| 致谢 | 第4-5页 |
| 中文摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 缩略词清单 | 第7-12页 |
| 第一部分 YAP-miR-130a-VGLL4形成正反馈回路促进肿瘤生长 | 第12-48页 |
| 1.1 引言 | 第12-18页 |
| 1.1.1 Hippo信号通路的发现和发展 | 第12-15页 |
| 1.1.2 Hippo信号通路中YAP的功能 | 第15-16页 |
| 1.1.3 VGLL4是YAP的竞争性抑制分子 | 第16-18页 |
| 1.2 材料和方法 | 第18-34页 |
| 1.2.1 实验器材与相关试剂 | 第18-25页 |
| 1.2.1.1 细胞 | 第18页 |
| 1.2.1.2 小鼠 | 第18页 |
| 1.2.1.3 质粒 | 第18-19页 |
| 1.2.1.4 抗体 | 第19页 |
| 1.2.1.5 siRNA, gRNA | 第19-20页 |
| 1.2.1.6 ChIP引物序列 | 第20-21页 |
| 1.2.1.7 主要仪器 | 第21页 |
| 1.2.1.8 主要试剂 | 第21-23页 |
| 1.2.1.9 主要溶液的配制 | 第23-25页 |
| 1.2.2 实验方法 | 第25-34页 |
| 1.2.2.1 质粒构建 | 第25-26页 |
| 1.2.2.2 细胞培养 | 第26-27页 |
| 1.2.2.3 细胞转染,感染与稳定细胞系的构建 | 第27-28页 |
| 1.2.2.4 RNA的提取、逆转录与实时荧光定量PCR | 第28-29页 |
| 1.2.2.5 免疫印迹 | 第29-31页 |
| 1.2.2.6 染色质免疫共沉淀实验(ChIP) | 第31-32页 |
| 1.2.2.7 荧光素酶报告基因实验 | 第32页 |
| 1.2.2.8 裸鼠荷瘤实验 | 第32-33页 |
| 1.2.2.9 流体动力注射小鼠模型(HDI) | 第33页 |
| 1.2.2.10 免疫组化 | 第33-34页 |
| 1.3 结果 | 第34-46页 |
| 1.3.1 miR-130a是YAP-TEAD的靶基因 | 第34-37页 |
| 1.3.1.1 miR-130a启动子的分析和相关引物设计 | 第34-35页 |
| 1.3.1.2 YAP-TEAD能结合在miR-130a的启动子上启动表达miR-130a | 第35-36页 |
| 1.3.1.3 YAP-TEAD通过TEAD结合元件结合在miR-130a启动子上 | 第36-37页 |
| 1.3.2 miR-130a通过降低VGLL4表达激活YAP | 第37-43页 |
| 1.3.2.1 靶点预测提示VGLL4可能是miR-130a的靶基因 | 第37-39页 |
| 1.3.2.2 突变VGLL4内源基因3'UTR上miR-130a结合位点上调VGLL4的蛋白水平 | 第39-41页 |
| 1.3.2.3 抑制miR-130a上调VGLL4的表达 | 第41-42页 |
| 1.3.2.4 miR-130a通过抑制VGLL4调控YAP靶基因表达 | 第42-43页 |
| 1.3.3 miR-130a激活YAP促进肿瘤生长 | 第43-46页 |
| 1.3.3.1 上调miR-130a的表达提高了YAP的致癌功能而抑制miR-130a减弱YAP的致癌功能 | 第43-44页 |
| 1.3.3.2 YAP-miR-130a-VGLL4形成的正反馈通路 | 第44-46页 |
| 1.4 讨论和结论 | 第46-48页 |
| 第二部分 二型丙酮酸激酶(PKM2)在肝癌中的失调研究 | 第48-62页 |
| 2.1 引言 | 第48-56页 |
| 2.1.1 肝癌发生和研究现状 | 第48-49页 |
| 2.1.2 PKM2与肿瘤形成和发展的关系 | 第49-56页 |
| 2.1.2.1 PKM2和糖酵解 | 第49-50页 |
| 2.1.2.2 肿瘤代谢异常与PKM2表达上调 | 第50-51页 |
| 2.1.2.3 新陈代谢中间产物对PKM2糖酵解过程的影响 | 第51-52页 |
| 2.1.2.4 由翻译后修饰调节PKM2的糖酵解活性 | 第52-53页 |
| 2.1.2.5 PKM研究的新进展 | 第53-56页 |
| 2.2 材料和方法(参照2.1中的材料和方法) | 第56页 |
| 2.3 结果 | 第56-61页 |
| 2.3.1 PKM2在人的肝癌样本中的表达提高 | 第56-57页 |
| 2.3.2 不同癌基因诱导的小鼠肝癌中丙酮酸激酶的表达出现多种变化 | 第57-61页 |
| 2.4 讨论和结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-73页 |
| 作者简历及在学期间所取得的科研成果 | 第73页 |
