摘要 | 第6-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
绪言 | 第12-18页 |
References | 第14-18页 |
第一章 姜黄素类似物XL诱导人结肠癌细胞ER-stress相关的凋亡与G2/M周期阻滞 | 第18-31页 |
1、绪言 | 第18-19页 |
2、实验材料与方法 | 第19-22页 |
2.1 药品与剂试 | 第19-20页 |
2.2 仪器与耗材 | 第20页 |
2.3 细胞培养 | 第20页 |
2.4 MTT法测定细胞增殖 | 第20页 |
2.5 免疫印迹分析(Western blotting) | 第20-21页 |
2.6 Hochest染色 | 第21页 |
2.7 流式细胞仪检测SW480细胞表面死亡受体DR5和FAS的表达 | 第21-22页 |
2.8 流式细胞仪检测SW480细胞分裂周期变化 | 第22页 |
2.9 统计分析 | 第22页 |
3、实验结果 | 第22-28页 |
3.1 XL对多种人结肠癌细胞和正常结肠上皮细胞增殖的影响 | 第22-24页 |
3.2 XL诱导SW480细胞ER-sress相关的凋亡 | 第24-27页 |
3.3 XL诱导SW480细胞ER-sress相关的G2/M周期阻滞 | 第27-28页 |
4、讨论 | 第28-29页 |
5、小结 | 第29页 |
6. References | 第29-31页 |
第二章、XL通过诱导ER-stress抑制小鼠异种移植瘤的进展 | 第31-39页 |
1、绪言 | 第31页 |
2、实验材料与方法 | 第31-33页 |
2.1 药品与试剂 | 第31页 |
2.2 仪器和耗材 | 第31页 |
2.3 实验动物 | 第31-32页 |
2.4 SW480荷瘤鼠模型构建及分组 | 第32页 |
2.5 给药及观察 | 第32页 |
2.6 组织Ca~(2+)-ATPase酶活性检测 | 第32页 |
2.7 HE染色 | 第32页 |
2.8 TUNEL染色 | 第32-33页 |
2.9 免疫印记分析 | 第33页 |
2.10 免疫组化检测肿瘤组织CD31的表达 | 第33页 |
2.11 统计学处理 | 第33页 |
3、实验结果 | 第33-37页 |
3.1 XL抑制小鼠异种移植瘤的生长 | 第33-34页 |
3.2 XL增强肿瘤组织内细胞凋亡及相关信号 | 第34-36页 |
3.3 XL给药组的小鼠肿瘤组织Ca~(2+)-ATPase酶活性被显著抑制 | 第36页 |
3.4 XL抑制小鼠肿瘤组织的血管生成 | 第36-37页 |
4、讨论 | 第37页 |
5、小结 | 第37-38页 |
6、References | 第38-39页 |
第三章、XL靶向结合SERCA2并抑制其Ca~(2+)-ATPase酶活性 | 第39-56页 |
1、绪言 | 第39页 |
2、实验材料与方法 | 第39-43页 |
2.1 药品与试剂 | 第39-40页 |
2.2 仪器和耗材 | 第40页 |
2.3 细胞培养 | 第40页 |
2.4 荧光共聚焦检测XL在细胞中的定位 | 第40页 |
2.5 细胞的Ca~(2+)-ATPase酶活性检测 | 第40-41页 |
2.6 胞浆钙离子浓度测定 | 第41页 |
2.7 总RNA提取及Real-time quantitative PCR检测mRNA表达 | 第41-42页 |
2.8 免疫印迹分析(Western blotting) | 第42页 |
2.9 SERCA2b双突变体表达质粒和siRNA的构建 | 第42-43页 |
3、实验结果 | 第43-52页 |
3.1 XL抑制SW480细胞Ca~(2+)-ATPase的活性 | 第43页 |
3.2 XL促使细胞浆中钙离子浓度持续升高 | 第43-44页 |
3.3 XL不影响SW480细胞SERCA2表达 | 第44-46页 |
3.4 在SW480细胞中XL与SERCA2共定位 | 第46-47页 |
3.5 过表达或者干扰SERCA2降低SW480细胞对XL的敏感性 | 第47-48页 |
3.6 Autodocking结果表明XL与SERCA2的结合于新的位点 | 第48-50页 |
3.7 XL与SERCA抑制剂毒胡萝卜素对SW480细胞增殖抑制具有协同作用 | 第50-51页 |
3.8 针对XL结合位点的SERCA2突变体不能逆转XL的细胞毒性 | 第51-52页 |
4、讨论 | 第52-54页 |
5、小结 | 第54页 |
6、References | 第54-56页 |
结语 | 第56-57页 |
附录一 主要缩略词语表 | 第57-58页 |
附录二 硕士期间待发表论文 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |