| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略词 | 第9-11页 |
| 目录 | 第11-15页 |
| 1 引言 | 第15-17页 |
| 2 文献综述 | 第17-28页 |
| 2.1 大叶落地生根的概况 | 第17-19页 |
| 2.1.1 大叶落地生根的来源 | 第17-18页 |
| 2.1.2 大叶落地生根的形态特征 | 第18-19页 |
| 2.1.3 大叶落地生根的栽培繁殖管理 | 第19页 |
| 2.2 伽蓝菜属的分类情况 | 第19-20页 |
| 2.3 大叶落地生根的研究价值 | 第20-22页 |
| 2.3.1 观赏价值 | 第20页 |
| 2.3.2 经济价值 | 第20页 |
| 2.3.3 教学价值 | 第20-21页 |
| 2.3.4 景天酸代谢(CAM)研究模型 | 第21页 |
| 2.3.5 药用价值 | 第21-22页 |
| 2.3.6 抗病虫价值 | 第22页 |
| 2.4 胎生苗模型研究价值 | 第22-25页 |
| 2.4.1 胚胎发生途径的特征 | 第23-24页 |
| 2.4.2 器官发生途径的特征 | 第24页 |
| 2.4.3 胎生苗发生发育过程中基因表达和基因功能 | 第24-25页 |
| 2.5 本研究的目的和内容 | 第25-28页 |
| 2.5.1 研究的目的意义 | 第25-26页 |
| 2.5.2 研究内容 | 第26页 |
| 2.5.3 技术路线 | 第26-28页 |
| 3 生长素和细胞分裂素在大叶落地生根胎生苗发生发育过程中的作用 | 第28-41页 |
| 3.1 实验材料及处理 | 第28-30页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第28页 |
| 3.1.2 植物激素的配置 | 第28-29页 |
| 3.1.3 试验处理 | 第29页 |
| 3.1.4 确定胎生苗发生位置 | 第29-30页 |
| 3.1.5 数据统计 | 第30页 |
| 3.2 结果与分析 | 第30-38页 |
| 3.2.1 胎生苗发生位置 | 第30-31页 |
| 3.2.2 不同激素处理诱导产生的胎生苗的表型差异 | 第31-33页 |
| 3.2.3 以完整叶片作为外植体在不同激素处理下诱导产生胎生苗的时间和数量差异 | 第33-35页 |
| 3.2.4 以切割叶片作为外植体在不同激素处理下诱导产生胎生苗的时间和数量差异 | 第35-37页 |
| 3.2.5 不同激素处理对胎生苗发育的影响 | 第37-38页 |
| 3.3 讨论 | 第38-39页 |
| 3.4 小结 | 第39-41页 |
| 4 大叶落地生根胎生苗差减文库的构建及差异基因的表达分析 | 第41-63页 |
| 4.1 实验材料及处理 | 第42-44页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第42页 |
| 4.1.2 主要酶与试剂 | 第42页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第42-43页 |
| 4.1.4 常用培养基 | 第43页 |
| 4.1.5 Real-time PCR引物的设计 | 第43-44页 |
| 4.2 实验方法 | 第44-46页 |
| 4.2.1 总RNA的提取 | 第44页 |
| 4.2.2 mRNA的分离纯化 | 第44页 |
| 4.2.3 cDNA的合成和RsaI的酶切 | 第44页 |
| 4.2.4 SSH差减文库的构建 | 第44-45页 |
| 4.2.5 测序和生物信息学分析 | 第45页 |
| 4.2.6 荧光定量PCR分析差异基因的表达 | 第45-46页 |
| 4.3 结果与分析 | 第46-59页 |
| 4.3.1 叶片总RNA的完整性及mRNA分离纯化 | 第46-47页 |
| 4.3.2 最佳循环数的优化 | 第47-48页 |
| 4.3.3 cDNA的纯化 | 第48-49页 |
| 4.3.4 RsaⅠ酶切后纯化效率检测 | 第49-50页 |
| 4.3.5 抑制性差减杂交效率分析 | 第50-51页 |
| 4.3.6 差减cDNA文库的构建及阳性克隆的筛选 | 第51-52页 |
| 4.3.7 差减文库的的序列分析 | 第52-56页 |
| 4.3.8 差异基因的表达分析 | 第56-59页 |
| 4.4 讨论 | 第59-62页 |
| 4.4.1 叶片总RNA及mRNA的分离纯化 | 第59-60页 |
| 4.4.2 差减cDNA文库的可靠性 | 第60-61页 |
| 4.4.3 胎生苗无性繁殖过程中涉及到的基因 | 第61-62页 |
