherin、β-catenin、vimentin和c-myc蛋白表达变化的影响第32-34页
讨论第34-39页
    1 Linc–ROR与卵巢癌第34-35页
    2 Linc-ROR诱导EMT的发生第35-36页
    3 Wnt/β-catenin通路在Linc-ROR诱导EMT中的作用第36-37页
    4 问题与展望第37-39页
结论第39-40页
参考文献第40-43页
综述第43-54页
    综述参考文献第51-54页
攻读学位期间的研究成果第54-55页
附录 英文缩写对照表第55-57页
致谢第57-58页

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