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姜黄素类似物XL通过靶向SERCA2(Ca2+-ATPase2)治疗结肠癌

摘要第6-9页
Abstract第9-11页
绪言第12-18页
    References第14-18页
第一章 姜黄素类似物XL诱导人结肠癌细胞ER-stress相关的凋亡与G2/M周期阻滞第18-31页
    1、绪言第18-19页
    2、实验材料与方法第19-22页
        2.1 药品与剂试第19-20页
        2.2 仪器与耗材第20页
        2.3 细胞培养第20页
        2.4 MTT法测定细胞增殖第20页
        2.5 免疫印迹分析(Western blotting)第20-21页
        2.6 Hochest染色第21页
        2.7 流式细胞仪检测SW480细胞表面死亡受体DR5和FAS的表达第21-22页
        2.8 流式细胞仪检测SW480细胞分裂周期变化第22页
        2.9 统计分析第22页
    3、实验结果第22-28页
        3.1 XL对多种人结肠癌细胞和正常结肠上皮细胞增殖的影响第22-24页
        3.2 XL诱导SW480细胞ER-sress相关的凋亡第24-27页
        3.3 XL诱导SW480细胞ER-sress相关的G2/M周期阻滞第27-28页
    4、讨论第28-29页
    5、小结第29页
    6. References第29-31页
第二章、XL通过诱导ER-stress抑制小鼠异种移植瘤的进展第31-39页
    1、绪言第31页
    2、实验材料与方法第31-33页
        2.1 药品与试剂第31页
        2.2 仪器和耗材第31页
        2.3 实验动物第31-32页
        2.4 SW480荷瘤鼠模型构建及分组第32页
        2.5 给药及观察第32页
        2.6 组织Ca~(2+)-ATPase酶活性检测第32页
        2.7 HE染色第32页
        2.8 TUNEL染色第32-33页
        2.9 免疫印记分析第33页
        2.10 免疫组化检测肿瘤组织CD31的表达第33页
        2.11 统计学处理第33页
    3、实验结果第33-37页
        3.1 XL抑制小鼠异种移植瘤的生长第33-34页
        3.2 XL增强肿瘤组织内细胞凋亡及相关信号第34-36页
        3.3 XL给药组的小鼠肿瘤组织Ca~(2+)-ATPase酶活性被显著抑制第36页
        3.4 XL抑制小鼠肿瘤组织的血管生成第36-37页
    4、讨论第37页
    5、小结第37-38页
    6、References第38-39页
第三章、XL靶向结合SERCA2并抑制其Ca~(2+)-ATPase酶活性第39-56页
    1、绪言第39页
    2、实验材料与方法第39-43页
        2.1 药品与试剂第39-40页
        2.2 仪器和耗材第40页
        2.3 细胞培养第40页
        2.4 荧光共聚焦检测XL在细胞中的定位第40页
        2.5 细胞的Ca~(2+)-ATPase酶活性检测第40-41页
        2.6 胞浆钙离子浓度测定第41页
        2.7 总RNA提取及Real-time quantitative PCR检测mRNA表达第41-42页
        2.8 免疫印迹分析(Western blotting)第42页
        2.9 SERCA2b双突变体表达质粒和siRNA的构建第42-43页
    3、实验结果第43-52页
        3.1 XL抑制SW480细胞Ca~(2+)-ATPase的活性第43页
        3.2 XL促使细胞浆中钙离子浓度持续升高第43-44页
        3.3 XL不影响SW480细胞SERCA2表达第44-46页
        3.4 在SW480细胞中XL与SERCA2共定位第46-47页
        3.5 过表达或者干扰SERCA2降低SW480细胞对XL的敏感性第47-48页
        3.6 Autodocking结果表明XL与SERCA2的结合于新的位点第48-50页
        3.7 XL与SERCA抑制剂毒胡萝卜素对SW480细胞增殖抑制具有协同作用第50-51页
        3.8 针对XL结合位点的SERCA2突变体不能逆转XL的细胞毒性第51-52页
    4、讨论第52-54页
    5、小结第54页
    6、References第54-56页
结语第56-57页
附录一 主要缩略词语表第57-58页
附录二 硕士期间待发表论文第58-59页
致谢第59-60页

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