摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
1 文献综述 | 第11-21页 |
1.1 细根的生态功能 | 第11-12页 |
1.2 森林植物多样性与细根产量关系 | 第12-13页 |
1.3 细根树种归属识别方法 | 第13-19页 |
1.3.1 人工识别法 | 第13-14页 |
1.3.2 染色法 | 第14-15页 |
1.3.3 近红外光谱识别法 | 第15-16页 |
1.3.4 同位素法识别 | 第16页 |
1.3.5 生物化学的方法 | 第16-17页 |
1.3.6 同工酶法 | 第17页 |
1.3.7 分子生物学方法 | 第17-19页 |
1.4 研究背景和需要解决的关键问题 | 第19-21页 |
1.4.1 研究背景 | 第19-20页 |
1.4.2 关键问题 | 第20-21页 |
2 研究区概况 | 第21-22页 |
3 研究方法 | 第22-32页 |
3.1 研究思路与实验流程图 | 第22-24页 |
3.1.1 研究思路 | 第22页 |
3.1.2 实验流程图 | 第22-24页 |
3.2 样品采集 | 第24页 |
3.3 DNA提取 | 第24-25页 |
3.3.1 单个树种DNA提取 | 第24页 |
3.3.2 混合树种细根DNA提取 | 第24-25页 |
3.4 PCR扩增 | 第25-26页 |
3.4.1 PCR的扩增试剂 | 第25页 |
3.4.2 PCR反应体系 | 第25-26页 |
3.5 PCR产物中目的片段回收 | 第26-27页 |
3.6 将目的片段克隆到T载体上 | 第27页 |
3.7 含有目的片段的T载体转化大肠杆菌 | 第27-28页 |
3.7.1 DH5α感受态细胞制作过程 | 第27页 |
3.7.2 转化流程 | 第27-28页 |
3.8 蓝白斑筛选阳性克隆 | 第28页 |
3.9 测序 | 第28-29页 |
3.10 数据处理 | 第29-30页 |
3.10.1 运用GENEDOC软件对比扩增的trnL(UAA)序列 | 第29页 |
3.10.2 trnL(UAA)序列在NCBI中的Blast | 第29页 |
3.10.3 应用Primer 5.0软件设计目的基因的引物 | 第29-30页 |
3.11 野外样地土壤混合细根识别与定量 | 第30-32页 |
4 结果与分析 | 第32-43页 |
4.1 树种识别 | 第32-34页 |
4.1.1 DNA提取 | 第32页 |
4.1.2 同一树种的叶片和细根trnL(UAA)序列对比 | 第32页 |
4.1.3 不同树种间的trnL(UAA)序列对比 | 第32-33页 |
4.1.4 12个树种trnL(UAA)序列在NCBI中的Blast | 第33-34页 |
4.2 混合样品比例的定量估算 | 第34-40页 |
4.2.1 2个树种的混合样品定量估算 | 第34-36页 |
4.2.2 3个树种的混合样品定量估算 | 第36-40页 |
4.3 不同树种丛细根组成识别 | 第40-43页 |
4.3.1 树种归属识别 | 第41-42页 |
4.3.2 各树种所占比例预测 | 第42-43页 |
5 讨论 | 第43-49页 |
5.1 通过trnL(UAA)序列差异识别树种 | 第43页 |
5.2 采用trnL(UAA)序列差异估算混合样品中的细根比例 | 第43-45页 |
5.3 影响因素 | 第45-46页 |
5.4 野外混合细根识别 | 第46-49页 |
6 结论与展望 | 第49-52页 |
6.1 结论 | 第49-50页 |
6.2 创新点 | 第50页 |
6.3 展望 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-60页 |
附录 (攻读学位期间的主要学术成果) | 第60-61页 |
致谢 | 第61页 |