| 4.5 小结 | 第62-63页 |
| 5 胎生苗无性繁殖中相关基因的克隆和生物信息学分析 | 第63-106页 |
| 5.1 实验材料及处理 | 第63-64页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第63页 |
| 5.1.2 主要酶与试剂 | 第63-64页 |
| 5.1.3 主要仪器设备 | 第64页 |
| 5.1.4 常用培养基 | 第64页 |
| 5.2 实验方法 | 第64-80页 |
| 5.2.1 总RNA的提取 | 第64页 |
| 5.2.2 组氨醇脱氢酶(histidinol dehydrogenase；KdHDH)基因的克隆 | 第64-71页 |
| 5.2.3 谷胱甘肽s-转移酶(glutathione S-transferase；KdGST)基因的克隆 | 第71-72页 |
| 5.2.4 谷氨酸脱羧酶(Glutamate decarboxylase;KdGAD)基因的克隆 | 第72-73页 |
| 5.2.5 细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶(cyclin dependent kinase；KdCDK)基因的克隆 | 第73-74页 |
| 5.2.6 F-Box家族蛋白(F-box family protein；KdF-box)基因的克隆 | 第74-75页 |
| 5.2.7 S-腺苷高半胱氨酸水解酶(S-adenosylhomocystrine hydrolase:KdSAHH)基因的克隆 | 第75-79页 |
| 5.2.8 获得序列的生物信息学分析 | 第79-80页 |
| 5.3 结果与分析 | 第80-104页 |
| 5.3.1 组氨醇脱氢酶(KdHDH)基因克隆与生物信息学分析 | 第80-84页 |
| 5.3.2 谷胱甘肽s-转移酶(KdGST)基因克隆与生物信息学分析 | 第84-88页 |
| 5.3.3 谷氨酸脱羧酶(KdGAD)基因克隆与生物信息学分析 | 第88-92页 |
| 5.3.4 细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶(KdCDK)基因克隆与生物信息学分析 | 第92-96页 |
| 5.3.5 F-Box家族蛋白(KdF-box)基因克隆与生物信息学分析 | 第96-100页 |
| 5.3.6 S-腺苷高半胱氨酸水解酶(KdSAHH)基因克隆与生物信息学分析 | 第100-104页 |
| 5.4 讨论 | 第104-105页 |
| 5.5 小结 | 第105-106页 |
| 6 大叶落地生根KdSAHH基因对烟草和大叶落地生根的转化 | 第106-124页 |
| 6.1 实验材料及处理 | 第107-108页 |
| 6.1.1 植物材料 | 第107页 |
| 6.1.2 主要酶与试剂 | 第107页 |
| 6.1.3 植物表达载体 | 第107页 |
| 6.1.4 主要设备 | 第107页 |
| 6.1.5 主要培养基 | 第107-108页 |
| 6.2 实验方法 | 第108-117页 |
| 6.2.1 KdSAHH基因超表达载体的构建 | 第108-111页 |
| 6.2.2 KdSAHH基因全长RNAi载体的构建 | 第111-116页 |
| 6.2.3 KdSAHH基因保守区RNAi载体的构建 | 第116页 |
| 6.2.4 农杆菌感受态的制备及质粒的转化鉴定 | 第116页 |
| 6.2.5 植物表达载体转化大叶落地生根 | 第116-117页 |
| 6.2.6 植物表达载体转化烟草 | 第117页 |
| 6.3 结果与分析 | 第117-122页 |
| 6.3.1 尤基因超表达载体的构建 | 第117-118页 |
| 6.3.2 基因全长RNAi载体的构建 | 第118-119页 |
| 6.3.3 足基因保守区RNAi载体的构建 | 第119-120页 |
| 6.3.4 植物表达载体转化大叶落地生根 | 第120-121页 |
| 6.3.5 植物表达载体转化烟草 | 第121-122页 |
| 6.4 讨论 | 第122-123页 |
| 6.5 小结 | 第123-124页 |
| 7 结论与展望 | 第124-127页 |
| 7.1 结论 | 第124页 |
| 7.2 创新点 | 第124-125页 |
| 7.3 展望 | 第125-127页 |
| 参考文献 | 第127-135页 |
| 附图 | 第135-136页 |
| 个人简介 | 第136-137页 |
| 获得成果目录 | 第137-138页 |
| 导师简介 | 第138-139页 |
| 致谢 | 第139-140页 |
