| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 文献综述 | 第10-18页 |
| 1.1 油菜菌核病和核盘菌的研究进展 | 第10-15页 |
| 1.1.1 油菜菌核病的危害及其防治 | 第10-12页 |
| 1.1.2 核盘菌的研究进展 | 第12-15页 |
| 1.2 蛋白激发子的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.3 生物信息学研究进展 | 第16-18页 |
| 2 引言 | 第18-19页 |
| 3 材料与方法 | 第19-30页 |
| 3.1 供试材料 | 第19页 |
| 3.1.1 供试菌株 | 第19页 |
| 3.1.2 供试植株 | 第19页 |
| 3.1.3 化学试剂 | 第19页 |
| 3.1.4 供试载体 | 第19页 |
| 3.1.5 仪器设备 | 第19页 |
| 3.1.6 常用缓冲溶液和培养基 | 第19页 |
| 3.2 供试方法 | 第19-30页 |
| 3.2.1 核盘菌NGA4菌丝总DNA和RNA的提取及cDNA的制备 | 第19-21页 |
| 3.2.2 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备及酶连、转化 | 第21页 |
| 3.2.3 SsPemG1基因的克隆和测序 | 第21页 |
| 3.2.4 SsPemG1生物信息学预测 | 第21-23页 |
| 3.2.5 SsPemG1在核盘菌无性生活史各阶段相对表达量的测定 | 第23页 |
| 3.2.6 沉默载体的构建和大提质粒 | 第23-25页 |
| 3.2.7 PEG介导的原生质体转化 | 第25-26页 |
| 3.2.8 SsPemG1沉默突变体的筛选 | 第26页 |
| 3.2.9 SsPemG1沉默突变体的表型分析 | 第26-30页 |
| 4 结果与分析 | 第30-45页 |
| 4.1 SsPemG1基因的克隆和测序 | 第30-31页 |
| 4.2 生物信息学预测结果 | 第31-35页 |
| 4.2.1 SsPemG1蛋白基本性质 | 第31-32页 |
| 4.2.2 SsPemG1结构域预测 | 第32-33页 |
| 4.2.3 SsPemG1蛋白亚细胞定位分析 | 第33页 |
| 4.2.4 SsPemG1互作蛋白预测 | 第33-34页 |
| 4.2.5 多序列比对及系统发育树构建 | 第34-35页 |
| 4.3 SsPemG1基因在核盘菌无性生活史各阶段相对表达分析 | 第35-36页 |
| 4.4 SsPemG1-pSilent-1 载体的构建与验证 | 第36-37页 |
| 4.5 SsPemG1沉默转化子的筛选与验证 | 第37-38页 |
| 4.6 SsPemG1沉默突变体生长表型及菌核发育观察 | 第38-39页 |
| 4.7 SsPemG1沉默对形成侵染垫和SsGgt1基因表达的影响 | 第39-40页 |
| 4.8 SsPemG1沉默突变体对五种胁迫因子的耐受性分析 | 第40-41页 |
| 4.9 SsPemG1沉默突变体草酸、果胶酶、纤维素酶及蛋白酶测定 | 第41-42页 |
| 4.10 SsPemG1沉默对核盘菌NGA4致病力的影响 | 第42-43页 |
| 4.11 其他致病相关基因的相对表达量的测定 | 第43-45页 |
| 5 小结与讨论 | 第45-47页 |
| 5.1 全文小结 | 第45页 |
| 5.2 讨论 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 附录A 化学试剂和仪器设备 | 第57-58页 |
| 附录B 常用缓冲溶液和培养基 | 第58-60页 |
| 附录C 部分实验步骤 | 第60-64页 |
| 作者简介 | 第64页 |
