中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 绪论 | 第9-21页 |
1.1 引言 | 第9-10页 |
1.2 DNA电化学生物传感器 | 第10-15页 |
1.2.1 DNA电化学生物传感器的构成和工作原理 | 第10-11页 |
1.2.2 DNA电化学生物传感器的信号检测 | 第11-12页 |
1.2.3 DNA电化学生物传感器的应用 | 第12-14页 |
1.2.4 DNA电化学生物传感器的展望 | 第14-15页 |
1.3 DNA甲基化 | 第15-17页 |
1.3.1 DNA甲基化的分析方法 | 第16-17页 |
1.3.2 DNA甲基化分析在癌症诊断和治疗中的应用 | 第17页 |
1.4 外泌体 | 第17-20页 |
1.4.1 外泌体的生物学意义 | 第18-19页 |
1.4.2 外泌体的分离与检测 | 第19-20页 |
1.5 本论文的指导思想 | 第20-21页 |
第二章 基于内切酶特异性剪切的DNA电化学生物传感器检测人类DNA甲基转移酶(DNMT1)的活性 | 第21-34页 |
2.1 引言 | 第21-22页 |
2.2 实验部分 | 第22-24页 |
2.2.1 试剂 | 第22-23页 |
2.2.2 仪器 | 第23页 |
2.2.3 细胞培养和DNMT1提取 | 第23页 |
2.2.4 金纳米粒子连接DNA复合物(Au NP-DNA Complexes)的制备 | 第23-24页 |
2.2.5 探针DNA的固定及杂交 | 第24页 |
2.2.6 电化学表征与检测 | 第24页 |
2.3 结果与讨论 | 第24-32页 |
2.3.1 DNMT1活性检测的原理 | 第24-26页 |
2.3.2 Au NPs和Au NPs-DNA Complexes的表征 | 第26页 |
2.3.3 实验可行性分析 | 第26-29页 |
2.3.4 Au NPs上连接的S2、S3的比例优化 | 第29-30页 |
2.3.5 DNMT1的活性检测 | 第30-31页 |
2.3.6 细胞裂解液中DNMT1的活性检测 | 第31-32页 |
2.3.7 DN-MT1活性和不同细胞系的DNMT1总蛋白含量评估 | 第32页 |
2.4 结论 | 第32-34页 |
第三章 基于核酸外切酶Ⅲ循环剪切作用辅助信号放大方法检测LNCaP细胞来源的外泌体 | 第34-47页 |
3.1 引言 | 第34-36页 |
3.2 实验部分 | 第36-40页 |
3.2.1 试剂 | 第36-37页 |
3.2.2 仪器 | 第37-38页 |
3.2.3 细胞培养和外泌体提取 | 第38页 |
3.2.4 外泌体的定量 | 第38-39页 |
3.2.5 磁珠与Aptamers的连接 | 第39页 |
3.2.6 探针DNA的固定 | 第39-40页 |
3.2.7 外泌体与Aptamers的作用 | 第40页 |
3.2.8 电化学表征与检测 | 第40页 |
3.3 结果与讨论 | 第40-46页 |
3.3.1 外泌体的TEM表征 | 第40-41页 |
3.3.2 Aptamers与MBs连接的紫外吸收表征 | 第41页 |
3.3.3 实验可行性分析 | 第41-43页 |
3.3.4 探针DNA浓度优化 | 第43页 |
3.3.5 核酸外切酶Ⅲ作用时间优化 | 第43-44页 |
3.3.6 人前列腺癌细胞外泌体的检测 | 第44-45页 |
3.3.7 选择性分析 | 第45页 |
3.3.8 复杂体系中外泌体的检测 | 第45-46页 |
3.4 结论 | 第46-47页 |
第四章 结论及主要创新点 | 第47-49页 |
参考文献 | 第49-64页 |
在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第64-65页 |
致谢 | 第65页 |