| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 引言 | 第8-12页 |
| 第一部分 寨卡病毒NS2B_H-NS3pro蛋白酶复合物的原核表达及纯化 | 第12-32页 |
| 1.1 材料 | 第12-17页 |
| 1.1.1 菌株 | 第12页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第12页 |
| 1.1.3 主要需配制的试剂 | 第12-17页 |
| 1.1.4 主要仪器设备 | 第17页 |
| 1.2 方法 | 第17-25页 |
| 1.2.1 目的基因的合成 | 第17-21页 |
| 1.2.2 pET-28b-NS2B_H-G4TG4-NS3pro原核表达载体构建 | 第21页 |
| 1.2.3 工程菌制备及转化产物鉴定 | 第21-23页 |
| 1.2.4 重组质粒提取 | 第23页 |
| 1.2.5 重组质粒序列分析 | 第23页 |
| 1.2.6 IPTG诱导重组质粒表达 | 第23-24页 |
| 1.2.7 表达产物SDS-PAGE分析 | 第24页 |
| 1.2.8 重组蛋白的纯化 | 第24页 |
| 1.2.9 BCA测定纯化蛋白浓度 | 第24-25页 |
| 1.2.10 纯化蛋白的透析除盐 | 第25页 |
| 1.3 结果 | 第25-30页 |
| 1.3.1 重叠PCR扩增产物的电泳 | 第25-27页 |
| 1.3.2 菌落PCR扩增产物电泳 | 第27页 |
| 1.3.3 重组序列的测序 | 第27-28页 |
| 1.3.4 表达产物的SDS-PAGE分析 | 第28-29页 |
| 1.3.5 纯化蛋白的SDS-PAGE分析 | 第29页 |
| 1.3.6 BCA测定纯化蛋白浓度 | 第29-30页 |
| 1.4 讨论 | 第30-32页 |
| 第二部分 寨卡病毒NS2B_H-NS3pro蛋白酶复合物的质谱鉴定及酶活性分析 | 第32-38页 |
| 1.1 材料 | 第32-33页 |
| 1.1.1 主要试剂 | 第32页 |
| 1.1.2 主要仪器及软件 | 第32页 |
| 1.1.3 主要需配制的试剂 | 第32-33页 |
| 1.2 方法 | 第33-34页 |
| 1.2.1 MALDI-TOF MS技术鉴定重组蛋白 | 第33页 |
| 1.2.2 重组蛋白酶活性检测 | 第33-34页 |
| 1.3 结果 | 第34-36页 |
| 1.3.1 MALDI-TOF MS鉴定结果 | 第34-35页 |
| 1.3.2 重组蛋白FRET检测结果 | 第35-36页 |
| 1.4 讨论 | 第36-38页 |
| 结语 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-43页 |
| 附录 | 第43-55页 |
| 附录1: NS2B_H-G4TG4-NS3pro测序图 | 第43-45页 |
| 附录2: 英文索位语 | 第45-46页 |
| 附录3: 综述 | 第46-55页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 在校期间发表论文情况 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 统计学审核证明 | 第57页 |
